本文選題：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤　切入點(diǎn)：EZH2　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中常見(jiàn)的呈進(jìn)展性的惡性腫瘤,也是人類(lèi)死亡率最高的腫瘤之一。根據(jù)2007年世界衛(wèi)生組織的分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn),膠質(zhì)母細(xì)胞瘤被分為四種病理亞型(Ⅰ-Ⅳ)。多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM, WHO Ⅳ)是目前公認(rèn)的惡性程度最高、預(yù)后最差的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。盡管過(guò)去多年對(duì)此類(lèi)的腫瘤的治療策略發(fā)生了很大的變化,多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的侵襲性的特性決定了腫瘤的治療仍然是以手術(shù)切除為基礎(chǔ),輔以其他治療方法以延長(zhǎng)患者的存活期。在其他腫瘤患者中放療能延長(zhǎng)患者的存活期,甚至能治愈腫瘤,而放療輔以化療較單純的放療能延長(zhǎng)患者的存活期。在近期的一項(xiàng)隨機(jī)研究中,放療輔以替莫唑胺化療使得多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的無(wú)進(jìn)展存活期以及總存活期顯著延長(zhǎng),從平均12.1個(gè)月延長(zhǎng)至14.6個(gè)月。替莫唑胺作為一種口服的化療藥物,其副作用較小,通過(guò)增加腫瘤對(duì)放了的敏感性,已經(jīng)成為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療方案。然而替莫唑胺對(duì)患者的存活期的影響、腫瘤的復(fù)發(fā)以及腫瘤對(duì)替莫唑胺的耐藥仍然是巨大的挑戰(zhàn)。盡管放療輔以替莫唑胺化療方案能延長(zhǎng)多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者總的存活期,但是手術(shù)不能完全切除腫瘤以及腫瘤細(xì)胞對(duì)放療得抵抗及對(duì)替莫唑胺的耐藥仍然使得幾乎所有的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者治療失敗。有些多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤在首次確診時(shí)就對(duì)替莫唑胺耐藥,有些腫瘤在治療的過(guò)程中逐漸對(duì)替莫唑胺產(chǎn)生耐藥。因此對(duì)替莫唑胺耐藥成了治療多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的一大難題。EZH2蛋白是由EZH2基因編碼的一種蛋白質(zhì),目前研究證實(shí)其存在于染色體的7q35位置,包含20個(gè)外顯子和19個(gè)內(nèi)含子。EZH2蛋白屬于多梳蛋白家族,形成多聚蛋白復(fù)合體以維持基因的轉(zhuǎn)錄抑制狀態(tài)。以往的研究顯示EZH2發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制是通過(guò)直接控制DNA的甲基化水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。除了存在于干細(xì)胞中,在正常細(xì)胞中EZH2的表達(dá)較低,難以被常規(guī)方法檢測(cè)到或是處以表達(dá)抑制狀態(tài)。與此相反,在前列腺癌、非小細(xì)胞肺癌、子宮內(nèi)膜癌和肝癌等多種腫瘤細(xì)胞中能檢測(cè)到EZH2的異常高表達(dá),提示EZH2在腫瘤的發(fā)生、惡化進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。盡管EZH2在多種腫瘤的發(fā)生及惡化過(guò)程中的作用被廣泛研究,但是其在腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的產(chǎn)生耐藥中是否發(fā)揮作用以及如何發(fā)揮作用仍然不清。在本研究中,我們通過(guò)U251、U87以及對(duì)替莫唑耐藥的U251、U87細(xì)胞系來(lái)研究EZH2在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)替莫唑胺耐藥中的機(jī)制。材料與方法細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染人類(lèi)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U251及U87使用含10%胎牛血清、100IU每毫升青霉素、0.1mg每毫升鏈霉素的培養(yǎng)基(DMEM)在含5% CO2、37。