本文關(guān)鍵詞：MiR-133b對帕金森病多巴胺能神經(jīng)元模型軸突變性的影響　出處：《青島大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:探討mi R-133b對l-甲基-4-苯基吡啶離子(MPP+)誘導(dǎo)的帕金森病(PD)細(xì)胞模型中多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量、軸突長度、Rho A、TH表達量的影響。方法:原代陪養(yǎng)大鼠胚胎中腦細(xì)胞,使用1-甲基-4-苯基吡啶離子誘導(dǎo)損傷,建立帕金森病多巴胺能神經(jīng)元模型。實驗分為(1)空白對照組(control):無任何干預(yù)措施;(2)陰性對照組(mi R-NC):LV-mi R-NC轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h,無血清培養(yǎng)基換液后繼續(xù)培養(yǎng)24 h;(3)mi R-NC+MPP+組:LV-mi R-NC轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h,含10μmol?L-1 MPP+的無血清培養(yǎng)液損傷24 h;(4)mi R-133b+MPP+組:LV-mi R-133b轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h,含10μmol?L-1 MPP+的無血清培養(yǎng)液損傷24 h。通過熒光定量PCR技術(shù)檢測mi R-133b在各組的表達水平。應(yīng)用免疫熒光染色法對DAG神經(jīng)元進行形態(tài)學(xué)觀察,同時檢測DAG神經(jīng)元數(shù)量、軸突長度變化。采用免疫印跡法檢測大鼠胚胎中腦細(xì)胞中RHOA及TH蛋白表達水平變化。結(jié)果:MPP+誘導(dǎo)損傷后DAG神經(jīng)元后細(xì)胞數(shù)量減少,并且多數(shù)神經(jīng)元胞體存在,但軸突長度明顯縮短,軸突呈串珠樣腫脹或斷裂。與空白對照組比較,mi R-NC+MPP+組mi R-133b含量明顯降低,DAG陽性細(xì)胞數(shù)及軸突長度均顯著減少,Rho A表達量增加,TH表達量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;與mi R-NC+MPP+組比較,mi R-133b+MPP+組mi R-133b含量明顯升高,DAG陽性細(xì)胞數(shù)及軸突長度均增加,Rho A表達量下降,TH表達量增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:實驗結(jié)果表明,MPP+可誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元死亡和軸突的退行性變,并且抑制mi R-133b表達。過表達mir-133b可通過抑制靶蛋白Rho A顯著減輕DAG神經(jīng)元及軸突長度損傷,發(fā)揮一定的神經(jīng)元保護作用。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R742.5;R-332

【參考文獻】

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1 袁紅;張振文;梁立武;沈權(quán);王向黨;任素梅;馬洪杰;焦淑軍;劉平;;帕金森氏病的治療策略(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2010年01期

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本文編號：1321636