發(fā)布時(shí)間：2018-05-10 14:40

  本文選題：血管生成 + 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞��； 參考：《蚌埠醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文

【摘要】：惡性膠質(zhì)細(xì)胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的原發(fā)性腫瘤，而且是人體血管化程度最高的腫瘤之一。膠質(zhì)瘤的血管生成是其生長(zhǎng)和侵襲的基礎(chǔ)，從而影響患者的放、化療效果，導(dǎo)致其死亡率居高不下。 腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cells,CSCs)在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用越來(lái)越受到人們的重視。我科在前期工作中已對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(glioma stem cells, GSCs)有了較為系統(tǒng)和深入的研究，發(fā)現(xiàn)了CD133可以作為GSCs的特異標(biāo)志物，并闡明CD133陽(yáng)性的GSCs可以自我更新和多向分化，且具有很強(qiáng)的侵襲能力。 已有文獻(xiàn)報(bào)道腫瘤微環(huán)境可以影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。例如在腫瘤的早期，其組織中就有大量炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，其中巨噬細(xì)胞占有較高的比例，且參與腫瘤發(fā)生及演進(jìn)的諸多方面，但是關(guān)于巨噬細(xì)胞對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞促血管生成的影響有待深入研究。目前，在膠質(zhì)瘤血管生成的研究中，，研究者大多采用體外培養(yǎng)方式進(jìn)行，因此無(wú)法在完整的活體中直觀地觀察巨噬細(xì)胞對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞促血管生成的作用。 斑馬魚(yú)作為一種模式生物在腫瘤研究中已被廣泛應(yīng)用。研究報(bào)道，斑馬魚(yú)體內(nèi)的巨噬細(xì)胞是最早出現(xiàn)的免疫細(xì)胞，再加之，fli:GFP轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)的建立，使其全部血管被標(biāo)記了綠色熒光蛋白，從而使人們能夠直觀地觀察到活體斑馬魚(yú)的血管生成情況。因此，應(yīng)用斑馬魚(yú)模型探討巨噬細(xì)胞在腫瘤發(fā)生發(fā)展的早期是如何影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞促血管生成的作用具有重要意義。 本研究首先將人膠質(zhì)瘤原代細(xì)胞091214轉(zhuǎn)染紅色熒光蛋白（RFP），再以CD133作為標(biāo)志物，將轉(zhuǎn)有紅色熒光蛋白的GSCs分選出來(lái)；將分選出的CD133+和CD133-的膠質(zhì)瘤細(xì)胞移植入fli:GFP轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)胚胎的卵黃囊區(qū)域，我們可以發(fā)現(xiàn)GSCs在斑馬魚(yú)體內(nèi)具有明顯的促血管生成的作用；然后利用中性紅染色的方法對(duì)活體斑馬魚(yú)的巨噬細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，以研究巨噬細(xì)胞對(duì)GSCs促血管生成的影響；最后，我們又做了斑馬魚(yú)巨噬細(xì)胞特異性基因(L-plastin)的整體原位雜交實(shí)驗(yàn)，以期在mRNA水平對(duì)巨噬細(xì)胞進(jìn)行定位，從而更準(zhǔn)確地研究巨噬細(xì)胞在GSCs促血管生成中的作用。 綜上所述，本研究建立了膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在斑馬魚(yú)誘導(dǎo)血管生成的體內(nèi)模型，發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞在血管生成部位的分布與膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的促血管生成作用具有密切關(guān)系，表明巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)促進(jìn)了膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)的血管生成。本實(shí)驗(yàn)為基于巨噬細(xì)胞參與的促腫瘤血管生成的靶向治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Malignant glioma is the most common primary tumor in the central nervous system and one of the most vascularized tumors. Angiogenesis is the basis of glioma growth and invasion, which affects the effect of radiotherapy and chemotherapy, resulting in high mortality. More and more attention has been paid to the role of cancer stem cell stem cells in tumorigenesis and development. In our previous work, we have made a systematic and in-depth study on glioma stem cells, GSCs), and found that CD133 can be used as a specific marker of GSCs, and that CD133 positive GSCs can be self-renewing and multi-differentiated. And has the very strong invasiveness. It has been reported that tumor microenvironment can affect the occurrence and development of tumor. For example, in the early stage of tumor, there are a large number of inflammatory cells infiltrated in its tissues, in which macrophages occupy a high proportion, and are involved in many aspects of tumorigenesis and progression. However, the effects of macrophages on angiogenesis of glioma stem cells need further study. At present, in the study of glioma angiogenesis, most of the researchers use in vitro culture, so it is impossible to directly observe the role of macrophages in promoting angiogenesis of glioma stem cells in vivo. Zebrafish as a model organism has been widely used in tumor research. The study reported that the macrophages in zebrafish were the first immunocytes, and the establishment of flifish: GFP transgenic zebrafish made all its blood vessels labeled with green fluorescent protein (GFP). Thus, the angiogenesis of living zebrafish can be observed intuitively. Therefore, it is important to explore how macrophages affect the angiogenesis of glioma stem cells in the early stage of tumor development using zebrafish model. In this study, the primary human glioma cell line 091214 was transfected with the red fluorescent protein (CD133), and then the GSCs transformed with the red fluorescent protein was selected as a marker. The selected CD133 and CD133- glioma cells were transplanted into the yolk sac region of fli:GFP transgenic zebrafish embryos. We can find that GSCs plays a significant role in promoting angiogenesis in zebrafish. Then the macrophages of zebrafish in vivo were labeled by neutral red staining to study the effect of macrophages on angiogenesis induced by GSCs. Finally, in situ hybridization of the macrophage specific gene (L-plastin) of zebrafish was carried out. The aim of this study was to locate macrophages at mRNA level and to study the role of macrophages in angiogenesis induced by GSCs. In conclusion, a model of glioma stem cells induced angiogenesis in zebrafish was established in this study. It was found that the distribution of macrophages in the angiogenesis site was closely related to the angiogenesis of glioma stem cells. This suggests that macrophage infiltration promotes angiogenesis induced by glioma stem cells. This study provides experimental evidence for the targeting therapy of tumor angiogenesis based on macrophage involvement.
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R739.41

【共引文獻(xiàn)】

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7 Ling Zhang;Cheng-Cai Wang;;Inflammatory response of macrophages in infection[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年02期

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10 馮康虎;方鵬飛;張文賢;韓立文;;斑馬魚(yú)模型及其在血管生成抑制劑篩選中的應(yīng)用[J];西部中醫(yī)藥;2014年12期

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本文編號(hào)：1869711