本文選題：神經(jīng)母細胞瘤 + 細胞增殖��； 參考：《西南大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：神經(jīng)母細胞瘤(neuroblastoma,NB)來源于交感神經(jīng)系統(tǒng),是一種常見的小兒顱外實體外周神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,占兒童腫瘤發(fā)生率的8%~10%以及兒童癌癥死亡的15%。神經(jīng)母細胞瘤從良性神經(jīng)元到形成腫瘤的過程都具有異質(zhì)性,其較強的增殖和轉(zhuǎn)移能力是導(dǎo)致患者死亡的主要因素。神經(jīng)母細胞瘤的臨床表現(xiàn)各不相同,在晚期的病人中通常會發(fā)現(xiàn)其對包括手術(shù)、化療和放療等傳統(tǒng)的治療方法具有很強的抗性。本研究通過對神經(jīng)母細胞瘤增殖和成瘤的初步探究為神經(jīng)母細胞瘤治療尋找新靶點提供理論基礎(chǔ)。約25%~30%的兒童神經(jīng)母細胞瘤患者MYCN基因有擴增,且擴增倍數(shù)越高預(yù)后效果越差。研究表明MYCN具有促進神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖生長,抑制分化凋亡,促進侵襲轉(zhuǎn)移的作用。MINA(MYC induced nuclear antigen)屬于組蛋白去甲基化酶JMJD家族,具有H3K9me3去甲基化功能,在多種腫瘤中均有表達,在細胞增殖與生長中具有非常重要的作用。本文首次揭示了MYCN通過結(jié)合在MINA啟動子區(qū)域調(diào)控神經(jīng)母細胞瘤細胞的增殖與成瘤,獲得的主要結(jié)果如下:1、MYCN和MINA在神經(jīng)母細胞瘤中的預(yù)后關(guān)系通過對R2數(shù)據(jù)平臺神經(jīng)母細胞瘤公共數(shù)據(jù)庫Versteeg中的88例神經(jīng)母細胞瘤臨床患者的統(tǒng)計,利用Kaplan Meier分析,結(jié)果表明MYCN和MINA在神經(jīng)母細胞瘤中的預(yù)后密切相關(guān),MYCN低表達患者預(yù)后良好,而MYCN高表達患者預(yù)后較差,MINA表達也是如此。通過Western Blot實驗檢測MYCN和MINA在神經(jīng)母細胞瘤細胞中的表達情況,實驗結(jié)果顯示:MYCN在神經(jīng)母細胞瘤細胞中普遍表達,在BE(2)-C細胞中含量最高,在SHEP1細胞中含量最低,MINA在神經(jīng)母細胞瘤中的表達情況也是如此。2、探究MYCN和MINA對神經(jīng)母細胞瘤細胞生長、增殖及克隆形成能力的影響為檢測MYCN和MINA對神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖的影響,在MYCN本底高表達的BE(2)-C細胞中分別干涉MYCN和MINA,利用MTT和BrdU實驗檢測細胞的生長,結(jié)果均顯示細胞增殖能力減弱,成瘤性降低。在干涉MYCN的BE(2)-C細胞中過表達MINA,通過相應(yīng)實驗檢測處理后的細胞增殖與成瘤情況,發(fā)現(xiàn)細胞的增殖能力成瘤能力得到一定的恢復(fù)。我們在MYCN本底低表達的SHEP1細胞中過表達MYCN后,利用MTT和BrdU實驗檢測細胞的生長,結(jié)果顯示過表達MYCN后SHEP1細胞生長能力增強,以及BrdU標記的陽性細胞增加。為進一步探究MYCN和MINA對神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖的影響,在已過表達MYCN的SHEP1細胞中干涉MINA,結(jié)果顯示MINA干涉后,SHEP1細胞生長受到抑制、BrdU標記的陽性細胞減少。利用Western blot實驗方法檢測發(fā)現(xiàn):在敲低MYCN的BE(2)-C細胞中MINA表達含量也降低,在過表達MYCN的SHEP1細胞中MINA含量升高。3、MYCN和MINA調(diào)節(jié)神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖和成瘤的機制初探通過染色體免疫共沉淀實驗發(fā)現(xiàn)MYCN結(jié)合在MINA的啟動子區(qū)域,且在轉(zhuǎn)錄起始位點上游593~472區(qū)域、1043~839區(qū)域和849~573區(qū)域結(jié)合能力較強,因此,初步推測MYCN通過MINA調(diào)控神經(jīng)母細胞瘤細胞生長、增殖、以及腫瘤的發(fā)生。
[Abstract]:紲炵粡姣嶇粏鑳?yōu)鐦?neuroblastoma,NB)鏉ユ簮浜庝氦鎰熺緇忕郴緇，

本文編號：1816036