缺氧誘導(dǎo)因子1α及Fas蛋白在急性CO中毒遲發(fā)性腦病大鼠海馬區(qū)的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2018-07-05 02:58
本文選題:急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病 + 細(xì)胞凋亡 ; 參考:《瀘州醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文
【摘要】:目的:觀察大鼠在急性CO中毒后海馬組織中缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)及Fas蛋白的表達(dá)情況,初步探討HIF-1α及Fas蛋白在急性CO中毒遲發(fā)性腦。―EACMP)發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:健康雄性SD大鼠78只,體重250~320g。隨機(jī)分為三組:急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病組(CO組),假手術(shù)組(Sham組)及空白對照組(BC組)。其中,CO組和假手術(shù)組各30只,空白對照組18只,選取染毒后1d、3d、7d、14d、21d、28d為6個(gè)時(shí)相點(diǎn),CO組和假手術(shù)組每個(gè)時(shí)相點(diǎn)各5只,空白對照組每個(gè)時(shí)相點(diǎn)各3只。CO組采用多次腹腔注射CO法復(fù)制急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病大鼠模型,假手術(shù)組用同樣方法給予等量的空氣注射,空白對照組不做任何處理。應(yīng)用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測大鼠平均逃避潛伏期、平臺(tái)所在象限運(yùn)動(dòng)時(shí)間以及穿越平臺(tái)次數(shù)等學(xué)習(xí)記憶能力指標(biāo),采用HE染色觀察大鼠海馬區(qū)病理變化,TUNEL細(xì)胞凋亡檢測法檢測大鼠海馬區(qū)錐體細(xì)胞凋亡情況,免疫組織化學(xué)染色法檢測海馬區(qū)HIF-1α、Fas蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1)定位航行實(shí)驗(yàn):三組大鼠的平均逃避潛伏期在染毒前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;BC組與假手術(shù)組間及組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;CO組大鼠在染毒后出現(xiàn)平均逃避潛伏期延長,且在染毒后14d、21d及28d時(shí),CO組較BC組和假手術(shù)組比較差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),。2)空間探索實(shí)驗(yàn):a.第四象限(平臺(tái)所在象限)運(yùn)動(dòng)時(shí)間:染毒前三組大鼠在第四象限(平臺(tái)所在象限)的運(yùn)動(dòng)時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;BC組與假手術(shù)組間及組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;染毒后CO組大鼠在第四象限運(yùn)動(dòng)時(shí)間有縮短趨勢,且染毒14d及染毒28d時(shí),CO組較BC組及假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。b.穿越平臺(tái)次數(shù):經(jīng)kruskal-wallis H檢驗(yàn),染毒前,三組大鼠經(jīng)過平臺(tái)次數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;BC組、假手術(shù)組組間及組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;染毒后CO組大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)有降低趨勢,染毒28d時(shí),CO組穿越平臺(tái)次數(shù)較其余兩組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、病理學(xué)變化:HE染色后光鏡下觀察CO組大鼠在急性CO中毒后出現(xiàn)海馬區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)目減少、細(xì)胞排列松散、細(xì)胞水腫、核固縮、核碎裂等病理學(xué)改變。BC組及假手術(shù)組染毒前后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)無明顯病理改變。3、TUNEL細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果:BC組及假手術(shù)組大鼠海馬區(qū)各時(shí)間點(diǎn)未見明顯細(xì)胞凋亡;CO組大鼠海馬區(qū)錐體細(xì)胞于染毒3d時(shí)凋亡開始增多,7d時(shí)達(dá)到高峰,28d時(shí)仍有少量細(xì)胞凋亡,各時(shí)間點(diǎn)凋亡指數(shù)較BC組及假手術(shù)組比較,差異具有顯著性(P0.01)。4、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:1)HIF-1α蛋白測定:HIF-1α在BC組及假手術(shù)組中表達(dá)較少,且各時(shí)間點(diǎn)間差異不具有顯著性,CO組在染毒1d時(shí)出現(xiàn)HIF-1α的表達(dá)升高,3d達(dá)到峰值,28d時(shí)仍有表達(dá),表達(dá)量明顯高于BC組及假手術(shù)組,差異具有顯著性(P0.01);2)Fas蛋白測定:在BC組及假手術(shù)組中有少量表達(dá),且各時(shí)間點(diǎn)間差異不具有顯著性,CO組在染毒1d時(shí)明顯升高,3d為高峰,7d時(shí)下降,染毒1d、3d、7d、14d時(shí)CO組較BC組與假手術(shù)組差異具有顯著性(P0.01)。結(jié)論:1.腹腔注射CO法制作急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病模型,,操作簡單,并且與人體急性CO中毒后發(fā)生遲發(fā)性腦病的病理生理過程相似,是研究急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病較為理想的動(dòng)物模型;2.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)主要用于測試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對空間位置的學(xué)習(xí)記憶能力,是作為初步判斷大鼠急性CO中毒后發(fā)生遲發(fā)性腦病較為可靠的依據(jù);3.HIF-1α可能通過誘導(dǎo)急性CO中毒后海馬區(qū)神經(jīng)元的遲發(fā)性凋亡而參與急性一氧化碳中毒遲發(fā)性腦。―EACMP)的發(fā)病;4.HIF-1α誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡可能與促進(jìn)Fas蛋白的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To observe the expression of hypoxia - inducible factor 1偽 ( HIF - 1偽 ) and Fas protein in hippocampus of rats after acute CO poisoning . Methods : Seventy - eight healthy male SD rats were randomly divided into three groups : acute carbon monoxide poisoning delayed encephalopathy group ( CO group ) , sham operation group ( Sham group ) and blank control group ( BC group ) .
There was no significant difference between BC group and sham operation group .
Compared with BC group and sham operation group , CO group had significant statistical significance ( P0.01 ) , and ( 2 ) space exploration experiment : a . The fourth quadrant ( quadrant of the platform ) had no statistical difference in the movement time of the fourth quadrant ( quadrant in the platform ) ;
There was no significant difference between BC group and sham operation group .
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本文編號(hào):2098620
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