動(dòng)脈性和靜脈性蛛網(wǎng)膜下腔出血對(duì)腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞電壓依賴性鈣通道電流作用的比較研究
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【摘要】:[目的]自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage,SAH)是各種原因引起的顱內(nèi)和椎管內(nèi)血管突然破裂,血液流至蛛網(wǎng)膜下腔的一種臨床綜合征,約占急性腦卒中的10.0%,是高致死率、高致殘率的神經(jīng)科疾病。腦血管痙攣(cerebral vasospasm, CVS)特指繼發(fā)于SAH的腦血流下降,是其特異性的并發(fā)癥也是SAH致死、致殘的最主要危險(xiǎn)因素。自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)的年發(fā)生率約為1/1萬(wàn),其責(zé)任血管可大致分為動(dòng)脈和靜脈兩大類。前者約占SAH的85%,多為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤、血管畸形破裂以及腫瘤卒中所致;后者的原發(fā)病多為顱內(nèi)靜脈或靜脈竇血栓、凝血功能障礙以及中腦周圍非動(dòng)脈瘤性SAH等。靜脈性SAH具有癥狀輕微、腦血管痙攣發(fā)生率低和預(yù)后好等特點(diǎn)。由于動(dòng)脈血成分與靜脈血存在差異,因此我們觀察了動(dòng)脈性和靜脈性SAH對(duì)于腦血管痙攣敏感性的差異及其血液成分對(duì)電壓依賴性鈣通道(voltage-dependent calcium channels, VDCCs)電流的不同調(diào)節(jié)作用,探究動(dòng)脈性SAH和靜脈性SAH在VDCCs電流、平滑肌靜息電位和腦血流量(cerebral blood flow, CBF)調(diào)節(jié)等方面的差異,以期為更好地治療SAH提供依據(jù)。[方法]選取36只清潔級(jí)SD大鼠(雌雄不限),按數(shù)字法隨機(jī)抽樣,分為動(dòng)脈性SAH組(N=14只)、靜脈性SAH組(N=13只)和假手術(shù)組(N=9只)。采用大鼠立體定向儀輔助下鞍上池內(nèi)注射自體血制造大鼠SAH模型。實(shí)驗(yàn)組鞍上池內(nèi)注射0.25 ml自體血,假手術(shù)組以同樣方式接受等量無(wú)菌等滲鹽水注射。SAH模型建立后3d行神經(jīng)功能評(píng)分,處死大鼠并取腦組織稱重,用熒光分光光度儀檢測(cè)溶液的熒光強(qiáng)度并計(jì)算絕對(duì)腦血流量。在顯微鏡下分離大鼠腦動(dòng)脈,將腦動(dòng)脈移至谷氨酸鹽溶液中輕柔吹打約1 min使平滑肌細(xì)胞松解分離。上述相同方法分離的細(xì)胞懸液迅速置于倒置顯微鏡高倍鏡視野下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),以判斷細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞的存活比率。將動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞懸液滴入顯微鏡的記錄浴槽中,進(jìn)行靜息電位測(cè)定。用膜片鉗研究大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞相對(duì)表面積和VDCCs電流。[結(jié)果]鞍上池內(nèi)注射自體動(dòng)脈血、靜脈血和生理鹽水后,三組大鼠呈現(xiàn)的精神狀態(tài)各不相同。動(dòng)脈性SAH(N=14只)、靜脈性SAH組(N=13只)和假手術(shù)組(N=9只)術(shù)后各項(xiàng)指標(biāo)均有一定差異。1.動(dòng)脈性SAH、靜脈性SAH和假手術(shù)組OxyHb濃度有一定差異。動(dòng)脈性SAH OxyHb濃度明顯高于靜脈性SAH組、假手術(shù)組(P0.05)。2.造模前大鼠神經(jīng)功能評(píng)分均為18分,SAH后第3d動(dòng)脈性SAH、靜脈性SAH和假手術(shù)組神經(jīng)功能有一定差異。動(dòng)脈性SAH和靜脈性SAH組均較假手術(shù)組評(píng)分降低(P0.05)。3.高倍鏡視野下,動(dòng)脈性SAH、靜脈性SAH和假手術(shù)組腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞活細(xì)胞率(%)無(wú)差異。4.動(dòng)脈性SAH、靜脈性SAH和假手術(shù)組腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞相對(duì)表面積有一定差異。動(dòng)脈性SAH平滑肌細(xì)胞相對(duì)表面積顯著小于靜脈性SAH、假手術(shù)組(P0.05)。5.動(dòng)脈性SAH和靜脈性SAH組和假手術(shù)組腦動(dòng)脈平滑肌靜息電位有一定差異。動(dòng)脈性SAH靜息電位顯著低于靜脈性SAH、假手術(shù)組(P0.05)。6.動(dòng)脈性SAH組、靜脈性SAH和假手術(shù)組的VDCCs最大電流(pA)有一定差異。當(dāng)Vm=0-30 mV動(dòng)脈性SAH組VDCCs電流密度顯著高于靜脈性SAH組、假手術(shù)組(P0.05)。7.動(dòng)脈性SAH組、靜脈性SAH和假手術(shù)組CBF有一定差異。動(dòng)脈性SAH腦血流量顯著低于靜脈性SAH、假手術(shù)組(P0.05)。[結(jié)論]1.本研究顯示動(dòng)脈性SAH與正常大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞VDCCs電流相比,可引起大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞VDCCs電流密度增大以及VDCCs表型的變化,同時(shí)使CBF顯著下降;而靜脈性SAH則無(wú)此類效應(yīng)。2.動(dòng)脈性和靜脈性蛛網(wǎng)膜下腔出血腦脊液氧合血紅蛋白血氧濃度等血管痙攣因子的濃度不同是導(dǎo)致動(dòng)脈性和靜脈性蛛網(wǎng)膜下腔出血差異的重要因素。
【關(guān)鍵詞】:蛛網(wǎng)膜下腔出血 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 電壓依賴性鈣通道 膜片鉗 氧合血紅蛋白 腦血流量
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R743.35
【目錄】:
- 縮略詞表5-6
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-12
- 引言12-17
- 材料和方法17-21
- 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
- 2. 實(shí)驗(yàn)藥品及器材17
- 3. 實(shí)驗(yàn)分組及方法17-20
- 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-27
- 討論27-32
- 結(jié)論32-33
- 展望33-34
- 參考文獻(xiàn)34-38
- 綜述38-52
- 參考文獻(xiàn)47-52
- 發(fā)表文章情況52-53
- 致謝53
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1 黃平治;;動(dòng)脈性陽(yáng)萎中陰莖背動(dòng)脈及深動(dòng)脈的評(píng)價(jià)[J];男性學(xué)雜志;1991年04期
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5 黃平治;;動(dòng)脈性靜脈性及竇性陽(yáng)萎的多項(xiàng)診斷評(píng)價(jià)[J];男性學(xué)雜志;1992年03期
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本文編號(hào):1114504
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