本文關(guān)鍵詞：青蒿素對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力的免疫調(diào)節(jié)

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【摘要】：目的:探討青蒿素對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力是否有防治作用及其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:用含有人工合成的大鼠來(lái)源的乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor,ACh R)α亞基97-116肽段的抗原乳液分別于實(shí)驗(yàn)周期第0天、第11天對(duì)健康雌性L(fǎng)ewis大鼠的足墊部、背部進(jìn)行免疫建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力(experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)模型,于免疫后第6天隨機(jī)分為青蒿素低劑量組(40mg/kg),青蒿素中劑量組(60mg/kg)、青蒿素高劑量組(80mg/kg)及對(duì)照組(橄欖油)給予灌胃治療36天,然后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴結(jié)單個(gè)核細(xì)胞(lymph node mononuclear cells,LMNC)懸液中CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞(Treg)百分比及Treg細(xì)胞表面CTLA-4的表達(dá)及單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α、IL-10及IL-17的表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中TGF-β1的表達(dá)及大鼠血清中抗R97-116 Ig G/Ig G1/Ig G2a/Ig G2b抗體水平.結(jié)果:中、高劑量組青組蒿素能改善EAMG臨床癥狀;中劑量組青蒿素能提高CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞及IL-10、TGF-β1表達(dá);各劑量組青蒿素均能降低TNF-α的表達(dá),且中劑量降低顯著;低、中組劑量青蒿素能降低IL-17的表達(dá),兩組之間無(wú)明顯差異;青蒿素對(duì)Treg細(xì)胞表面CTLA-4及R97-116抗體水平的表達(dá)無(wú)明顯影響。結(jié)論:青蒿素對(duì)EAMG具有免疫調(diào)節(jié)作用,其發(fā)揮作用的機(jī)制可能是通過(guò)提高誘導(dǎo)性(或者適應(yīng)性)調(diào)節(jié)T細(xì)胞(i Treg)表達(dá),繼而上調(diào)抑制性細(xì)胞因子IL-10、TGF-β1的表達(dá)及調(diào)節(jié)Th1/Th2/Th17/Treg細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡來(lái)改善其臨床癥狀。
【關(guān)鍵詞】：青蒿素 實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R746.1
【目錄】：

• 提要3-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 材料與方法10-24
• 1 實(shí)驗(yàn)材料10-12
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物10
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑10-11
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與耗材11-12
• 1.4 主要試劑的配置12
• 2 實(shí)驗(yàn)方法12-17
• 2.1 EAMG模型的建立與臨床評(píng)分12-13
• 2.2 青蒿素治療EAMG13
• 2.3 制備淋巴結(jié)單個(gè)核細(xì)胞懸液13
• 2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+CD25+Foxp3+ T細(xì)胞（Treg）表達(dá)13-14
• 2.5 流式檢測(cè)Treg細(xì)胞表面CTLA-4 表達(dá)14
• 2.6 流式檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)上清中Th1/Th2/Th17細(xì)胞因子表達(dá)14-15
• 2.7 ELISA檢測(cè)TGF-β1 的表達(dá)15-16
• 2.8 ELISA法檢測(cè)EAMG大鼠血清中抗R97-116 IgG/ IgG1/ IgG2a/ IgG2b抗體水平16-17
• 2.9 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-24
• 3.1 青蒿素可改善EAMG大鼠的臨床癥狀17-18
• 3.2 青蒿素能上調(diào)CD4+CD25+Foxp3+ T細(xì)胞百分比及其抑制性因子TGF-β1、IL-10的表達(dá)18-21
• 3.3 青蒿素能降低TNF-α 的表達(dá)21
• 3.4 青蒿素能降低IL-17的表達(dá)21-22
• 3.5 青蒿素對(duì)Treg細(xì)胞表面CTLA-4 表達(dá)的影響22-23
• 3.6 青蒿素對(duì)血清中抗R97-116 IgG/ IgG1/ IgG2a/ IgG2b抗體水平的影響23-24
• 討論24-31
• 1 重癥肌無(wú)力的發(fā)病機(jī)制及目前治療24-28
• 2 重癥肌無(wú)力與中醫(yī)痿證28-29
• 2.1 重癥肌無(wú)力與中醫(yī)痿證的聯(lián)系28-29
• 2.2 痿證的病因病機(jī)及治療29
• 3 青蒿素的抗炎、免疫抑制作用29-30
• 4 青蒿素對(duì)EAMG的影響30-31
• 結(jié)語(yǔ)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 綜述37-43
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 附錄43
• 符號(hào)說(shuō)明43-44
• 致謝44-45
• 發(fā)表論文45-48

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