本文關(guān)鍵詞：槲皮素在實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠神經(jīng)功能修復(fù)中的作用及機(jī)制研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究目的1通過(guò)膠原酶法制作SD大鼠腦出血模型,用于研究槲皮素對(duì)腦出血大鼠神經(jīng)功能障礙的影響。2進(jìn)一步確定槲皮素通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、神經(jīng)元凋亡和促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells, NSCs)增殖分化等多種生物學(xué)機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)受損神經(jīng)功能的修復(fù)。為出血性卒中治療提供新的治療思路及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法1膠原酶法制備大鼠腦出血模型(intracerebral haemorrhage, ICH),將實(shí)驗(yàn)用大鼠隨機(jī)分為四組：假手術(shù)組、單純腦出血組、腦出血+槲皮素5 mg/kg組和腦出血+槲皮素50 mg/kg組。除假手術(shù)組外,其他大鼠均為腦出血模型。2制備SD大鼠腦出血模型12 h后,腦出血+槲皮素5mg/kg組給予腹腔注射5mg/kg劑量槲皮素；腦出血+槲皮素50mg/kg組給予腹腔注射50mg/kg劑量槲皮素；假手術(shù)組和腦出血組術(shù)后12h經(jīng)腹腔注入等量生理鹽水。各組每12h給藥1次,連續(xù)72 h。3在腦出血模型制作成功后的第12 h和72 h參照改良大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分(modified neurological severity score, mNSS)標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行大鼠行為學(xué)評(píng)分。72 h后處死各組實(shí)驗(yàn)大鼠,觀察各組腦出血大鼠腦標(biāo)本的血腫體積、腦水腫、炎癥因子表達(dá)和細(xì)胞凋亡情況。4膠原酶法制作SD大鼠腦出血模型,隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組、單純腦出血組和腦出血+槲皮素5mg/kg組。3組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于術(shù)后12h經(jīng)腹腔注射BrdU 50mg/kg,1次/d,至各組大鼠處死前一天停止注射。腦出血+槲皮素50mg/kg組術(shù)后12h給予腹腔注射50mg/kg劑量槲皮素；假手術(shù)組和腦出血組術(shù)后12h經(jīng)腹腔注入等量生理鹽水；各組每12h給藥1次。在7,14d時(shí)觀察使用BrdU和Nestin標(biāo)記的內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖情況。5通過(guò)以上實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)觀察大鼠腦出血后槲皮素對(duì)神經(jīng)損傷修復(fù)的具體機(jī)制。結(jié)果1在給藥的第72 h分別觀察各組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分,與單純腦出血組比較,腦出血+槲皮素50mg/kg組大鼠神經(jīng)功能癥狀均明顯改善,神經(jīng)功能缺損評(píng)分?jǐn)?shù)值明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2經(jīng)干濕重法比較,與單純腦出血組比較后,腦出血+槲皮素50 mg/kg組可以顯著減輕腦出血后腦組織水腫程度,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。出血灶體積檢測(cè),與腦出血組比較后,腦出血+槲皮素50mg/kg組大鼠出血灶明顯收縮,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3與單純腦出血組相比,腦出血+槲皮素50 mg/kg組大鼠炎癥因子的表達(dá)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；TUNEL法染色結(jié)果顯示凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；Western Blot結(jié)果顯示促凋亡蛋白Bax和凋亡蛋白caspase-3蛋白表達(dá)量明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；抑制凋亡蛋白Bcl-2蛋白表達(dá)量明顯增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；免疫熒光染色結(jié)果顯示caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4與單純腦出血組相比,腦出血+槲皮素50 mg/kg組大鼠在腦出血周圍區(qū)域內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖明顯,新生神經(jīng)干細(xì)胞數(shù)量明顯增多,并能維持較長(zhǎng)增殖時(shí)間(×400),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論通過(guò)本實(shí)驗(yàn),證明槲皮素可以減輕SD大鼠腦出血后神經(jīng)受損程度,改善神經(jīng)功能缺損癥狀。槲皮素可能是通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、神經(jīng)元凋亡和促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells, NSCs)增殖等多種生物學(xué)機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)受損神經(jīng)功能的修復(fù)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R743.3

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8 薛s，

本文編號(hào)：1311425