本文選題：腦膠質(zhì)瘤 + U細胞　； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年44期

【摘要】：目的探討FAM92A1-289對人腦膠質(zhì)瘤U251細胞增殖、遷移能力的影響及其與半乳糖凝集素1(Galectin-1)的關系。方法將CMV-SP6-TALEN-GFP-289質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至U251細胞中,通過嘌呤霉素篩選得到穩(wěn)定過表達FAM92A1-289基因的腦膠質(zhì)瘤U251/289++細胞株。取腦膠質(zhì)瘤U251/289++細胞作為觀察組,未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的野生型U251細胞作為對照組,采用實時無標記動態(tài)細胞分析技術檢測兩組培養(yǎng)24、48、72、96、120 h的細胞增殖能力(以光密度值表示),采用Transwell小室試驗檢測兩組細胞遷移能力(以穿膜細胞數(shù)表示)。構(gòu)建PCS2-3Flag-Galectin-1質(zhì)粒,將人腦膠質(zhì)瘤U251細胞隨機分為FAM92A1-289組、Galectin-1組、共轉(zhuǎn)染組及空白對照組,FAM92A1-289組、Galectin-1組均采用Lipofactamine 3000轉(zhuǎn)染法分別轉(zhuǎn)染CMV-SP6-TALEN-GFP-289質(zhì)粒、PCS2-3Flag-Galectin-1質(zhì)粒,共轉(zhuǎn)染組同時轉(zhuǎn)染上述兩種質(zhì)粒,空白對照組僅加入Lipofactamine 3000轉(zhuǎn)染試劑。采用免疫共沉淀實驗驗證FAM92A1-289與Galectin-1是否存在相互作用。結(jié)果兩組培養(yǎng)24 h光密度值比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);觀察組培養(yǎng)48、72、96、120 h光密度值均高于對照組(P0.05或0.01)。觀察組與對照組穿膜細胞數(shù)分別為(242.0±11.41)、(65.40±7.92)個,兩組比較P0.01。共轉(zhuǎn)染組抗GFP蛋白相對表達量明顯高于FAM92A1-289組、Galectin-1組及空白對照組(P均0.01)。結(jié)論過表達FAM92A1-289可提高人腦膠質(zhì)瘤U251細胞增殖和遷移能力;FAM92A1-289與Galectin-1之間的相互作用可能為FAM92A1-289調(diào)控人腦膠質(zhì)瘤U251細胞惡性行為的作用機制。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of FAM92A1-289 on the proliferation and migration of human glioma U251 cells and the relationship between FAM92A1-289 and galectin-1. Methods the plasmid CMV-SP6-TALEN-GFP-289 was transfected into U251 cells, and the U251 / 289 glioma cell line with stable expression of FAM92A1-289 gene was obtained by purine mycin screening. Brain glioma U251 / 289 cells were used as observation group and wild-type U251 cells with untransfected plasmids as control group. The cell proliferation ability (expressed as optical density) of the two groups was measured by real-time unlabeled dynamic cell analysis technique. The transwell chamber test was used to detect the migration ability of the two groups (expressed by the number of perforated cells). PCS2-3Flag-Galectin-1 plasmid was constructed and human glioma U251 cells were randomly divided into FAM92A1-289 group and FAM92A1-289 group. Both co-transfected group and blank control group (FAM92A1-289) were transfected into CMV-SP6-TALEN-GFP-289 plasmid PCS2-3Flag-Galectin-1 by Lipofactamine 3000. The blank control group only added Lipofactamine 3000 transfection reagent. The interaction between FAM92A1-289 and Galectin-1 was verified by immunoprecipitation. Results there was no significant difference in optical density between the two groups at 24 h (P0.05), while the optical density in the observation group was higher than that in the control group (P0.05 or 0.01), and that in the observation group was higher than that in the control group (P0.05 or 0.01). The number of perforating cells in the observation group and the control group was (242.0 鹵11.41), (, 65.40 鹵7.92), compared with that in the control group (P 0.01). The relative expression of anti-GFP protein in cotransfection group was significantly higher than that in FAM92A1-289 group and blank control group (P0.01). Conclusion overexpression of FAM92A1-289 can enhance the proliferation and migration of human glioma U251 cells. The interaction between FAM92A1-289 and Galectin-1 may be the mechanism of FAM92A1-289 regulating the malignant behavior of human glioma U251 cells.
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學院附屬太和醫(yī)院;湖北醫(yī)藥學院第二臨床學院;
【基金】：國家自然科學基金應急管理項目(81641028) 湖北省自然科學基金面上項目(2016CFB408)
【分類號】：R739.41

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