C的環(huán)境中培養(yǎng)。在培養(yǎng)基中加入100μM的替莫唑胺連續(xù)2個(gè)星期來(lái)創(chuàng)建替莫唑胺的耐藥株。每隔三天更換含有替莫唑胺的培養(yǎng)液,大部分的細(xì)胞死亡了,但是有小部分細(xì)胞存活并逐漸穩(wěn)定傳代,成功建立了替莫唑胺耐藥的U251細(xì)胞株(U251/TMZ cells)及U87細(xì)胞株(U87/TMZ cells)。使用Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞,嚴(yán)格按操作說(shuō)明(Invitrogen, Carlsbad,CA)執(zhí)行。定量RT-PCR使用定量PCR來(lái)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)錄的相對(duì)水平。使用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶加入提取的2ug大RNA。cDNA用來(lái)放大EZH2基因,β-actin基因用作內(nèi)源性參照物。PCR的條件為：94℃ 4分鐘,94℃ 1分鐘40個(gè)循環(huán),56℃ 1分鐘,and 72℃ 1分鐘。PCR 引物：EZH2 forward,5'-GCC AGA CTG GGA AGA AAT CTG-3' reverse, 5'-TGT GCT GGA AAA TCC AAG TCA-3';內(nèi)源性參照物P-actin forward,5'-ACC CCC ACT GAA AAA GAT GA-3'and reverse,5'-ATC TTC AAA CCT CAT GAT G-3'。MTT試驗(yàn)通過(guò)MTT試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞活力。在96孔板上放置5x104細(xì)胞/孔,加入替莫唑胺(200 μg/ml)培養(yǎng)24,48,72,96和120小時(shí)。經(jīng)過(guò)3天的培養(yǎng),每孔加入20μl的MTT溶液(5 mg/ml;Sigma)培養(yǎng)4小時(shí),然后移去MTT溶液,加入200μl二甲基亞砜(DMSO; Sigma)來(lái)溶解晶體。通過(guò)570nnm波長(zhǎng)的光密度儀檢測(cè)。免疫印跡試驗(yàn)培養(yǎng)的細(xì)胞裂解：裂解液RIPA(0.1% SDS,1% Triton X-100、1mM MgCl 2、10mM Tris-HCl,pH7.4)4℃ 30分鐘,收集裂解液并離心,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。全細(xì)胞裂解液(50μG)使用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分離。將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)到硝酸纖維素膜上。非特異性結(jié)合位點(diǎn)使用5%脫脂奶粉TBST溶液(100mM Tris-HC1,pH值7.5,150 mM氯化鈉,0.1%Tween 20)封閉,使用抗ezh2和抗GAPDH抗體室溫孵育2小時(shí)。用TBST洗滌4次后,將膜用羊抗兔辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗孵育(西格瑪奧德里奇,圣路易斯,MO)5%脫脂奶粉TBST溶液在室溫下反應(yīng)1小時(shí)；采用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法顯影(Perkin-Elmer Life Sciences, Boston, MA, USA)。SiRNA轉(zhuǎn)染EZH2和siRNAs由上海吉瑪制藥合成(上海,中國(guó))�？笶ZH2靶序列及對(duì)照序列：5'-GAC UCU GAA UGC AGU UGC UTT-3'和5'-AGC A AC UGC AUU CAG AGU CTT-3'。細(xì)胞接種于6孔板中生長(zhǎng)在含血清和無(wú)抗生素的培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)染細(xì)胞達(dá)到60%融合時(shí),用脂質(zhì)體2000(Invitrogen)根據(jù)制造商的說(shuō)明進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后4-6小時(shí)后細(xì)胞使用常規(guī)培養(yǎng)液沖洗,48小時(shí)后測(cè)試抑制的效率。流式細(xì)胞儀分析按上面描述的轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,收集細(xì)胞,PBS洗兩次。洗過(guò)的細(xì)胞于0.6mlPBS重懸,用1.4毫升加100%乙醇溶液固定在4℃過(guò)夜。固定細(xì)胞用PBS洗兩次,并用碘化丙啶(PI)溶液重懸,PBS溶液包括50 ug/mL的PI和50 ug/ml RNaseA (Sigma)沒(méi)有鈣和鎂,并分別在37℃遮光孵育30分鐘。