本文關(guān)鍵詞： 吉蘭-巴雷綜合征 空腸彎曲菌 細(xì)菌分離 血清抗體 Meta分析 吉蘭-巴雷綜合征 空腸彎曲菌分離 基因分型 吉蘭-巴雷綜合征 空腸彎曲菌 多位點(diǎn)序列分型　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分GBS與C.jejuni感染相關(guān)性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)及Meta分析 目的：評(píng)價(jià)GBS與C.jejuni感染相關(guān)性。 方法：電子檢索Pubmed(1966-2013.11)數(shù)據(jù)庫，輔以手工檢索，提取C.jejuni感染后GBS發(fā)病率、GBS患者C.jejuni分離率、GBS患者血清抗C.jejuni抗體陽性率數(shù)據(jù)，使用R軟件合并率，并對(duì)相關(guān)因素進(jìn)行meta回歸，查找異質(zhì)性的原因。 結(jié)果：最終納入25篇文獻(xiàn)，其中目的結(jié)果為C.jejuni感染后GBS發(fā)病率的文獻(xiàn)共2篇，2個(gè)研究均顯示C.jejuni感染后GBS發(fā)病率明顯升高。目的結(jié)果為GBS患者C.jejuni分離率的文獻(xiàn)共13篇，各個(gè)研究間的異質(zhì)性較大（Qdf=55.77, P0.001，I2=78.5%），采用隨機(jī)效應(yīng)模型，合并分離率為10.24%，(95%CI:6.7%,15.4%）。對(duì)“納入人群的平均年齡”“所屬國(guó)家（發(fā)達(dá)/發(fā)展中國(guó)家）”“研究時(shí)間”“是否進(jìn)行增菌培養(yǎng)”“是否使用多種方法培養(yǎng)”“是否多樣本培養(yǎng)”六個(gè)方面進(jìn)行meta回歸分析，結(jié)果顯示“納入人群平均年齡”和“研究時(shí)間”是分離率異質(zhì)性產(chǎn)生的主要因素（P0.05），并顯示分離率隨著年齡的增加而下降，研究時(shí)間的推移而下降。目的結(jié)果為GBS患者血清抗C.jejuni抗體陽性率的文獻(xiàn)共16篇，各個(gè)研究GBS患者血清抗C.jejuni抗體陽性率范圍從17.24%到81.25%(中位數(shù)為36.97%)，而對(duì)照組血清抗C.jejuni抗體陽性率范圍從0到58.33%（中位數(shù)為7.83%）。Meta分析合并率差“RD”為33.64%，(95%CI:23.33%,43.94%），各個(gè)研究間的異質(zhì)性較大（Qdf=135.1, P0.001，I2=91.34%），對(duì)“納入人群的平均年齡”“國(guó)家（發(fā)達(dá)/發(fā)展中國(guó)家）”“研究時(shí)間”“抗體選用”“對(duì)照組的差別”五個(gè)方面單因素回歸分析結(jié)果顯示都不為異質(zhì)性的原因（P0.05）。 結(jié)論： 1C.jejuni感染后GBS發(fā)病率明顯升高； 2GBS患者C.jejuni合并分離率10.24%，隨著患者年齡的增加分離率下降，研究時(shí)間的推移而下降。 3GBS患者血清抗C.jejuni抗體陽性率為17.24-81.25%(中位數(shù)為36.97%），對(duì)照組血清抗C.jejuni抗體陽性率為0-58.33%(中位數(shù)為7.83%），，Meta分析合并率差“RD”為33.64%。 4此次研究納入的文獻(xiàn)數(shù)量較少，異質(zhì)性較大，期待各國(guó)實(shí)驗(yàn)室加強(qiáng)交流合作，大樣本多中心的研究結(jié)果更新我們的數(shù)據(jù)和結(jié)論。 第二部分GBS患者C.jejuni的分離及基因分型 目的:對(duì)GBS患者糞便進(jìn)行連續(xù)多次的C.jejuni分離并對(duì)分離菌株進(jìn)行基因分型。方法:通過選擇性血平板分離空腸彎曲菌，并對(duì)分離菌株進(jìn)行馬尿酸鹽水解試驗(yàn)、VITEK生化鑒定以及16S、hipO多重PCR分子鑒定，并對(duì)鑒定的空腸彎曲菌進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性分型（random amplifiedpolymorphic DNA,RAPD）、多位點(diǎn)序列分型（multilocus sequence typing,MLST）。 結(jié)果:23例GBS患者中1例患者分離出空腸彎曲菌，從此患者先后分離得到5株空腸彎曲菌菌株，RAPD分子分型可分為3型，MLST分型全為ST508。結(jié)論: 1GBS患者可同時(shí)感染多種RAPD基因分型的C.jejuni菌株。 2從GBS患者分離出的C.jejuni菌株不一定是致GBS菌株，需經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明。 第三部分GBS患者C.jejuni的多位點(diǎn)序列分型研究 目的：運(yùn)用多位點(diǎn)序列分型（MLST）技術(shù)對(duì)我國(guó)華北地區(qū)8株GBS患者空腸彎曲菌（C.jejuni）臨床分離株進(jìn)行基因分型研究；通過MLST數(shù)據(jù)庫探討GBS患者的C.jejuni、我國(guó)C.jejuni的遺傳特征。 方法：將待測(cè)菌株提取DNA，并進(jìn)行多重PCR鑒定。使用特異性引物PCR擴(kuò)增7個(gè)管家基因，交予生物公司測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果使用軟件進(jìn)行編輯和校正后，提交到MLST數(shù)據(jù)庫獲得每個(gè)管家基因的編號(hào)和其對(duì)應(yīng)的ST型。使用eBURST軟件、START2軟件和splitstree4.0軟件對(duì)此次研究的8株菌和來自MLST數(shù)據(jù)庫的GBS患者C.jejuni和我國(guó)C.jejuni進(jìn)行eBURST和UPGMA聚類分析以及split decomposition系統(tǒng)發(fā)生網(wǎng)絡(luò)拆分網(wǎng)絡(luò)分析。 結(jié)果：此次研究的8株GBS患者C.jejuni MLST基因型別分別是ST51、ST45、ST3907、ST22、ST2240、ST22、ST22，沒有發(fā)現(xiàn)新型別。MLST數(shù)據(jù)庫中共GBS患者C.jejuni45株，共34個(gè)ST型，14個(gè)ST序列群,其中ST22complex基因型占28.89%（13/45），構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹和拆分網(wǎng)絡(luò)圖。MLST數(shù)據(jù)庫中共151株我國(guó)C.jejuni，共141個(gè)ST型，23個(gè)ST序列群，最多的ST型為ST353complex（8%），構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹和拆分網(wǎng)絡(luò)圖。 結(jié)論：GBS患者C.jejuni與ST22complex基因型可能相關(guān)。
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【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R745

【參考文獻(xiàn)】

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1 崔麗英,湯曉芙;肌電圖的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];臨床神經(jīng)電生理學(xué)雜志;2004年03期

本文編號(hào)：1527930