本文選題：核連蛋白(NUCB) + PQ��； 參考：《中國老年學(xué)雜志》2017年13期

【摘要】：目的檢測核連蛋白(NUCB)2在百草枯(PQ)誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞中的表達變化,分析NUCB2在PQ引起的SH-SY5Y細胞凋亡中的作用機制。方法采用MTT法進行SH-SY5Y細胞毒性分析。選擇PQ作用的最佳濃度和時間點,進一步收取經(jīng)PQ處理后的SH-SY5Y總RNA,首先采用RT-PCR方法觀察NUCB2的表達趨勢,然后采用real-time PCR方法進行NUCB2基因進行表達變化檢測,采用ΔΔCt法進行定量比較分析。結(jié)果 MTT方法在酶標(biāo)儀490 nm波長下,分析得到PQ的最佳作用濃度和時間是0.5 mmol/L作用24 h,此時細胞活力較對照組低約41.67%;采用ΔΔCt法進行定量比較分析,發(fā)現(xiàn)NUCB2在mRNA水平的表達量明顯降低(P=0.001 6);Western印跡檢測發(fā)現(xiàn)SH-SY5Y細胞經(jīng)PQ誘導(dǎo)后引起了caspase-3酶原形式的表達量降低(P0.05)。結(jié)論 NUCB2基因在經(jīng)PQ誘導(dǎo)后的SH-SY5Y細胞中表達量明顯降低,分析其可能在神經(jīng)細胞的凋亡機制中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Objective to detect the expression of Nu CB2 in SH-SY5Y cells induced by paraquat (PQ) and to analyze the mechanism of NUCB2 in PQ induced apoptosis of SH-SY5Y cells. Methods MTT assay was used to analyze the cytotoxicity of SH-SY5Y. The optimal concentration and time point of PQ action were selected to collect the total SH-SY5Y after PQ treatment. The expression trend of NUCB2 was observed by RT-PCR method, and then the expression change of NUCB2 gene was detected by real-time PCR method. 螖 Ct method was used for quantitative comparative analysis. Results under the wavelength of 490nm, the optimal concentration and time of MTT was 0.5 mmol/L for 24 h, and the cell viability was about 41.67% lower than that of the control group, and the 螖 Ct method was used for quantitative analysis. It was found that the expression of NUCB2 in mRNA level was significantly decreased. Western blot analysis showed that the expression of caspase-3 prozyme in SH-SY5Y cells induced by PQ was decreased by P0. 05%. Conclusion the expression of NUCB2 gene in SH-SY5Y cells induced by PQ was significantly decreased, which may play an important role in the mechanism of neuronal apoptosis.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院法醫(yī)教研室;河北北方學(xué)院;中國醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院法醫(yī)血清教研室;
【基金】：河北省教育廳青年指導(dǎo)項目(Z2017027)
【分類號】：R742.5

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本文編號：1941710