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新型神經示蹤劑CTB-CDs的應用及周圍神經儲備功能的研究

發(fā)布時間:2018-07-15 09:56
【摘要】:目的第一部分:觀察和探討新型碳量子點熒光神經示蹤劑CTB-CDs在中樞神經系統(tǒng)及周圍神經系統(tǒng)的應用效果;第二部分在建立尺神經部分切除動物模型的基礎上對周圍神經儲備功能的發(fā)生機制進行研究和闡述。方法第一部分:將新型碳量子點熒光神經示蹤劑分別注射于大鼠坐骨神經干及大鼠大腦的S1區(qū),通過相應脊髓節(jié)段、背根神經節(jié)及大腦組織取材切片,在熒光顯微鏡下觀察該神經示蹤劑在中樞及周圍神經系統(tǒng)的逆行示蹤效果。第二部分:首先使用微型玻璃針在顯微鏡下進行大鼠尺神經半切模型的建立,然后用真藍作為逆行神經示蹤劑對尺神經感覺及運動神經元進行逆行示蹤,計數術后不同時間點被示蹤的神經元數量及有髓神經纖維數量、髓鞘厚度,并作相關統(tǒng)計學分析。結果1、新型神經示蹤劑CTB-CDs注射于大腦S1區(qū)3天后在同側的丘腦區(qū)域可以見到明顯的熒光信號;2、CTB-CDs注射于坐骨神經中段后5天后在同側的脊髓L3-L5平面及相應的背根神經節(jié)(DRG)均可觀察到被示蹤的神經元具有較強的熒光信號;3、成功建立了大鼠尺神經半切模型;4、正常尺神經示蹤結果顯示運動神經元為112.0±9.2個;半切后一周觀察到被示蹤的運動神經元數量變?yōu)?3.4±8.1個;術后兩周時被示蹤的運動神經元數量增加到了36.8±9.7個;而在術后四周時被示蹤的神經元的數量可以恢復到86.8±13.5個;觀察被示蹤的感覺神經元的計數情況顯示對照組C8節(jié)段的神經元數量/T1節(jié)段的神經元數量為435.4±19.5個/433.8±19.1個;而實驗組術后一周計數發(fā)現被示蹤的神經元數量下降為340.0±12.7個/182.6±22.2個;術后兩周時下降最明顯為80.2±4.1個/69.8±7.1個;而在四周時發(fā)現被示蹤的神經元數量有所增加,數值變?yōu)?34.0±28.1個/223.2±24.2個。對照組尺神經近端有髓神經纖維數量為109.8±9.7個,術后一周實驗組和術后兩周實驗組均下降,并且其下降幅度具有統(tǒng)計學意義。術后四周有髓神經纖維數量為97.4±6.9個;對近端有髓神經纖維髓鞘的厚度進行測量發(fā)現實驗組與對照組的髓鞘厚度無明顯差異。對照組尺神經遠端有髓神經纖維數量為150.6±10.5個;術后一周實驗組有髓神經纖維的數量驟減到16.4±12.5個;組織切片觀察可見神經的明顯脫髓鞘改變及大量的炎性細胞的浸潤。術后兩周實驗組有髓神經纖維出現明顯的洋蔥皮樣改變,有髓神經纖維的數量依然處于非常低的水平。遠端髓鞘厚度測量發(fā)現術后一周實驗組較對照組厚度明顯減小,術后兩周實驗組較術后一周實驗組厚度也明顯的減小,術后四周實驗組髓鞘厚度逐漸恢復至對照組水平,與正常情況下的髓鞘厚度無明顯差異。同時通過甲基藍染色可以觀察到神經纖維大約有1/2面積基本恢復原有的形態(tài),神經纖維的數量及髓鞘均恢復到與對照組相近的水平,而另1/2仍處于脫髓鞘狀態(tài)。結論1、新型神經示蹤劑CTB-CDs作為一種可靠的、無毒性的、具有較強熒光信號的神經示蹤劑對中樞神經系統(tǒng)及周圍神經系統(tǒng)均有較好的示蹤效果,并可在活體中使用;2、周圍神經部分切斷后被切斷的神經纖維兩側斷端可以通過旁路神經纖維再次聯(lián)通,使原有神經元與原有神經纖維末端重新連接,其實質可能是切斷的神經纖維通過雙向軸突側支發(fā)芽途徑使原有的斷裂神經纖維再次連接,這一結論可能是周圍神經儲備功能的產生機制。
[Abstract]:Objective The first part : To observe and discuss the effect of new carbon quantum dot fluorescent nerve tracer CTB - CDs on central nervous system and peripheral nervous system . The original nerve fibers can be re - connected with the end of the original nerve fiber , and the essence of the nerve fibers is that the severed nerve fibers can be connected again through the bilateral axon collateral sprouting route , and the conclusion may be the generation mechanism of the peripheral nerve reserve function .
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R741

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10 李,

本文編號:2123691


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