本文關(guān)鍵詞：miR-199a通過靶向ATP13A2抑制6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激

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【摘要】：目的:探究miR-199a通過靶向調(diào)節(jié)ATP13A2對6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響。方法:收集正常大鼠和帕金森(PD)模型大鼠腦組織,培養(yǎng)6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞,利用Real-time PCR檢測miR-199a和ATP13A2的表達,Western Blot檢測ATP13A2表達。分別轉(zhuǎn)染miR-199a類似物和miR-199a抑制劑,利用ELISA檢測ROS、MDA、SOD和GSH-Px的表達。雙熒光素酶報告基因檢測miR-199a與ATP13A2的靶向關(guān)系。Western Blot法檢測ATP13A2和JNK/c-Jun表達的影響。MTT法檢測細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果:PD腦組織和細(xì)胞中miR-199a表達顯著降低,ATP13A2表達顯著升高(P0.01)。過表達miR-199a可顯著降低6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的ROS、MDA活性,升高SOD、GSH-Px活性(P0.01)。miR-199a過表達顯著降低熒光素酶報告基因的熒光強度,而結(jié)合位點突變后熒光素酶活性不變(P0.01)。過表達miR-199a顯著降低ATP13A2的表達并抑制JNK和c-Jun的磷酸化水平,茴香霉素則升高ATP13A2表達并激活JNK和c-Jun的磷酸化水平,過表達miR-199a且給予茴香霉素處理可使JNK和c-Jun的磷酸化水平恢復(fù)到6-OHDA-PC12組水平(P0.01)。過表達miR-199a抑制6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞增殖,茴香霉素則促進其增殖,過表達miR-199a且給予茴香霉素處理可使細(xì)胞增殖率恢復(fù)到6-OHDA-PC12組水平(P0.01)。結(jié)論:miR-199a可通過靶向調(diào)節(jié)ATP13A2抑制6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激并抑制JNK/c-Jun活化。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171135)
【分類號】：R742.5
【正文快照】： tissues and cells(P0.01).And,miR-199a overexpression remarkably decreased the ROS,MDA levels and increasedthe SOD,GSH-Px levels in the PC12 cells treated with 6-OHDA(P0.01).The results showed that the relative lucifer-ase activity was significantly dec

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