本文選題：hSOD-GA基因 + 肌萎縮側(cè)索硬化�。� 參考：《中國老年學(xué)雜志》2017年03期

【摘要】：目的 建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染h SOD1-G93A真核表達(dá)載體肌萎縮側(cè)索硬化細(xì)胞模型。方法 進(jìn)行NSC-34細(xì)胞的培養(yǎng),利用脂質(zhì)體方法把已經(jīng)構(gòu)建好的pc DNA3.1(-)、h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)和h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至NSC-34細(xì)胞系中,再通過G418篩選建立穩(wěn)定表達(dá)h SOD1基因的NSC-34細(xì)胞系;以RT-PCR法鑒定轉(zhuǎn)染后h SOD1在NSC34細(xì)胞系中的表達(dá)。結(jié)果 轉(zhuǎn)染h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)質(zhì)粒的細(xì)胞與正常NSC-34細(xì)胞相比,胞體變圓,突起減少,且軸突變短。而轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(-)和h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)質(zhì)粒的細(xì)胞較正常NSC-34細(xì)胞無明顯變化。RT-PCR法鑒定結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)和h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)質(zhì)粒的細(xì)胞中h SOD1基因表達(dá)為陽性,而正常NSC-34細(xì)胞和轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(-)質(zhì)粒的對照組為陰性。結(jié)論 成功獲得可穩(wěn)定表達(dá)h SOD1-G93A基因的肌萎縮側(cè)索硬化細(xì)胞模型。
[Abstract]:Objective to establish an amyotrophic lateral sclerosing cell model with stable transfection of h SOD1-G93A eukaryotic expression vector. Methods NSC-34 cells were cultured and transfected into NSC-34 cell line by liposome method. The constructed plasmids were transfected into NSC-34 cell line. The NSC-34 cell lines expressing h SOD1 gene stably were established by G418 screening. The expression of h SOD1 in NSC34 cell line was identified by RT-PCR assay. Results compared with normal NSC-34 cells, the cells transfected with h SOD1-G93A-pc DNA3.1 ~ (-1) plasmid had round cell bodies, fewer processes and shorter axons. The results of RT-PCR analysis showed that the expression of h SOD1 gene was positive in the cells transfected with the plasmid pcDNA3.1 ~ (-1) and h SOD1-WT-pc DNA3.1 ~ (-1). The results of RT-PCR showed that the expression of h SOD1 gene was positive in the cells transfected with the plasmid "h SOD1-WT-pc DNA3.1" and "h SOD1-G93A-pc DNA3.1 ~ (-1)". The normal NSC-34 cells and the control group transfected with pcDNA3.1 ~ (-) plasmid were negative. Conclusion the model of amyotrophic lateral sclerosis cells which can stably express h SOD1-G93A gene was successfully obtained.
【作者單位】： 臨沂市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;臨沂衛(wèi)生學(xué)校;臨沂市人民醫(yī)院消化內(nèi)科;臨沂市人民醫(yī)院中心實驗室;
【分類號】：R741.02

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本文編號：1814766