本文選題：腦缺血 + 硫化氫��； 參考：《蘇州大學》2014年碩士論文

【摘要】：第一部分硫化氫對小鼠腦缺血再灌注損傷后血腦屏障的保護作用 目的：觀察硫化氫（H2S）對小鼠腦缺血再灌注損傷是否具有血腦屏障保護作用。 方法：利用兩種結構不具相關性的H2S供體ADT（5-(4-methoxyphenyl)-3H-1,2-dithiole-3-thione，ADT）及NaHS研究H2S是否在腦缺血后保護血腦屏障。雄性ICR小鼠接受1小時大腦中動脈阻塞（transient middle cerebral artery occlusion，tMCAO），再灌注3小時后隨機分為三組，腹腔注射溶劑（Vehicle，，Veh）、ADT（50mg/kg/day）或NaHS (25μmol/kg/day)。用亞甲基藍方法檢測ADT和NaHS注射后小鼠血液H2S水平；以TTC(2，3，5—氯化三苯基四氮唑)染色法測定小鼠腦梗死體積，以Longa法評估神經(jīng)行為學功能，以伊文思藍（evans blue）染色法檢測血腦屏障損傷，以免疫印跡法（western blotting）檢測血腦屏障緊密連接蛋白occludin和ZO-1的表達。 結果：與control組相比，ADT在給藥后45分鐘及3小時升高血液H2S的水平，但是NaHS僅在注射45分鐘后升高血液H2S的水平。ADT在腦缺血再灌注48小時后顯著降低腦梗死體積，其中皮層、紋狀體、半球梗死面積分別減少了35.3%、16.9%、33.8%；并降低神經(jīng)學評分。ADT和NaHS在腦缺血再灌注后48小時后，明顯降低伊文思藍滲透率。Western blotting結果顯示ADT可以抑制腦缺血導致的血腦屏障相關蛋白occludin和ZO-1表達量的下降。 結論：硫化氫可以保護腦缺血再灌注后的血腦屏障。 目的：研究硫化氫供體ADT在腦缺血再灌注后保護血腦屏障的機制：是否抑制腦缺血后NF-κB活化導致的炎癥因子和NADPH氧化酶（NOX）的誘導表達。 方法：將雄性ICR小鼠隨機分為假手術(Sham)組、溶劑對照組（Vehicle，Veh）組和ADT組；24或48小時取缺血側(cè)和非缺血側(cè)腦組織為標本，通過實時定量PCR(QPCR)、酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)試劑盒、NADPH (nicotinamide adeninedinucleotide2'-phosphate reduced tetrasodium salt)氧化酶試劑盒檢測腦組織中的多種炎癥因子和抑炎因子的表達情況，以及髓過氧化物酶、NADPH氧化酶的活性；利用明膠酶譜（zymography）法，檢測腦組織中金屬蛋白酶9（matrixmetalloproteinases，MMP-9）的活性；用免疫印跡法（western bloting）檢測細胞漿內(nèi)和細胞核內(nèi)的NF-κB的表達。 結果：QPCR結果顯示，與Sham組相比，Veh組小鼠的缺血皮層組織中促炎因子IL-1β（interleukin-1β）和iNOS (induced nitric oxide synthase)以及NOX2(NADPH oxidase2)和NOX4(NADPH oxidase4)的表達水平明顯升高，而以Arg-1(Arginase1)和IL-10為代表的抑炎因子的表達明顯降低；與Veh相比，ADT減少IL-1β、iNOS等促炎因子表達，增加Arg-1和IL-10為代表的抑炎因子的表達，并降低NOX4的表達。髓過氧化物酶和NADPH氧化酶試劑盒法顯示，與Sham組相比，Veh小鼠的缺血皮層髓過氧化物酶和NADPH氧化酶的活性明顯上升；而與Veh相比，ADT減少髓過氧化物酶和NADPH氧化酶的活性。明膠酶譜顯示，與Sham組相比，Veh組小鼠的缺血皮層MMP-9的活性上升；與Veh相比，ADT降低腦缺血后MMP-9活性的升高。腦缺血后NF-κB亞單位p65向細胞核的轉(zhuǎn)運是NF-κB活化的標記。Western blotting結果顯示：與Sham組相比，Veh組小鼠皮層的細胞核內(nèi)的NF-κB亞單位p65的水平明顯增高，而與Veh相比，ADT可明顯減少細胞核內(nèi)NF-κB亞單位p65的水平；與Sham組相比，Veh組小鼠皮層細胞胞漿內(nèi)的NF-κB亞單位p65水平降低，而與Veh相比，ADT可明顯增加細胞胞漿內(nèi)的NF-κB亞單位p65的表達水平。這些結果表明ADT抑制腦缺血導致的NF-κB活化。 結論： ADT在小鼠腦缺血再灌注損傷后保護血腦屏障的作用機制可能與抑制NF-κB活化，從而抑制多種炎癥因子的表達和NOX介導的ROS(Reactive oxygenspecies)的產(chǎn)生。
[Abstract]:Protective effect of first part of hydrogen sulfide on blood brain barrier after cerebral ischemia / reperfusion injury in mice

Objective : To investigate the protective effect of hydrogen sulfide ( H2S ) on cerebral ischemia - reperfusion injury in mice .

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本文編號：1875326