本文選題：多巴胺 + 谷氨酸�。� 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年07期

【摘要】：目的研究多巴胺(DA)對原代星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸(Glu)攝取能力的影響,以及DA通過痕量胺相關(guān)受體1-興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2(TAAR1-EAAT2)信號通路對星形膠質(zhì)細(xì)胞Glu攝取能力的影響。方法采用Amplex Red谷氨酸測定試劑盒測定經(jīng)過DA處理的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞對Glu攝取含量的變化,反轉(zhuǎn)錄PCR檢測TAAR1、EAAT2 mRNA水平,Western blot法檢測TAAR1、EAAT2蛋白水平;采用TAAR1小干擾RNA(siRNA)和TAAR1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染DA處理后的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞,Western blot法檢測EAAT2表達(dá)水平并采用Amplex Red谷氨酸測定試劑盒測定培養(yǎng)上清液Glu含量。結(jié)果 DA處理的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞EAAT2水平降低,TAAR1水平增加,培養(yǎng)上清液Glu含量上升。DA處理經(jīng)TAAR1 siRNA轉(zhuǎn)染后的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞,上調(diào)EAAT2水平,培養(yǎng)上清液中Glu含量減少;DA處理經(jīng)TAAR1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞,則EAAT2降低,培養(yǎng)上清液中Glu的含量增加。結(jié)論 DA通過影響星形膠質(zhì)細(xì)胞TAAR1-EAAT2信號通路,減弱細(xì)胞Glu攝取能力,引起細(xì)胞外Glu蓄積,從而損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞的功能。
[Abstract]:Objective to study the effect of dopamine (DA) on the uptake of glutamate (Glu1) in primary astrocytes and the effect of DA on the Glu uptake of astrocytes through the signal pathway of trace amine-associated receptor 1 excitatory amino acid transporter 2TAAR1-EAAT2. Methods Amplex Red assay kit was used to detect the changes of Glu uptake by DA treated primary astrocytes, and reverse transcription PCR was used to detect the level of TAAR1 / EAAT2 mRNA and the protein level of TAAR1 / EAAT2 was detected by Western blot. The expression of EAAT2 was detected by TAAR1 small interference RNA-siRNAs and TAAR1 plasmid transfection into DA treated primary astrocytes by Western blot, and the Glu content of culture supernatant was measured by Amplex Red assay kit. Results the EAAT2 level of primary astrocytes treated with DA decreased the level of tact AR1 increased, the Glu content of culture supernatant increased. DA treated primary astrocytes transfected with TAAR1 siRNA increased the level of EAAT2. The content of Glu in culture supernatant was decreased and the content of Glu in supernatant was increased when EAAT2 was decreased when DA was treated with TAAR1 plasmid transfected astrocytes. Conclusion DA can decrease the ability of Glu uptake and induce the accumulation of extracellular Glu through affecting the TAAR1-EAAT2 signaling pathway of astrocytes, thus impairing the function of astrocytes.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院浙江省神經(jīng)老化與疾病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院外科實(shí)驗(yàn)室;溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81671042,81300308)
【分類號】：R741

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本文編號：1854675