本文關(guān)鍵詞： 腦缺血再灌注 腺苷 HIF-1α VEGF EPO　出處：《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景 缺血性腦病嚴(yán)重威脅著人類的健康,它以高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率為特點(diǎn),給患者、家庭、社會(huì)帶來了痛苦和負(fù)擔(dān)。所以缺血性腦病一致備受醫(yī)學(xué)界關(guān)注。在缺血性腦血管病中,大腦中動(dòng)脈(MCA)供血區(qū)的發(fā)病率占到了60%。由于大鼠具有低成本、純合性好、腦血管解剖結(jié)構(gòu)及功能與人類的相似,一直成為學(xué)者們制作最接近人類腦梗死的動(dòng)物模型的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 目的 通過對(duì)缺血再灌注大鼠進(jìn)行腺苷預(yù)處理,觀察損傷腦組織的病理結(jié)構(gòu)改變,梗死體積變化和HIF-1α、VEGF、EPO在海馬區(qū)的表達(dá)情況,從而探討腺苷預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷神經(jīng)保護(hù)作用的具體機(jī)制。 方法 1、腦缺血再灌注模型的建立健康雄性SD大鼠120只,體重在230-280g,隨機(jī)分為假手術(shù)組(F組)、腺苷預(yù)處理假手術(shù)組(AF組)、缺血再灌注組(IR組)、腺苷預(yù)處理缺血再灌注組(AR組),根據(jù)再灌注時(shí)間的不同又隨機(jī)分為6h、12h、24h三個(gè)亞組。用線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。假手術(shù)組及腺苷預(yù)處理假手術(shù)組除不用線栓外,余同手術(shù)組。術(shù)后術(shù)后每組取24只進(jìn)行觀察,觀察不同時(shí)間點(diǎn)大鼠右側(cè)Homer征和左側(cè)肢體癱瘓?bào)w征來判斷模型是否成功。 2、各組大鼠在不同再灌注時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能缺失行為學(xué)評(píng)分。 3、通過TTC染色檢測(cè)大鼠局灶性腦缺血再灌注梗死體積的大小。 4、通過HE染色觀察大鼠局灶性腦缺血再灌注海馬神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。 5、通過免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組不同再灌注時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬區(qū)HIF-1α、VEGF、EPO的表達(dá)變化情況。 結(jié)果 1、神經(jīng)缺失癥狀和功能評(píng)分：F、AF組大鼠均無神經(jīng)功能缺失癥狀,評(píng)分為0分。IR、AR組大鼠均出現(xiàn)不同程度神經(jīng)功能缺失癥狀,對(duì)比得出,AR組大鼠不同再灌注時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺失評(píng)分較IR組低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2、TTC染色：F、AF組大鼠雙側(cè)大腦半球未見明顯梗死灶,呈均勻紅色。IR、AR組右側(cè)大腦半球可見蒼白色的梗死區(qū)域,主要位于額頂葉皮質(zhì)和紋狀體。AR組較IR組腦梗死體積明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05)。 3、HE染色：F、AF組大鼠海馬區(qū)細(xì)胞排列緊密、規(guī)則、整齊,細(xì)胞輪廓清楚,胞體飽滿,核居中,核仁清晰,未見死亡神經(jīng)元,無異常的形態(tài)學(xué)改變；缺血再灌注6h海馬區(qū)錐體細(xì)胞層輕度水腫,部分細(xì)胞出現(xiàn)了核固縮、濃染現(xiàn)象；再灌注12h、24h,細(xì)胞損傷情況有所減輕。AR組較IR組在相同缺血再灌注時(shí)間點(diǎn)的大鼠腦組織病理改變有明顯改善,12h后改善客觀。 4、HIF-1α免疫組織化學(xué)染色：免疫組織化學(xué)染色后,結(jié)果表明F、AF組大鼠海馬區(qū)HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)少見,IR組大鼠腦缺血再灌注6h、12h、24h時(shí),HIF-1α的陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞升高,在12h達(dá)到高峰,隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降；AR組在不同腦缺血再灌注時(shí)間點(diǎn)HIF-1α表達(dá)較IR組明顯升高(P0.05)。 5、VEGF免疫組織化學(xué)染色：VEGF在F、AF組大鼠腦組織海馬區(qū)表達(dá)微弱,IR組大鼠腦組織海馬區(qū)VEGF表達(dá)明顯增加,12h達(dá)到高峰,AR組在不同腦缺血再灌注時(shí)間點(diǎn)表達(dá)較IR組明顯升高(P0.05)。 6、EPO免疫組織化學(xué)染色：EPO陽(yáng)性細(xì)胞在F、AF組海馬區(qū)中少見,1R、AR組在不同再灌注時(shí)間點(diǎn)EPO受HIF-la的表達(dá)作用影響,海馬區(qū)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯增加,12h達(dá)到高峰,之后逐漸降低；AR組與IR組在相同再灌注時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)比較明顯增高(P0.05)。 結(jié)論 1、腺苷預(yù)處理顯著減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注腦組織的損傷,并且能有效的改善再灌注引起的神經(jīng)功能損傷癥狀。 2、腺苷預(yù)處理可以增加再灌注腦組織海馬區(qū)HIF-1α、VEGF、EPO陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)。
[Abstract]:Background Ischemic brain disease is a serious threat to human health . It is characterized by high morbidity , high disability rate and high mortality rate , which brings pain and burden to patients , families and society . In ischemic cerebrovascular disease , the incidence of cerebral middle cerebral artery ( MCA ) supply region accounts for 60 % . Purpose The expression of HIF - 1偽 , VEGF and EPO in hippocampus was observed by adenosine preconditioning in ischemia - reperfusion rats , and the specific mechanism of adenosine preconditioning on the protective effects of adenosine preconditioning on focal cerebral ischemia - reperfusion injury in rats was investigated . method The rats were randomly divided into three subgroups : sham operation group ( group F ) , adenosine preconditioning sham operation group ( AF group ) , ischemia / reperfusion group ( IR group ) and adenosine preconditioning ischemia / reperfusion group ( AR group ) . 2 . The neurological deficit behavior score of each group of rats at different reperfusion time points . 3 . The size of infarct volume in focal cerebral ischemia / reperfusion was measured by TTC staining . 4 . The morphological changes of neurons in hippocampus after focal cerebral ischemia / reperfusion in rats were observed by HE staining . 5 . The expression of HIF - 1偽 , VEGF and EPO in hippocampus of rats with different reperfusion time points was detected by immunohistochemistry . Results 1 . There were no neurological deficit symptoms in F and AF group , and the score was 0 . IR and AR group showed different degree of neurological deficit symptoms , and the difference was statistically significant ( P0.05 ) . 2 銆，

本文編號(hào)：1547309