本文選題：膠質(zhì)瘤　切入點：tpd　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2017年04期

【摘要】：目的探究沉默tpd52基因表達后對膠質(zhì)瘤U87細胞增殖、周期及凋亡的影響。方法將攜帶著shRNA-tpd52(抑制tpd52的核苷酸序列)、shRNA-NC(陰性對照的核苷酸序列)的慢病毒體外轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤細胞系U87。在轉(zhuǎn)染48 h后熒光顯微鏡下觀察表達GFP細胞數(shù)量,采用熒光定量PCR、Western blot分別檢測TPD52 mRNA及蛋白表達量,MTT檢測細胞增殖能力,流式細胞術(shù)檢測細胞周期分布,Annexin V和PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡。結(jié)果 U87細胞轉(zhuǎn)染率90%,與shRNA-NC組及空白對照組相比較,shRNA-tpd52組細胞TPD52 mRNA及蛋白表達量明顯減少(P0.01),而且細胞增殖能力明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);細胞周期被阻滯在G0/G1期、細胞凋亡比例明顯增加(P0.05)。結(jié)論沉默膠質(zhì)瘤細胞中tpd52基因表達后,可以有效抑制細胞增殖,阻滯細胞周期,促進細胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of silencing tpd52 gene expression on the proliferation, cycle and apoptosis of U87 glioma cells.Methods the lentivirus carrying shRNA-tpd52 (a nucleotide sequence that inhibits tpd52) was transfected into glioma cell line U87 in vitro.After 48 hours of transfection, the number of GFP cells was observed under fluorescence microscope, and the expression of TPD52 mRNA and protein expression were detected by TPD52 mRNA and protein expression respectively.Cell cycle distribution was detected by flow cytometry and apoptosis was detected by flow cytometry with Annexin V and Pi staining.Results the transfection rate of U87 cells was 900.Compared with the shRNA-NC group and the blank control group, the expression of TPD52 mRNA and protein in the shRNA-tpd52 group was significantly decreased, and the cell proliferation ability was significantly decreased (P 0.05), and the cell cycle was blocked in the G0/G1 phase.The percentage of apoptotic cells increased significantly (P 0.05).Conclusion silencing the expression of tpd52 gene in glioma cells can effectively inhibit cell proliferation, block cell cycle and promote apoptosis.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬陸軍總醫(yī)院臨床學(xué)院神經(jīng)外科;陸軍總醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號:81271391)
【分類號】：R739.41

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本文編號：1701784