發(fā)布時間：2018-07-10 19:55

  本文選題：突變亨廷頓蛋白 + 枸杞多糖　； 參考：《中國臨床解剖學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的探討枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)降解突變亨廷頓蛋白(mutant huntingtin,mHtt)的途徑。方法在穩(wěn)定表達(dá)mHtt 160Q的HEK293細(xì)胞中使用不同濃度LBP,CCK8法檢測細(xì)胞活力,caspase-3活性酶標(biāo)法檢測caspase-3活性;使用熒光顯微鏡檢測、Image Pro Plus 6.0分析LBP對HEK293-160Q細(xì)胞中mHtt的影響并同時使用RT-PCR法檢測LBP是否影響其mRNA水平;使用LBP、MG132及氯喹,分組處理HEK293-160Q細(xì)胞,通過Western Blot法檢測不同組細(xì)胞中mHtt的變化。結(jié)果 LBP能提高HEK293-160Q細(xì)胞活力,降低caspase-3活性;LBP能減少細(xì)胞中mHtt且不改變其mRNA;不同藥物處理HEK293-160Q細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)與只使用LBP相比,同時使用LBP與MG132會顯著降低mHtt的降解,而同時使用LBP與氯喹則對mHtt的降解沒有影響。結(jié)論 LBP能通過泛素蛋白酶體途徑降解mHtt,減輕mHtt所引起的細(xì)胞毒性繼而提高細(xì)胞活力、抑制細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the degradation pathway of mutant huntingtintin-mHtt by Lycium barbarum polysaccharide. Methods in HEK293 cells which expressed mHT160Q stably, the activity of caspase-3 was detected by different concentration of LBPnCCK8 method. The effect of LBP on mHTT in HEK293-160Q cells was detected by fluorescence microscope and RT-PCR was used to detect whether LBP affected the mRNA level of HEK293-160Q cells, and HEK293-160Q cells were treated with LBP MG132 and chloroquine, and the changes of mHTT in different cells were detected by Western blot. Results LBP could increase the activity of HEK293-160Q cells, reduce the activity of caspase-3 and reduce the mRNAs of HEK293-160Q cells. Both LBP and chloroquine had no effect on the degradation of mHTT. Conclusion LBP can degrade mHttvia ubiquitin proteasome pathway, reduce the cytotoxicity induced by mHtt, increase cell viability and inhibit apoptosis.
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)系組織胚胎學(xué)教研室;
【基金】：廣西高校中青年教師基礎(chǔ)能力提升項目(2017KY0497) 廣西自治區(qū)自然科學(xué)基金青年項目(2017GXNSFBA198155)
【分類號】：R742.2

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本文編號：2114499