下調(diào)CENP-W對人腦膠質(zhì)瘤U87細胞的影響
本文選題:著絲粒蛋白W + 小干擾RNA; 參考:《中國病理生理雜志》2017年02期
【摘要】:目的:研究下調(diào)著絲粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)的表達水平對人腦膠質(zhì)瘤U87細胞的影響。方法:采用小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人腦膠質(zhì)瘤U87細胞CENP-W的表達,采用RT-qPCR和Western blot法評價siRNA的干擾效果,采用MTT法、BrdU實驗和平板集落形成實驗測定細胞的增殖,Transwell小室檢測細胞侵襲力的變化,劃痕實驗檢測細胞遷移能力的變化,流式細胞術(shù)檢測細胞周期及細胞凋亡的改變。結(jié)果:MTT實驗、平板集落形成實驗和BrdU實驗顯示轉(zhuǎn)染siRNA的實驗組U87細胞的增殖能力、集落形成能力較空白對照組及陰性對照組明顯降低;Transwell實驗和劃痕實驗顯示實驗組細胞的遷移、侵襲能力較空白對照組及陰性對照組明顯減弱;流式細胞術(shù)分析表明實驗組細胞的細胞周期被阻滯在G_0/G_1期;實驗組細胞凋亡比例較對照組增多(P0.05)。結(jié)論:下調(diào)CENP-W的表達可抑制人腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移和侵襲能力并促進細胞的凋亡,提示CENP-W有望成為人腦膠質(zhì)瘤基因治療的候選靶點。
[Abstract]:Aim: to study the effect of down-regulation of the expression of W(centromere protein WnP-W on human glioma U87 cells. Methods: small interfering RNA(small interfering siRNAs were used to inhibit the expression of CENP-W in human glioma U87 cells. RT-qPCR and Western blot were used to evaluate the interfering effect of siRNA. MTT assay and plate colony formation assay were used to detect the changes of cell invasion, scratch test, cell cycle and apoptosis. Results the cell proliferation ability of U87 cells transfected with siRNA was significantly decreased by cell proliferation assay, colony formation assay and BrdU assay, and the migration of U87 cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group and negative control group, and the migration of U87 cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group and the negative control group. Compared with the control group and the negative control group, the invasive ability was significantly decreased, the cell cycle of the experimental group was blocked in the G_0/G_1 phase, and the proportion of apoptosis in the experimental group was higher than that in the control group (P 0.05). Conclusion: down-regulation of CENP-W expression can inhibit the proliferation, migration and invasion of human glioma cells and promote the apoptosis of human glioma cells, suggesting that CENP-W may be a candidate target for gene therapy of human glioma.
【作者單位】: 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;南昌市第二醫(yī)院神經(jīng)外科;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】:江西省優(yōu)勢科技創(chuàng)新團隊建設(shè)計劃(No.20152BCB24009) 江西省對外科技合作計劃(No.20151BDH80009)
【分類號】:R739.41
【參考文獻】
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