本文選題：顱內(nèi)動脈瘤　切入點：血流動力學　出處：《南昌大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:顱內(nèi)動脈瘤形成的具體機制仍在探索。目前認為血流動力學因素所致的血管內(nèi)皮細胞損傷及相關炎癥反應是顱內(nèi)動脈瘤形成的始動環(huán)節(jié)。我們前期研究顯示沖擊流作用下培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細胞P120連環(huán)蛋白(P120-catenin,p120ctn)及轉錄因子Kaiso的表達均減少。本研究擬通過體外實驗觀察沖擊流作用下人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)p120ctn及Kaiso的亞細胞定位的變化,探究p120ctn及Kaiso參與調控血流動力學所致內(nèi)皮細胞受損的相關機制。方法:體外實驗培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)及運用shRNA CTNND1重組慢病毒轉染的HUVEC。分別將上述兩種細胞種植在涂有纖維連接蛋白(fibronectin,FN)的普通載玻片上,待細胞90%以上融合后,將載玻片置入沖擊流作用下內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)裝置。對照組不加載沖擊流,實驗組加載流速為500ml/min的沖擊流作用于HUVEC 3小時和6小時。運用蛋白免疫印跡和免疫細胞化學檢測p120ctn和Kaiso在細胞胞漿及胞核的表達情況。結果:(1)在沖擊流作用下培養(yǎng)6小時后,可見沖擊點處細胞的形態(tài)及細胞間粘附維持正常;其臨近區(qū)域的細胞密度明顯降低,可見細胞變圓,且大部分被沖散;而下游區(qū)域的細胞密度增大,部分細胞生長排列與沖擊流方向大致相同。(2)蛋白免疫印跡分析顯示:對照組HUVEC的胞質及胞核內(nèi)均表達p120ctn和Kaiso。與對照組相比,隨著沖擊流作用時間延長,實驗組HUVEC內(nèi)p120ctn在胞質表達下降,在胞核表達增多,具有統(tǒng)計學意義(P0.05);Kaiso在胞質內(nèi)表達無明顯變化(P0.05),而在胞核內(nèi)表達增多(P0.05)。運用shRNA CTNND1重組慢病毒轉染HUVEC后,與正常HUVEC對比,其p120ctn蛋白表達顯著降低,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(3)免疫細胞化學顯示:對照組HUVEC內(nèi)p120ctn主要在胞質內(nèi)表達;Kaiso主要在胞核周圍表達,在胞核內(nèi)少量表達。與對照組相比,隨著沖擊流作用時間延長,p120ctn在胞質內(nèi)表達減少,在胞核內(nèi)表達明顯增多;Kaiso在胞核周圍表達減弱,而在胞核中表達有增多的趨勢。運用shRNA CTNND1重組慢病毒轉染HUVEC后,p120ctn表達明顯減弱,且Kaiso在細胞核表達增多的趨勢減弱。結論:沖擊流作用下,隨著加載沖擊流時間的延長,HUVEC內(nèi)p120ctn可能發(fā)生質核穿梭,由胞質進入胞核內(nèi)。敲除p120ctn基因后,沖擊流作用下Kaiso在細胞核內(nèi)的表達減少。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of p120ctn and Kaiso in cultured human umbilical vein endothelial cells ( HUVEC ) in vitro . ( 3 ) Immunocytochemistry showed that p120ctn was mainly expressed in the cytoplasm and the expression of Kaiso was decreased in cytoplasm .

【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R743

【參考文獻】

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本文編號：1681138