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鹽酸小檗堿誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251凋亡及其與HERG鉀離子通道的表達(dá)相關(guān)研究

發(fā)布時間:2018-03-16 15:42

  本文選題:鹽酸小檗堿 切入點:膠質(zhì)瘤 出處:《臨床神經(jīng)外科雜志》2014年02期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討鹽酸小檗堿(ber)誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251凋亡及其與HERG鉀離子通道表達(dá)相關(guān)性。方法使用不同濃度的ber處理人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251,采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)染色法測定細(xì)胞增值率,Hoechst33258熒光染色法觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率,分別采用實時熒光定量PCR與Western Blotting檢測HERG鉀通道的RNA及蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 MTT法檢測顯示細(xì)胞抑制率呈濃度與時間依賴性,且隨藥物濃度增加而增大(P0.05),其24 h的半數(shù)抑制濃度(IC50))是(8.78±0.20)μmol/l;Hoechst33258熒光染色法檢測表明處理組出現(xiàn)典型的凋亡特征;且流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明隨著ber的劑量增加U251細(xì)胞的早期凋亡率及晚期凋亡率逐漸增大(P0.05);RT-PCR與Western Bloting檢測結(jié)果顯示ber處理后U251細(xì)胞的HERG鉀通道的RNA含量及蛋白的表達(dá)均上調(diào),且隨著藥物濃度的增高而增高。結(jié)論在體外ber可誘導(dǎo)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251的凋亡,并可能通過上調(diào)HERG蛋白的表達(dá)抑制U251增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the apoptosis of human glioma cell U251 induced by berberine hydrochloride (berberine hydrochloride) and its correlation with HERG potassium channel expression. Methods U251 human glioma cell line U251 was treated with different concentrations of ber. The changes of cell morphology were observed by Hoechst33258 fluorescence staining. Apoptosis rate was measured by flow cytometry, RNA and protein expression of HERG potassium channel were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western Blotting, respectively. Results MTT assay showed that the cell inhibition rate was in a concentration and time dependent manner. The half inhibitory concentration (IC50) at 24 h was 8.78 鹵0.20 渭 mol / L Hoechst33258 fluorescence staining. The results of flow cytometry showed that the early apoptosis rate and late apoptosis rate of U251 cells increased gradually with the increase of ber dose. The results of RT-PCR and Western Bloting showed that the RNA content and protein expression of HERG potassium channel in U251 cells treated with ber were up-regulated. Conclusion ber can induce the apoptosis of human glioma cell line U251 in vitro and inhibit the proliferation of U251 by upregulating the expression of HERG protein.
【作者單位】: 蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院神經(jīng)外科;
【分類號】:R739.4

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