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6-羥基多巴模型大鼠salsolinol氮甲基轉移酶活性檢測

發(fā)布時間:2018-07-03 01:52

  本文選題:Salsolinol氮甲基轉移酶 + 帕金森病; 參考:《中國比較醫(yī)學雜志》2017年12期


【摘要】:目的應用6-羥基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制作帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型,并對大鼠外周血淋巴細胞中salsolinol氮甲基轉移酶(SNMT)的活性進行測定。方法利用單側雙點注射6-OHDA損毀大鼠紋狀體,構建PD模型并對模型進行行為學評價;從模型大鼠外周血淋巴細胞中提取SNMT粗酶液,建立酶反應產物N-methyl-salsolinol(NMSal)的高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質譜檢測方法,以NMSal的生成量表征SNMT的活性。結果 18只經過6-OHDA注射的大鼠共有7只經阿樸嗎啡誘導后表現(xiàn)為恒定向未損毀側旋轉(7 r/min),建模成功率為38.9%。建立了基于多反應監(jiān)測技術的SNMT活性的高選擇性、高靈敏度、高重復性的表征方法。該方法中NMSal的檢出限和定量限分別達到49 pmol/L和98 pmol/L,日內和日間精密度均在6.0%以下。檢測結果顯示PD組大鼠外周血淋巴細胞中SNMT的活性與假手術組、正常組相比差異有顯著性(P0.01,n=5),而正常組和假手術組之間差異無顯著性(P0.05,n=5)。結論外周血淋巴細胞中SNMT活性可能反映出PD發(fā)病狀況,有望成為診斷的指標之一。
[Abstract]:Objective to establish a rat model of Parkinson's disease (PD) with 6-hydroxydopa (6-OHDA) and to determine the activity of salsolinol N-methyltransferase (SNMT) in peripheral blood lymphocytes of rats. Methods the rat striatum was damaged by 6-OHDA injection of 6-OHDA, and the PD model was established, and the model was evaluated by behavioral evaluation, and the crude enzyme solution of SNMT was extracted from the peripheral blood lymphocytes of the model rats. A method for the detection of N-methyl-salsolinol (NMSal) by high performance liquid chromatography (HPLC) tandem triplex quadrupole mass spectrometry (HPLC-MS) was established. The activity of SNMT was characterized by the yield of NMSal. Results of 18 rats injected with 6-OHDA, 7 rats were induced by apomorphine and rotated to the undamaged side (7 r/min). The success rate of modeling was 38.9%. A high selectivity, high sensitivity and high repeatability characterization method of SNMT activity based on multi-reaction monitoring technique was established. The detection limit and quantitative limit of NMSal in this method are 49 pmol / L and 98 pmol / L, respectively. The intra-day and inter-day precision are below 6.0%. The results showed that the activity of SNMT in peripheral blood lymphocytes of PD group was significantly higher than that of sham operation group and normal group (P 0.01), but there was no significant difference between normal group and sham operation group (P 0.05). Conclusion SNMT activity in peripheral blood lymphocytes may reflect the pathogenesis of PD and may be one of the diagnostic indexes.
【作者單位】: 中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心;北京理工大學生命學院;
【分類號】:R-332;R742.5

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本文編號:2091845


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