染色后的細(xì)胞通過(guò)尼龍網(wǎng)篩除去細(xì)胞團(tuán)塊,用流式細(xì)胞儀和Cell Quest軟件分析(Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)。流式細(xì)胞儀重復(fù)分析3次。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示,使用Students-Newman-Keuls方法比較,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果和母系U251及U87細(xì)胞系相比,EZH2在U251/TMZ和U87/TMZ中的表達(dá)增加。我們檢測(cè)了U251/TMZ細(xì)胞、U87/TMZ細(xì)胞及母系U251及U87細(xì)胞系的生長(zhǎng)活力。結(jié)果表明,與U251及U87相比U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞約5倍耐TMZ。我們還檢測(cè)了EZH2在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞和TMZ誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞的蛋白表達(dá)。結(jié)果表明：在U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞比在母系膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞EZH2的表達(dá)水平更高,提示EZH2可能與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的耐藥機(jī)制有關(guān)。EZH2 siRNA能逆轉(zhuǎn)U251/TMZ和U87/TMZ對(duì)替莫唑胺的耐藥性。為了確定EZH2在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)替莫唑胺耐藥機(jī)制中是否起著關(guān)鍵的作用,我們將U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞轉(zhuǎn)染EZH2 siRNA和對(duì)照siRNA。轉(zhuǎn)染的效率使用定量RT-PCR證實(shí)。Western blot結(jié)果表明EZH2 siRNA可有效降低EZH2蛋白水平。MTT試驗(yàn)顯示敲除EZH2可以顯著降低U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞大約30-40%的活力,提示EZH2可能調(diào)節(jié)U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞對(duì)替莫唑胺的耐藥性。EZH2 siRNA轉(zhuǎn)染的U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞凋亡。探討細(xì)胞凋亡增加是否是因?yàn)樵谵D(zhuǎn)染了EZH2 siRNA的U251/TMZ和U87 /TMZ細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制,使用Annexin V和PI雙染色來(lái)觀察細(xì)胞的凋亡。在轉(zhuǎn)染了EZH2 siRNA的細(xì)胞中觀察到了凋亡細(xì)胞的增加。EZH2 siRNA轉(zhuǎn)染導(dǎo)致U251/TMZ和U87/TMZ的細(xì)胞周期阻滯在G1期。細(xì)胞周期進(jìn)展延遲是抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的另一個(gè)重要機(jī)制。通過(guò)U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞來(lái)研究EZH2 siRNA對(duì)細(xì)胞周期分布的影響。流式細(xì)胞儀分析表明,G1期細(xì)胞的比例在抑制EZH2的細(xì)胞較對(duì)照組增加,提示EZH2的表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程。EZH2 siRNA處理可以降低MDR,MRP和BCRP的表達(dá)。腫瘤的多藥耐藥是針對(duì)腫瘤化療方案能否成功的主要障礙。腫瘤細(xì)胞能夠抵抗化療藥物的一個(gè)關(guān)鍵的機(jī)制在于增加ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá),包括P-糖蛋白(P-gp、MDR1)、多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)和乳腺癌耐藥蛋白(BCRP)等。這些蛋白質(zhì)發(fā)揮了對(duì)多種結(jié)構(gòu)不同的化療藥物的能量依賴性的藥物外排泵的作用,能夠降低細(xì)胞內(nèi)化療藥物蓄積。