GSK3β、STAT6在缺血后適應(yīng)對靈長類動物缺血再灌注模型的保護機制研究
本文選題:缺血后適應(yīng) 切入點:再灌注損傷 出處:《昆明醫(yī)科大學》2017年碩士論文
【摘要】:[目的]本實驗通過血管介入微導管栓塞法制作靈長類動物腦缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,IR)及腦缺血后適應(yīng)(Ischemic postconditioning,IP)模型,研究在靈長類動物中IP對IR的神經(jīng)保護作用,以檢測caspase-3、bcl-2、GSK3β、STAT6在腦組織中的表達探討在靈長類動物中IP對IR的保護機制。[方法]實驗主要分為三個步驟,第一:采用血管介入微導管栓塞方法建立食蟹猴右側(cè)大腦中動脈栓塞-腦梗死缺血再灌注模型,采用高壓注射器快速、間斷、反復向食蟹猴腦缺血再灌注模型右側(cè)大腦中動脈泵入自體動脈血以建立缺血后適應(yīng),使用靈長類動物腦功能損害模型行為評價量表對術(shù)后的食蟹猴進行神經(jīng)功能評分,采用HE染色評估腦梗死區(qū)域面積大小變化,并分析組織學形態(tài)變化,第二:Western Bolt檢測腦組織內(nèi)caspase-3、bcl-2的表達,QPCR檢測腦組織內(nèi)caspase-3mRNA、bcl-2mRNA的表達,研究caspase-3、bcl-2參與缺血后適應(yīng)對靈長類動物腦缺血再灌注損傷的保護機制,第三:免疫組織化學檢測GSK3β、STAT6的表達,研究GSK3β、STAT6在缺血后適應(yīng)對靈長類動物腦缺血再灌注損傷的保護機制的參與情況,使用SPSS24.0軟件處理數(shù)據(jù)。[結(jié)果]成功建立模型13例,成功模型中IP組6只,IR組6只,假手術(shù)組1只,在新鮮取材中取其中一只IP組的左側(cè)大腦為normal組。1.IP組及IR組的神經(jīng)功能評分均高于假手術(shù)組,IP組神經(jīng)功能評分低于IR組(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義);2.HE染色示:IP組及IR組于大腦中動脈供血區(qū)域出現(xiàn)不同程度腦梗塞病灶,假手術(shù)組未發(fā)現(xiàn)腦梗塞病灶,其中IR組梗死體積大于IP組(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義);3.免疫組化酶標染色GSK3β與STAT6示:IP組及IR組的GSK3β與STAT6陽性細胞計數(shù)均小于假手術(shù)組,其中IP組GSK3β、STAT6的陽性細胞計數(shù)大于IR組;4.Western bolt檢測caspase-3和bcl-2示:腦組織內(nèi)caspase-3的表達IR組最高,IP組其次,normal組最低(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義),腦組織內(nèi)bcl-2的表達normal組最高,IP組其次,IR組最低(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義)。5.QPCR檢測caspase-3mRNA、bcl-2mRNA:腦組織內(nèi)caspase-3mRNA的表達IR組最高,IP組其次,normal組最低(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義),腦組織內(nèi)bcl-2mRNA的表達normal組最高,IP組其次,IR組最低(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義)。[結(jié)論]1.通過血管介入微導管栓塞法可以成功制作靈長類動物IP及IR模型,并通過核磁共振即時證實,且成功率高,模型質(zhì)量穩(wěn)定。2.IP對靈長類IR模型有神經(jīng)保護作用,減少了 IR的梗死面積,并改善梗死后24小時的神經(jīng)功能評分。3.通過HE染色,在靈長類動物中,發(fā)現(xiàn)IP能減輕病灶區(qū)域神經(jīng)組織壞死、水腫程度。4.在靈長類動物中,IP對IR可通過下調(diào)Caspase-3的表達和上調(diào)Bcl-2的表達發(fā)揮神經(jīng)保護。5.在靈長類動物中,GSK3β與STAT6參與了 IP對IR的神經(jīng)保護。
[Abstract]:Objective To study the protective mechanism of IP on IR in primates by vascular interventional microcatheter embolization . The protective mechanism of IP on IR in primates was studied . The expression of caspase - 3 , bcl - 2 , GSK3 尾 and STAT6 in brain tissue was assessed by HE staining . The expression of caspase - 3 mRNA , bcl - 2 mRNA and caspase - 3 mRNA in brain tissue were higher than those in sham operation group ( P0.05 ) . Conclusion : 1 . The IP and IR models of primates can be successfully produced by vascular interventional microcatheter embolization . The results show that IP has neuroprotection effect on primate IR model , reduces the infarct size of IR , and improves the neurological function score of 24 hours after infarction . In primates , IP has neuroprotection by downregulating the expression of Caspase - 3 and up - regulating the expression of Bcl - 2 . In primates , GSK3 尾 and STAT6 participate in IP protection of IR .
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R743
【參考文獻】
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,本文編號:1728787
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