有絲分裂原活化蛋白激酶信號通路介導(dǎo)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪后水通道蛋白4的表達(dá)
本文選題:氧糖剝奪 + 星形膠質(zhì)細(xì)胞。 參考:《中國康復(fù)理論與實(shí)踐》2017年12期
【摘要】:目的探討有絲分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是否介導(dǎo)缺血后大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞水通道蛋白4(AQP4)的表達(dá)。方法分離培養(yǎng)新生Sprague-Dawley大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞。第2代細(xì)胞分成對照組、氧糖剝奪(OGD)組和阻斷組。后兩組復(fù)制OGD 5 h后復(fù)氧模型,12 h后阻斷組分別換入含U0126(1μmol/L和10μmol/L,U1組和U10組)、SP600125(1μmol/L和10μmol/L,SP1組和SP10組)和SB203580(1μmol/L和10μmol/L,SB1組和SB10組)的培養(yǎng)液。復(fù)氧后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、8 h和12 h檢測OGD組細(xì)胞體積,復(fù)氧后0.5 h、1 h、1.5 h、8 h和12 h Western blotting法檢測OGD組AQP4表達(dá);復(fù)氧后24 h,檢測各組乳酸脫氫酶(LDH)活性,Western blotting法檢測各組AQP4,磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(p-ERK)、c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和p38MAPK(p-p38 MAPK)表達(dá)。結(jié)果復(fù)氧后1.5 h、2 h、3 h和4 h時(shí),OGD組細(xì)胞體積較對照組顯著增大(P0.001),OGD組AQP4水平較對照組顯著升高(P0.001),并在復(fù)氧后1.5 h達(dá)到峰值。OGD組p-ERK、p-JNK和p-p38 MAPK、AQP4水平較對照組顯著增加(P0.001),阻斷組p-ERK、p-JNK和p-p38 MAPK較OGD組顯著下降(P0.001),SB10組AQP4較OGD組顯著下降(P0.001)。除SP1組、SB1組外,各干預(yù)組LDH活性較OGD組顯著下降(P0.01),SB10組最低(P0.001)。結(jié)論 MAPK信號通路,特別是p38MAPK可介導(dǎo)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4蛋白表達(dá),加重細(xì)胞壞死。
[Abstract]:Aim to investigate whether mitogen activated protein kinase (MAPKs) mediates the expression of aquaporin 4 (AQP4) in rat astrocytes after ischemia.Methods the astrocytes of newborn Sprague-Dawley rats were isolated and cultured.The second passage cells were divided into control group, OGD group and blocking group.After 5 h of OGD replication and 12 h after reoxygenation, the blocking group was replaced with the culture medium containing U0126 1 渭 mol/L and 10 渭 mol / L LU1 and U10 group (SP600125 渭 mol/L and 10 渭 mol / L LSP1 and SP10 group), SB203580(1 渭 mol/L, 10 渭 mol / L LSB1 group and SB10 group, respectively.The cell volume of OGD group was measured at 0.5 h, 1 h, 1 h, 1 h, 1 h, 2 h and 3 h, and 4 h and 12 h after reoxygenation, and the expression of AQP4 in OGD group was detected by Western blotting assay at 1 h, 1 h, 1 h, 1 h and 12 h after reoxygenation.At 24 h after reoxygenation, the activity of lactate dehydrogenase (LDH) and the expression of extracellular regulated protein kinase (PERK), c-Jun amino-terminal kinase (c-Jun) and p38MAPK(p-p38 (MAPK) were detected by Western blotting assay.Results the cell volume in OGD group was significantly higher than that in control group at 1.5 h, 2 h, 3 h and 4 h after reoxygenation, and the level of AQP4 in OGD group was significantly higher than that in control group, and the levels of p-ERKN p-JNK and p-p38 MAPKN AQP4 in OGD group were significantly higher than those in control group at 1.5 h after reoxygenation.Compared with OGD group, p-ERKN p-JNK and p-p38 MAPK decreased significantly (P 0.001) in SB10 group and OGD group (P 0.001).The activity of LDH in the intervention group was significantly lower than that in the OGD group except the SP1 group (P 0.01) and SB10 group (P 0.001).Conclusion MAPK signaling pathway, especially p38MAPK, can mediate the expression of AQP4 protein in astrocytes and aggravate cell necrosis.
【作者單位】: 陜西省核工業(yè)215醫(yī)院神經(jīng)外科;
【分類號】:R741
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,本文編號:1760744
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