本文關(guān)鍵詞：新生期驚厥腦損傷中驚厥急性期瘦素干預作用及機制初探

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【摘要】：目的:探討驚厥急性期瘦素干預對三氟乙醚誘導新生期大鼠長程反復驚厥遠期神經(jīng)行為、學習記憶能力損傷的影響和分子機制。方法:7日齡(P7)的Sprague-Dawley(SD)大鼠共40只,隨機分為四組(n=10只/組),即:單純對照組(CON組)、瘦素對照組(CON+LEP組)、單純驚厥組(RS組)及瘦素驚厥組(RS+LEP組)。CON組每日予正常喂養(yǎng);RS組喂養(yǎng)同CON組,另連續(xù)7日,每日吸入三氟乙醚誘發(fā)驚厥發(fā)作一次,一次持續(xù)30min;RS+LEP組操作同RS組,但在每日驚厥后一小時腹腔注射4mg/kg瘦素;CON+LEP組除不吸入三氟乙醚外,操作同RS+LEP組。于P23、P30分別進行神經(jīng)行為學評分(平面翻正反射測試、懸崖回避反射測試、負向趨地反射測試、前肢懸吊測試)。于P23、P30分別進行曠場實驗測試。于P27-P33期間行Morris水迷宮測試。于P34取腦組織標本,用Neo-Timm’s染色法檢測海馬苔蘚纖維發(fā)芽情況,免疫蛋白印跡技術(shù)檢測大腦皮層及海馬Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2比值、Cathepsin E、P53的表達。結(jié)果:1.神經(jīng)行為學評分顯示:RS組(P23、P30)平面反正反射、懸崖回避反射、負向趨地反射時間較CON組明顯延長(P㩳0.05);RS+LEP組(P23、P30)平面反正反射、懸崖回避反射、負向趨地反射時間趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。RS組(P23、P30)前肢懸吊時間較CON組明顯縮短(P㩳0.05);RS+LEP組(P23)前肢懸吊時間趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。2.曠場實驗顯示:(1)RS組(P23、P30)延遲時間較CON組明顯延長(P0.05);RS+LEP組(P23、P30)延遲時間趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P0.05)。(2)RS組(P23、P30)水平得分較CON組明顯降低(P0.05);RS+LEP組(P23、P30)水平得分趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P0.05)。(3)RS組(P23、P30)垂直得分較CON組明顯降低(P0.05);RS+LEP組(P23、P30)垂直得分趨于正常較RS組有統(tǒng)計學差異(P0.05)。(3)RS組(P23、P30)開場得分較CON組明顯降低(P0.05);(4)RS+LEP組(P23、P30)開場得分趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P0.05)。3.Morris水迷宮實驗顯示:(1)逃避潛伏期:從P28至P32,四組大鼠逃避潛伏期逐漸縮短,RS組(P29、P30、P31、P32)逃避潛伏期較CON組明顯延長(P㩳0.05);RS+LEP組逃避潛伏期趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。(2)空間探索測試:RS組(P34)穿越平臺次數(shù)較CON組明顯減少(P㩳0.05);RS+LEP組(P34)穿越平臺次數(shù)趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。4.Neo-Timm’s染色結(jié)果顯示:RS組CA3區(qū)及海馬齒狀回苔蘚纖維發(fā)芽程度較CON組明顯增加(P㩳0.05);RS+LEP組CA3區(qū)及海馬齒狀回苔蘚纖維發(fā)芽程度趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。5.Western blot結(jié)果顯示:(1)RS組皮層組織中Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2、Cathepsin E、P53表達量較CON組明顯增高(P㩳0.05);RS+LEP組皮層組織中Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2、Cathepsin E、P53表達量趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。(2)RS組海馬組織中Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2、Cathepsin E、P53表達量較CON組明顯增高(P㩳0.05);RS+LEP組海馬組織中Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2、Cathepsin E表達量趨于正常,較RS組有統(tǒng)計學差異(P㩳0.05)。結(jié)論:1.急性期瘦素干預,能顯著改善新生期長程反復驚厥所致遠期神經(jīng)行為及學習記憶能力損傷,抑制海馬齒狀回及CA3區(qū)苔蘚纖維異常發(fā)芽,具有神經(jīng)保護作用。2.急性期瘦素干預可抑制新生期驚厥所致遠期海馬和大腦皮層自噬信號通路相關(guān)蛋白Beclin-1、Beclin-1/Bcl-2、Cathepsin E、P53的過表達。3.本研究提示:驚厥急性期瘦素干預可能以自噬信號通路為靶點發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R720.597;R742

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