【摘要】：目的研究重癥肌無(wú)力伴胸腺瘤（myasthenia gravis with thymoma，MGT）患者瘤旁胸腺與正常對(duì)照者胸腺microRNA的差異表達(dá)，預(yù)測(cè)篩選與MG相關(guān)的microRNAs，并探討miR-125a-5p與其靶基因FOXP3的調(diào)控關(guān)系。 方法收集MGT組瘤旁胸腺組織13例以及正常對(duì)照組胸腺組織13例，用miRNA基因芯片篩選兩組胸腺組織間差異表達(dá)的miRNA，用生物信息學(xué)方法結(jié)合芯片結(jié)果尋找與免疫相關(guān)的miRNA及其靶基因，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)尋找的miRNA及其靶基因在MGT組與NC組胸腺中的表達(dá)進(jìn)行定量分析，然后構(gòu)建野生型載體，將重組的載體轉(zhuǎn)入HEK293細(xì)胞中，再分別轉(zhuǎn)入Ncontrol或miRNA mimics，分為wide/Ncontrol;wide/miRNAmimics二組，然后分析相對(duì)熒光強(qiáng)度。 結(jié)果1. miRNA微陣列芯片結(jié)果顯示，相比NC組，MGT組胸腺內(nèi)顯著差異表達(dá)的miRNA有137個(gè)，miR-125a-5p是顯著上調(diào)中的一個(gè)(2.099579倍，P0.01)且與免疫相關(guān)。2.生物信息學(xué)預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)miR-125a-5p的靶基因可能是FOXP3。3.RT-PCR結(jié)果顯示，相比NC組，，MGT組胸腺中FOXP3下調(diào)(0.93±0.12比0.26±0.05，P0.01)而miR-125a-5p上調(diào)(0.91±0.09比6.12±1.22，P0.01)，兩者的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.8830,P0.01）。4.雙熒光報(bào)告顯示，miR-125a-5p對(duì)FOXP3有明顯的下調(diào)作用。 結(jié)論 1、MGT患者胸腺組織內(nèi)有其特異的微小RNA表達(dá)譜。 2、MGT患者胸腺組織內(nèi)miR-125a-5p可能通過(guò)調(diào)控靶基因FOXP3的表達(dá)，從而參與重癥肌無(wú)力的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Objective To investigate the differential expression of thymic microRNA in thymus and normal controls in patients with myasthenia gravis with thymoma ( MGT ) and to predict the screening of microRNAs related to MG , and to investigate the relationship between miR - 125a - 5p and its target gene FoxP3 .

Methods 13 cases of MGT group and 13 normal controls were collected . miRNA gene chip was used to screen the miRNA and its target gene . The miRNA and its target gene were analyzed quantitatively by means of bioinformatics . Then the wild type vector was constructed . The recombinant vector was transferred into 293 cells . Then the recombinant vector was transferred to Ncontrol or miRNA microarray , and then it was divided into wide / Ncontrol ; wide / miRNAse two groups , and then the relative fluorescence intensity was analyzed .

Results 1 . The results of miRNA microarray showed that there were 137 miRNA expression in the thymus of MGT group compared with NC group , and miR - 125a - 5p was significantly up - regulated ( 2.099579 times , P0.01 ) .

Conclusion

1 . MGT patients had specific micro - RNA expression profiles in thymus tissues .

2 . miR - 125a - 5p in the thymus tissues of MGT patients may be involved in the development of myasthenia gravis by regulating the expression of target gene FoxP3 .
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R746.1;R736.3

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2120605