【摘要】：目的第一部分:觀察和探討新型碳量子點(diǎn)熒光神經(jīng)示蹤劑CTB-CDs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的應(yīng)用效果;第二部分在建立尺神經(jīng)部分切除動物模型的基礎(chǔ)上對周圍神經(jīng)儲備功能的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行研究和闡述。方法第一部分:將新型碳量子點(diǎn)熒光神經(jīng)示蹤劑分別注射于大鼠坐骨神經(jīng)干及大鼠大腦的S1區(qū),通過相應(yīng)脊髓節(jié)段、背根神經(jīng)節(jié)及大腦組織取材切片,在熒光顯微鏡下觀察該神經(jīng)示蹤劑在中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的逆行示蹤效果。第二部分:首先使用微型玻璃針在顯微鏡下進(jìn)行大鼠尺神經(jīng)半切模型的建立,然后用真藍(lán)作為逆行神經(jīng)示蹤劑對尺神經(jīng)感覺及運(yùn)動神經(jīng)元進(jìn)行逆行示蹤,計(jì)數(shù)術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)被示蹤的神經(jīng)元數(shù)量及有髓神經(jīng)纖維數(shù)量、髓鞘厚度,并作相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1、新型神經(jīng)示蹤劑CTB-CDs注射于大腦S1區(qū)3天后在同側(cè)的丘腦區(qū)域可以見到明顯的熒光信號;2、CTB-CDs注射于坐骨神經(jīng)中段后5天后在同側(cè)的脊髓L3-L5平面及相應(yīng)的背根神經(jīng)節(jié)(DRG)均可觀察到被示蹤的神經(jīng)元具有較強(qiáng)的熒光信號;3、成功建立了大鼠尺神經(jīng)半切模型;4、正常尺神經(jīng)示蹤結(jié)果顯示運(yùn)動神經(jīng)元為112.0±9.2個(gè);半切后一周觀察到被示蹤的運(yùn)動神經(jīng)元數(shù)量變?yōu)?3.4±8.1個(gè);術(shù)后兩周時(shí)被示蹤的運(yùn)動神經(jīng)元數(shù)量增加到了36.8±9.7個(gè);而在術(shù)后四周時(shí)被示蹤的神經(jīng)元的數(shù)量可以恢復(fù)到86.8±13.5個(gè);觀察被示蹤的感覺神經(jīng)元的計(jì)數(shù)情況顯示對照組C8節(jié)段的神經(jīng)元數(shù)量/T1節(jié)段的神經(jīng)元數(shù)量為435.4±19.5個(gè)/433.8±19.1個(gè);而實(shí)驗(yàn)組術(shù)后一周計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)被示蹤的神經(jīng)元數(shù)量下降為340.0±12.7個(gè)/182.6±22.2個(gè);術(shù)后兩周時(shí)下降最明顯為80.2±4.1個(gè)/69.8±7.1個(gè);而在四周時(shí)發(fā)現(xiàn)被示蹤的神經(jīng)元數(shù)量有所增加,數(shù)值變?yōu)?34.0±28.1個(gè)/223.2±24.2個(gè)。對照組尺神經(jīng)近端有髓神經(jīng)纖維數(shù)量為109.8±9.7個(gè),術(shù)后一周實(shí)驗(yàn)組和術(shù)后兩周實(shí)驗(yàn)組均下降,并且其下降幅度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后四周有髓神經(jīng)纖維數(shù)量為97.4±6.9個(gè);對近端有髓神經(jīng)纖維髓鞘的厚度進(jìn)行測量發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組與對照組的髓鞘厚度無明顯差異。對照組尺神經(jīng)遠(yuǎn)端有髓神經(jīng)纖維數(shù)量為150.6±10.5個(gè);術(shù)后一周實(shí)驗(yàn)組有髓神經(jīng)纖維的數(shù)量驟減到16.4±12.5個(gè);組織切片觀察可見神經(jīng)的明顯脫髓鞘改變及大量的炎性細(xì)胞的浸潤。術(shù)后兩周實(shí)驗(yàn)組有髓神經(jīng)纖維出現(xiàn)明顯的洋蔥皮樣改變,有髓神經(jīng)纖維的數(shù)量依然處于非常低的水平。遠(yuǎn)端髓鞘厚度測量發(fā)現(xiàn)術(shù)后一周實(shí)驗(yàn)組較對照組厚度明顯減小,術(shù)后兩周實(shí)驗(yàn)組較術(shù)后一周實(shí)驗(yàn)組厚度也明顯的減小,術(shù)后四周實(shí)驗(yàn)組髓鞘厚度逐漸恢復(fù)至對照組水平,與正常情況下的髓鞘厚度無明顯差異。同時(shí)通過甲基藍(lán)染色可以觀察到神經(jīng)纖維大約有1/2面積基本恢復(fù)原有的形態(tài),神經(jīng)纖維的數(shù)量及髓鞘均恢復(fù)到與對照組相近的水平,而另1/2仍處于脫髓鞘狀態(tài)。結(jié)論1、新型神經(jīng)示蹤劑CTB-CDs作為一種可靠的、無毒性的、具有較強(qiáng)熒光信號的神經(jīng)示蹤劑對中樞神經(jīng)系統(tǒng)及周圍神經(jīng)系統(tǒng)均有較好的示蹤效果,并可在活體中使用;2、周圍神經(jīng)部分切斷后被切斷的神經(jīng)纖維兩側(cè)斷端可以通過旁路神經(jīng)纖維再次聯(lián)通,使原有神經(jīng)元與原有神經(jīng)纖維末端重新連接,其實(shí)質(zhì)可能是切斷的神經(jīng)纖維通過雙向軸突側(cè)支發(fā)芽途徑使原有的斷裂神經(jīng)纖維再次連接,這一結(jié)論可能是周圍神經(jīng)儲備功能的產(chǎn)生機(jī)制。
[Abstract]:Objective The first part : To observe and discuss the effect of new carbon quantum dot fluorescent nerve tracer CTB - CDs on central nervous system and peripheral nervous system . The original nerve fibers can be re - connected with the end of the original nerve fiber , and the essence of the nerve fibers is that the severed nerve fibers can be connected again through the bilateral axon collateral sprouting route , and the conclusion may be the generation mechanism of the peripheral nerve reserve function .
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R741

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本文編號：2123691