EZH2 siRNA轉(zhuǎn)染后,我們通過(guò)定量RT-PCR和Western blot檢測(cè)MDR,MRP和BCRP的mRNA和蛋白表達(dá)水平,結(jié)果表明抑制EZH2的表達(dá)水平可以降低MDR,MRP和BCRP的表達(dá)。討論多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是最常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性惡性腦腫瘤,其中位生存期約14個(gè)月左右�；颊咴谑中g(shù)切除腫瘤并取得病理診斷確診后,于放療的同時(shí)結(jié)合替莫唑胺化療對(duì)于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者能增加其生存的時(shí)間,但是幾乎所有的患者都因?yàn)槟[瘤復(fù)發(fā)、病情惡化而死亡。腫瘤細(xì)胞的耐藥是多個(gè)因素相互作用、共同發(fā)展的一個(gè)極為復(fù)雜的過(guò)程,對(duì)于原發(fā)性腫瘤和繼發(fā)性腫瘤主要表現(xiàn)出對(duì)化療藥物的抵抗,即化療藥物不能完全殺滅腫瘤細(xì)胞。多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)替莫唑胺產(chǎn)生耐藥已經(jīng)成為該疾病治療中的一個(gè)嚴(yán)重的障礙。目前的研究顯示MGMT、MMR酶活性、BER修復(fù)途徑和藥物外排泵被認(rèn)為是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者對(duì)替莫唑胺產(chǎn)生耐藥的最重要的機(jī)制。然而,這些機(jī)制仍然不能解釋該現(xiàn)象所有的耐藥機(jī)制。在這里,我們?cè)噲D確定影響替莫唑胺對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的療效的一些非常規(guī)的因素。采用TMZ敏感和耐TMZ-膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的基因表達(dá)分析,我們發(fā)現(xiàn)在在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中沉默EZH2表達(dá)水平與TMZ耐藥表型相關(guān)。果蠅zeste基因增強(qiáng)子同源物2(EZH2)是多梳組成員(PCG)蛋白質(zhì)。PeG蛋白是重要的表觀遺傳調(diào)節(jié)蛋白,可通過(guò)染色質(zhì)修飾轉(zhuǎn)錄抑制沉默特定的基因。PcG蛋白組成的多梳抑制復(fù)合物(PRC)。其中PRC2包括增強(qiáng)EZH2、 SUZ12和EED。EZH2屬于PRC2復(fù)合體的核心成員,目前研究顯示其主要作用是使組蛋白的27位賴氨酸三甲基化來(lái)抑制特異基因的轉(zhuǎn)錄。近年來(lái),越來(lái)越多的研究顯示EZH2有促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展的作用,包括影響細(xì)胞分化和增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的增殖和體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)。EZH2在多種惡性腫瘤中呈過(guò)度表達(dá),如卵巢癌、胰腺癌、肝癌等,且其過(guò)度表達(dá)狀態(tài)與患者預(yù)后不良相關(guān)呈正相關(guān)。在我們的研究中,我們初步證實(shí)EZH2在對(duì)替莫唑胺耐藥的人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U251/TMZ和U87/TMZ中呈高表達(dá)。因?yàn)镋ZH2在功能上屬于甲基轉(zhuǎn)移酶,過(guò)度表達(dá)的EZH2可以通過(guò)增加DNA組蛋白的甲基化來(lái)調(diào)控下游基因的轉(zhuǎn)錄。為了解釋EZH2表達(dá)升高的機(jī)制,我們采用RNA干擾技術(shù)沉默EZH2的表達(dá),發(fā)現(xiàn)EZH2 siRNA轉(zhuǎn)染入腫瘤細(xì)胞后,能快速有效地沉默EZH2基因mRNA和蛋白水平,轉(zhuǎn)染效率可達(dá)到70%以上,表明轉(zhuǎn)染EZH2 siRNA有較好的抑制作用。為了計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)活力,通過(guò)MTT法檢測(cè)EZH2和TMZ耐藥細(xì)胞株U251/TMZ和U87／TMZ生長(zhǎng)能力之間的關(guān)系。EZH2表達(dá)下調(diào)可顯著降低U251/TMZ和U87細(xì)胞／TMZ 30-40%的細(xì)胞生長(zhǎng)活力,提示EZH2可能具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的能力,這一結(jié)果與在乳腺癌和前列腺癌中的研究結(jié)果相一致。