肢體缺血后處理對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)和神經(jīng)細(xì)胞增殖的作用
本文選題:腦缺血 + 缺血后處理; 參考:《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年03期
【摘要】:目的探索非侵入式肢體缺血后處理(NLIP)對(duì)腦缺血大鼠的腦保護(hù)作用和損傷側(cè)皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的表達(dá)與分布。方法 SD大鼠110只隨機(jī)分成假手術(shù)組(n=10),缺血再灌注損傷組(I/R組,n=50),NLIP組(治療組,n=50)。I/R組和治療組動(dòng)物采用線栓法制備大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型(假手術(shù)組不插入線栓),治療組于再灌注即刻給予NLIP處理(改良的缺血彈性帶股動(dòng)脈近端加壓阻斷股動(dòng)脈10 min,再通10 min,循環(huán)3次),術(shù)后3d、7d、14d、21d、28d分別稱取大鼠體質(zhì)量,并進(jìn)行行為學(xué)評(píng)估后處死大鼠取腦組織,免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)各時(shí)點(diǎn)缺血腦皮質(zhì)中的雙皮質(zhì)素(DCX)和膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá),Western blot檢測(cè)缺血腦皮質(zhì)中微管相關(guān)蛋白2(MAP2)的表達(dá)。結(jié)果假手術(shù)組動(dòng)物術(shù)后1~3d表現(xiàn)出輕度的體質(zhì)量下降和行為學(xué)缺損,術(shù)后1d出現(xiàn)上肢肌力減弱,之后開始恢復(fù)。與假手術(shù)組比較,以上神經(jīng)缺損在I/R組和治療組動(dòng)物中更加明顯(P0.05),術(shù)后3d到21d逐漸緩解,到術(shù)后28d時(shí)接近假手術(shù)組水平。與I/R組相比,治療組動(dòng)物體質(zhì)量在術(shù)后2~7d有明顯恢復(fù)(P0.05),動(dòng)物上肢肌力在14~28d有明顯改善(P0.05),治療組行為學(xué)評(píng)分在各時(shí)點(diǎn)與I/R組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與假手術(shù)組比較,I/R組和治療組腦皮質(zhì)缺血區(qū)周圍DCX陽性細(xì)胞和GFAP陽性細(xì)胞隨時(shí)間推移逐漸增多,伴隨胞體肥大和突起變長(zhǎng)加粗,分別在術(shù)后21d和28d大量增殖并聚集在腦皮質(zhì)缺血區(qū)周圍。I/R組和治療組在術(shù)后3d缺血腦皮質(zhì)中MAP2表達(dá)量下降,但與假手術(shù)組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),之后逐漸上調(diào),術(shù)后14d和21d時(shí)高于假手術(shù)組(P0.05)。治療組MAP2表達(dá)量在術(shù)后7~28d高于假手術(shù)組(P0.05),在術(shù)后7d時(shí)高于I/R組(P0.05)。結(jié)論 NLIP可減輕腦缺血大鼠神經(jīng)行為學(xué)異常和促進(jìn)缺血周圍區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的增多。
[Abstract]:Objective to investigate the protective effect of NLIP on the brain and the expression and distribution of neurons in the injured lateral cortex in rats with cerebral ischemia. Methods 110 Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group (n = 10) and ischemia / reperfusion injury group (n = 50 / R group). The treatment group was treated with NLIP immediately after reperfusion (modified ischemic elastic band femoral artery proximal end compression was blocked for 10 min, re-opened for 10 min, circulatory 3 times, 3 days after operation, 7 days, 14 days, 21 days, 28 days, respectively, the weight of the rats was taken. After behavioral evaluation, the rats were killed to take brain tissue, Immunohistochemical staining was used to detect the expression of DCX) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) in ischemic cerebral cortex. Western blot was used to detect the expression of microtubule-associated protein 2map2 (MAP2) in ischemic cerebral cortex. Results in the sham-operated group, the body mass decreased slightly and the behavioral defect appeared on the 3rd day after operation, and the muscle strength of the upper limb decreased on the 1st day after the operation, and then it began to recover. Compared with the sham operation group, the above nerve defects were more obvious in the I / R group and the treatment group than in the control group, and gradually relieved from 3 to 21 days after operation, and were close to the level of the sham operation group at 28 days after operation. Compared with the I / R group, the animal mass of the treatment group recovered significantly on the 2nd day, 7th day after operation, and the muscle strength of the upper limb improved significantly on the 14th and 28th days. There was no significant difference in the behavioral score between the treatment group and the I / R group at all time points. Compared with the sham-operated group, the DCX positive cells and GFAP positive cells in the ischemic area of the cerebral cortex increased gradually with the increase of the cell body hypertrophy and the thickening of the processes in the I / R group and the treatment group. On the 21st and 28th days after operation, the expression of MAP2 in the ischemic cortex decreased in the I- / R group and the treatment group on the 3rd day after operation, but there was no significant difference between the control group and the sham-operated group (P 0.05), and then increased gradually. At 14 and 21 days after operation, it was higher than that in sham operation group (P 0.05). The expression of MAP2 in the treatment group was higher than that in the sham-operated group on the 7th day after operation (P 0.05), and at the 7th day after operation, it was higher than that in the I / R group (P 0.05). Conclusion NLIP can attenuate the neurobehavioral abnormality and promote the increase of nerve cells in the ischemic area in rats with cerebral ischemia.
【作者單位】: 四川大學(xué)華西醫(yī)院康復(fù)醫(yī)學(xué)科;四川省康復(fù)醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;四川大學(xué)華西醫(yī)院公共實(shí)驗(yàn)技術(shù)中心;
【基金】:“十二·五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011BAI08B11) 青年科學(xué)基金(No.81401858)資助
【分類號(hào)】:R743.3
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