本文選題：ABCG2 + 膠質(zhì)瘤　； 參考：《重慶醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：背景與目的:三磷酸腺苷結合盒轉(zhuǎn)運蛋白G2(Adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多種腫瘤細胞中表達,可通過外排抗癌藥物參與腫瘤耐藥。本研究的目的旨在探討人膠質(zhì)瘤細胞對焦脫鎂葉綠酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介導的光動力療法(photodynamic therapy,PDT)治療的敏感性及其與ABCG2的關系。方法:將處于對數(shù)生長期的U87,A172,SHG-44,U251膠質(zhì)瘤細胞系,經(jīng)Mppa-PDT處理后,采用CCK-8法檢測細胞活性;流式細胞技術和Western Blot分別檢測四種細胞內(nèi)Mppa的含量及ABCG2的表達;PCR檢測四種細胞中耐藥相關蛋白(ABCG2,MDR,MRP1)的基因表達情況,篩選出對Mppa-PDT相對不敏感且ABCG2高表達的細胞系。將其隨機分為A組:單純光照組;B組:MPPa-PDT組;C組:光照+煙曲霉毒素C(Fumitremorgin C,FTC)組及D組:Mppa-PDT+FTC組。經(jīng)上述分組處理后,采用CCK-8法檢測各組細胞活性;流式細胞術檢測細胞凋亡率、細胞內(nèi)ROS的水平及未光照前各組細胞內(nèi)Mppa的含量。結果:四種細胞對Mppa-PDT存在光能量依賴性,相同光能量照射處理后,A172細胞的細胞活性高于其他三種膠質(zhì)瘤細胞;MPPa與四種膠質(zhì)瘤細胞共同孵育12h后A172,SHG-44細胞內(nèi)Mppa含量明顯低于U87,U251(P=0.0000);A172細胞中ABCG2基因及蛋白表達水平明顯高于其他細胞系(P=0.0000);FTC抑制A172細胞中的ABCG2后,FTC+Mppa組細胞內(nèi)Mppa含量明顯高于Mppa組(P0.0001);D組ROS高于C組(P0.0001);D組細胞的細胞活性比C組低(P0.001),凋亡率明顯高于C組(P0.001)。結論:人膠質(zhì)瘤細胞A172對Mppa-PDT相對不敏感,并且產(chǎn)生這種現(xiàn)象的機制可能是ABCG2外排Mppa,減少Mppa的細胞內(nèi)聚集,進而減弱光敏劑活化后對腫瘤細胞的殺傷作用。
[Abstract]:Background & AIM: adenosine triphosphate binding cassette transporter G2 (Adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2 ABCG2) is expressed in a variety of tumor cells. The aim of this study was to investigate the sensitivity of human glioma cells to photodynamic therapeutic therapy mediated by pyropheophorbide-a methyl PPA and its relationship with ABCG2. Methods: the U87A172SHG-44-U251 glioma cell line was treated with Mppa-PDT, and the cell activity was detected by CCK-8 method. Flow cytometry and Western blot were used to detect the content of Mppa and the expression of ABCG2 in four kinds of cells respectively. The expression of ABCG2-MDR- MRP1 was detected by PCR. The cell lines which were relatively insensitive to Mppa-PDT and highly expressed in ABCG2 were selected. They were randomly divided into two groups: group A, group B, group C: Fumitremorgin group (FTC) and group D, group D: Mppa-PDT FTC. The cell activity was detected by CCK-8 method, the apoptosis rate, the level of intracellular Ros and the content of Mppa were detected by flow cytometry. Results: four kinds of cells had photo-energy dependence on Mppa-PDT. The cell activity of A172 cells treated with the same light energy was higher than that of the other three glioma cells, which were incubated with four glioma cells for 12 h. The Mppa content in A172HG-44 cells was significantly lower than that in U87U251 (P0. 0000) A172 cells. The expression level of ABCG2 gene and protein in A172 cells was obviously lower than that of the other three glioma cells after incubation with four glioma cells for 12 hours. Compared with other cell lines (P0. 0000), FTC inhibited the intracellular Mppa content of A172 cells significantly higher than that of Mppa group (P0.0001) and C group (P0. 0001). The apoptosis rate of FTC Mppa group was significantly higher than that of C (P0. 001) group (P 0. 001), and the apoptosis rate of FTC Mppa group was significantly higher than that of Mppa group (P0. 0001) than that of C (P0. 0001) group (P 0. 001). Conclusion: human glioma cell A172 is relatively insensitive to Mppa-PDT, and the mechanism of this phenomenon may be that ABCG2 efflux Mppa, reduce the intracellular aggregation of Mppa, and then weaken the killing effect of Guang Min on tumor cells.
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41

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