EZH2沉默后TMZ對(duì)U251/TMZ和U87/TMZ細(xì)胞殺傷力明顯增強(qiáng)。細(xì)胞周期可用于評(píng)估腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。我們分析了每一組的細(xì)胞周期分布,發(fā)現(xiàn)在對(duì)照組和轉(zhuǎn)染si EZH2組,在G1期的細(xì)胞比例有逐漸增加的趨勢(shì),而在S,G2和M期細(xì)胞的比例則相應(yīng)的出現(xiàn)降低,表明細(xì)胞周期在G1期發(fā)生阻滯。這一發(fā)現(xiàn)表明EZH2 siRNA處理可通過(guò)阻斷從G1期向S期和G2期過(guò)渡從而抑制細(xì)胞周期的進(jìn)展。這個(gè)發(fā)現(xiàn)和在結(jié)腸癌中發(fā)現(xiàn)的沉默EZH2能降低cyclin D1的表達(dá),導(dǎo)致在細(xì)胞周期在G1/S期阻滯相一致。此外,在胰腺癌的研究中,沉默EZH2基因能增強(qiáng)p27Kip1的表達(dá),從而抑制細(xì)胞周期G1/S期的過(guò)渡。在我們的實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)與以前的報(bào)道是一致的。腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥的機(jī)制是非常復(fù)雜的過(guò)程,與基因、細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等因素密切相關(guān)。ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)在以往的研究中被認(rèn)為在多種腫瘤多藥耐藥性的發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。腫瘤患者一旦出現(xiàn)多藥耐藥,其不僅僅對(duì)正在服用的化療藥物產(chǎn)生抗藥性,同時(shí)也對(duì)多種從未使用過(guò)且作用機(jī)制不同的化療藥物產(chǎn)生耐藥。這是由幾個(gè)因素造成的,其中一個(gè)是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白發(fā)揮的增加藥物從細(xì)胞內(nèi)的排泄的作用。例如,ABCB1蛋白(P-gp)具有將抑制腫瘤藥物泵出細(xì)胞的功能。P-gp亦稱MDR1,ABCB1,是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的代表和研究最廣泛的基因。P-gp已知具有運(yùn)輸有機(jī)陽(yáng)離子或中性化合物的作用。另外一個(gè)ABCC家族成員,也被稱為MRP,也被證明具有運(yùn)輸有機(jī)陰離子化合物出細(xì)胞的作用。ABCG家族研究最多的成員ABCG2,也稱BCRP(乳腺癌耐藥蛋白),具有抵抗大多數(shù)拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ或Ⅱ抑制劑如拓?fù)涮婵�、伊立替康、多柔比星的作用。我們的研究在基因和蛋白水平證實(shí)了這一結(jié)論。探討對(duì)替莫唑胺耐藥的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞在EZH2被抑制后恢復(fù)了對(duì)化療敏感性的機(jī)制,我們還檢測(cè)了MDR,MRP和BCRP的表達(dá),發(fā)現(xiàn)MDR, MRP和BCRP的表達(dá)在EZH2沉默后顯著降低。如上所述,MDR,MRP和BCRP,屬于ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族,作為藥物泵能將化療藥物泵出腫瘤細(xì)胞。當(dāng)MDR,MRP和BCRP表達(dá)上調(diào)時(shí),藥物外排泵可以減少化療藥物的細(xì)胞內(nèi)濃度,從而降低TMZ的殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。EZH2基因沉默能降低MDR,MRP和BCRP mRNA和蛋白水平,從而降低外排泵活性,能增加膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的化療敏感性。因此,EZH2介導(dǎo)的耐藥作用可能通過(guò)MDR,MRP和BCRP來(lái)實(shí)現(xiàn)的。研究結(jié)論：我們的研究顯示EZH2在多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞對(duì)替莫唑胺產(chǎn)生耐藥的過(guò)程中所發(fā)揮關(guān)鍵的作用,研究結(jié)果表明抑制EZH2能逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞對(duì)替莫唑胺的耐藥狀態(tài),EZH2介導(dǎo)的耐藥作用可能是通過(guò)增加MDR,MRP和BCRP等轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R739.41

