本文選題：帕金森病 + 魚藤酮�。� 參考：《山東醫(yī)藥》2017年15期

【摘要】：目的建立帕金森病(PD)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞模型,并篩選PD細(xì)胞中的氨基酸標(biāo)志物。方法將人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y分為正常組、溶媒組、魚藤酮組。魚藤酮組分別加入0.15、0.25μmol/L的魚藤酮,溶媒組加入二甲基亞砜(DMSO),正常組不加藥物。分別于給藥24、48 h后采用MTT法測算細(xì)胞存活率,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),選擇對(duì)細(xì)胞存活、形態(tài)影響較小的魚藤酮作用濃度及作用時(shí)間(0.15μmol/L、24 h),采用Western blotting法檢測SH-SY5Y細(xì)胞中的α-突觸核蛋白以驗(yàn)證PD模型。采用高效液相色譜法檢測PD細(xì)胞中的谷氨酸(Glu)、絲氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)、組氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、賴氨酸(Lys),對(duì)魚藤酮組和溶媒組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的氨基酸進(jìn)入偏最小二乘判別分析,選擇P0.05且變量重要性投影值(VIP)1的氨基酸為PD的標(biāo)志物。結(jié)果魚藤酮組細(xì)胞中α-突觸核蛋白相對(duì)表達(dá)量高于溶媒組(P均0.05),表明SH-SY5Y細(xì)胞PD模型制作成功。給藥24 h時(shí),魚藤酮組細(xì)胞中Glu、Ser、Gln、His、Gly、Pro、Phe、Ile、Leu、Lys水平低于溶媒組(P均0.05);給藥48 h時(shí),魚藤酮組除Gln外,其余11種氨基酸水平均低于溶媒組(P均0.05)。篩選氨基酸標(biāo)志物為Glu、Ser、Gly、Pro(給藥24 h時(shí)VIP值分別為1.016、1.016、1.016、1.009,給藥48 h時(shí)VIP值均為1.001)。結(jié)論利用魚藤酮誘導(dǎo)成功建立了PD細(xì)胞模型,篩選出Glu、Ser、Gly、Pro可能為PD的潛在標(biāo)志物。
[Abstract]:Objective to establish a human neuroblastoma cell model with Parkinson's disease (PD) and to screen amino acid markers in PD cells. Methods Human neuroblastoma cells (SH-SY5Y) were divided into normal group, solvent group and rotenone group. The rotenone group was added with 0.150.25 渭 mol/L rotenone, the solvent group with dimethyl sulfoxide DMSOO, the normal group with no drug. The cell survival rate was calculated by MTT method 48 hours after 24 hours of administration. The morphology of cells was observed by inverted microscope and the survival rate of cells was selected. The rotenone concentration and the time of action were 0.15 渭 mol / L for 24 h. The 偽 -synaptophysin in SH-SY5Y cells was detected by Western blotting assay to verify the PD model. High performance liquid chromatography (HPLC) method for the detection of glutamate Glun, serine serine, glutamine glutamate, histidine Hisn, glycine Glycine, alanine Alaan, proprol, tryptophan TRP, phenylalanine Phehe, isoleucine Ilel, leucine leucine, lysine Lysn, Lysn in PD cells The difference between ketone group and solvent group was statistically significant. Amino acids entered partial least squares discriminant analysis. The amino acid of VIP1 was selected as the marker of PD. Results the relative expression of 偽 -synaptophysin in rotenone group was higher than that in solvent group (P 0.05), which indicated that the PD model of SH-SY5Y cells was made successfully. After 24 h of administration, the levels of Glutenone group, Glutenone group and Glutenone group were lower than those in the solvent group (P < 0.05) and the other 11 amino acids in the rotenone group were all lower than those in the solvent group (P < 0.05) at 48 h after the administration of rotenone, except for Gln, the levels of the other 11 amino acids in the rotenone group were all lower than those in the solvent group (P < 0.05). The amino acid markers were Glutene Seroglycoprol (VIP values were 1.016 ~ 1.016 ~ 1.016 ~ 1.009 at 24 h and VIP = 1.001 at 48 h) respectively. Conclusion the model of PD cells induced by rotenone was successfully established and the potential marker of PD was screened out.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院;
【基金】：河北省教育廳重大項(xiàng)目(ZD2014075) 河北北方學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R742.5

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本文編號(hào)：1781504