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2 田新華;林曉寧;林錦超;魏峰;莊再旺;任磊;陳鍔;孫瑾;;替莫唑胺聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒的制備方法比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 李紅霞;黃佳;史衛(wèi)忠;趙志剛;;冰片作用下替莫唑胺在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

4 王新東;郎岳明;勵(lì)勇;徐將榮;高峰;李江;余建軍;;替莫唑胺治療腦膠質(zhì)瘤的臨床分析[A];2011年浙江省神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

5 孫濤;董瑩;張矛;;替莫唑胺聯(lián)合放射治療在非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移患者治療中的作用研究[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

6 田新華;林曉寧;林錦超;魏峰;莊再旺;任磊;陳鍔;孫瑾;;腦靶向載替莫唑胺聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

7 許建萍;張湘茹;李峻嶺;王宏羽;王燕;郝學(xué)志;石遠(yuǎn)凱;;替莫唑胺聯(lián)合伊立替康治療復(fù)發(fā)性非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的療效和毒副作用分析[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

8 宋諸臣;楊磊;魏金芝;叢智榮;彭春雷;;替莫唑胺聯(lián)合美羅華治療復(fù)發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤(附1例報(bào)告)[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

9 陳鵬;傅偉明;張宏;石鍵;;替莫唑胺治療術(shù)后殘留惡性腦膠質(zhì)瘤的療效[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

10 孫爽;李鴻彬;;替莫唑胺對(duì)腦轉(zhuǎn)移腫瘤的治療研究報(bào)告[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前6條

1 徐道;抗腦瘤老藥替莫唑胺煥發(fā)生機(jī)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

2 ;替莫唑胺新適應(yīng)癥獲批[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

3 國(guó)訊;英國(guó)提示替莫唑胺的肝臟損害風(fēng)險(xiǎn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2014年

4 劉民;替莫唑胺可長(zhǎng)期治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

5 董江萍;FDA增加替莫唑胺的骨髓抑制警告[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

6 雷諾島;徹底擊斃毀滅性疾病[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉彥廷;長(zhǎng)鏈非編碼RNA RP11-838N2.4通過(guò)miR-10a調(diào)控腦膠質(zhì)瘤替莫唑胺耐藥性的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

2 樊天禹;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中抑制EZH2的表達(dá)改善替莫唑胺化療敏感性的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

3 李曉明;人腦膠質(zhì)瘤中DEC1的表達(dá)對(duì)烷化劑替莫唑胺化療敏感性影響的分子機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

4 林靖;泛素連接酶Fbw7在人腦膠質(zhì)瘤增殖、侵襲、遷移以及對(duì)替莫唑胺敏感性中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

5 林洪;白藜蘆醇誘導(dǎo)惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡并增強(qiáng)替莫唑胺藥物敏感性作用的分子機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

6 宋振華;survivin在替莫唑胺誘導(dǎo)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及老化中的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

7 崔勇;RNA干擾AKT2對(duì)腦膠質(zhì)瘤替莫唑胺化療敏感性的影響及相關(guān)機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

8 朱巍巍;替莫唑胺誘導(dǎo)的人腦膠質(zhì)瘤耐藥細(xì)胞株的建立及其繼發(fā)性耐藥相關(guān)基因的篩查[D];蘇州大學(xué);2011年

9 程全;替莫唑胺通過(guò)調(diào)控miR-223/PAX6抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的研究[D];中南大學(xué);2014年

10 劉岳;BCL-2與人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤生物學(xué)特性及替莫唑胺敏感性的關(guān)系[D];武漢大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 趙海濤;替莫唑胺聯(lián)合全腦放療治療復(fù)發(fā)/難治性原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的臨床研究[D];濟(jì)南大學(xué);2015年

2 王勇;替莫唑胺為主的化療聯(lián)合放療治療原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤的臨床研究[D];濟(jì)南大學(xué);2013年

3 王能江;原發(fā)性腦膠質(zhì)瘤術(shù)后替莫唑胺化療的臨床觀察[D];華中科技大學(xué);2007年

4 李梅;替莫唑胺靜脈乳的制備及質(zhì)量研究[D];山東大學(xué);2013年

5 王蘭;抗腫瘤藥替莫唑胺一氧化氮供體型衍生物的合成與表征[D];天津大學(xué);2007年

6 潘強(qiáng);替莫唑胺耐藥的惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系耐藥特性演變的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

7 卓龍泉;放療聯(lián)合替莫唑胺化療治療非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的療效評(píng)價(jià)[D];吉林大學(xué);2013年

8 湯浩;乙胺嘧啶協(xié)同替莫唑胺聯(lián)合用藥對(duì)小鼠垂體促性腺激素腺瘤細(xì)胞的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

9 唐東方;替莫唑胺衍生物治療人腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2012年

10 溫宏宇;惡性腦膠質(zhì)瘤術(shù)后放療聯(lián)合替莫唑胺療效分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：1568306