本文關(guān)鍵詞：高血糖加重腦缺血卒中后癲癇發(fā)作分子機(jī)制的初步研究

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【摘要】：目的明確高血糖對(duì)大鼠腦缺血卒中后癲癇發(fā)作情況,以及對(duì)腦缺血卒中后癲癇大鼠腦組織損傷的影響;探討m TOR信號(hào)通路與高血糖增加腦缺血卒中后癲癇的關(guān)系。材料和方法健康SD雄性大鼠,體重220-250g,由寧夏醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。安靜環(huán)境下飼養(yǎng),給予充足潔凈的水和攝食。將大鼠隨機(jī)分成5組:假手術(shù)組、空白對(duì)照組、高血糖組、腦缺血組、高血糖㧏腦缺血組,每組10只:①假手術(shù)組:只分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)而不做結(jié)扎;②空白對(duì)照組:不予處理;③高血糖組:通過腹腔注射STZ建立高血糖模型;④腦缺血組:利用結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈加低血壓(2VO)的方法建立腦缺血模型;⑤高血糖㧏腦缺血組:通過腹腔注射STZ建立高血糖模型,常規(guī)飼養(yǎng)4周后,利用結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈加2VO的方法建立腦缺血模型。腦缺血后觀察各組大鼠行為變化和監(jiān)測(cè)腦電變化;予腦缺血后24h后分別斷頭取腦,剝離海馬組織,予㧟80℃凍存和灌注取腦進(jìn)行石蠟包埋。通過TUNEL觀察大腦神經(jīng)元損傷狀況;通過Wstern-Blot、PCR和免疫組化檢測(cè)海馬m TOR、p-m TOR表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(sx±)表示,數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析。先行方差齊性檢驗(yàn),組間差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義比較采用LSD-t檢驗(yàn),以p≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果①模型建立:高血糖組在腹腔注射STZ后,10只大鼠中有9只達(dá)到了實(shí)驗(yàn)要求(血糖濃度12mmol/l),高血糖㧏腦缺血組大鼠血糖濃度全部達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。常規(guī)飼養(yǎng)4周后,對(duì)高血糖㧏腦缺血組大鼠建立腦缺血模型,其中8只出現(xiàn)癲癇發(fā)作,1只死亡。然后腦缺血組大鼠建立腦缺血模型,其中1只出現(xiàn)癲癇發(fā)作,1只大鼠死亡。②行為學(xué)表現(xiàn):高血糖大鼠在腦缺血10h左右出現(xiàn)癲癇大發(fā)作。發(fā)作最初,大鼠表現(xiàn)為胡須抖動(dòng)、面部抽搐、眼睛緊閉、流涎和牙齒節(jié)律性咀嚼,隨后會(huì)出現(xiàn)全身抖動(dòng)、抽搐、站立并向后傾倒,發(fā)作劇烈者,會(huì)表現(xiàn)為在籠中四處逃竄,甚至出現(xiàn)跳躍。③電生理監(jiān)測(cè):腦缺血組大鼠出現(xiàn)了異常腦電,而高血糖㧏腦缺血組大鼠出現(xiàn)了典型的癲癇波型,腦電中表現(xiàn)有陣發(fā)性的高幅波形,并且具有癲癇波所特有的棘-慢波和多相棘波等波形,同時(shí)頻繁出現(xiàn)多發(fā)棘波。④TUNEL:假手術(shù)組、空白對(duì)照組、高血糖組、腦缺血組和高血糖㧏腦缺血組的陽性細(xì)胞數(shù)分別為9.0±0.82、6.0±0.81、19.7±1.24、24.7±1.69、41.3±1.70。高血糖㧏腦缺血組與、高血糖組和腦缺血組之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),腦缺血與假手術(shù)組、空白對(duì)照組、高血糖組之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),高血糖組與假手術(shù)組、空白對(duì)照組之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),而假手術(shù)組與空白對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㧐0.05)。結(jié)果表明高血糖不僅能夠造成正常大鼠神經(jīng)元的損傷,而且還能加重腦缺血大鼠海馬神經(jīng)元的損傷。⑤免疫組織化學(xué):神經(jīng)元胞漿呈棕黃色為陽性。p-m TOR在假手術(shù)組、空白對(duì)照組、高血糖組、腦缺血組和高血糖㧏腦缺血組中的陽性細(xì)胞數(shù)為:19.33±1.25、.15.67±1.24、51.33±2.87、44.33±1.69、31.33±1.26。高血糖組、腦缺血組和高血糖㧏腦缺血組與假手術(shù)組和空白對(duì)照組之間p-m TOR表達(dá)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.01),但高血糖㧏腦缺血組與高血糖組和腦缺血組比較,p-m TOR的表達(dá)有所降低(p㩳0.05);假手術(shù)組與空白對(duì)照組之間p-m TOR的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㧐0.05)。提示m TOR信號(hào)通路激活并不是高血糖加重腦缺血卒中后癲癇的原因。⑥Western-Blot:使用分析軟件Gel-Pro analyzer對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,計(jì)算出各組的相對(duì)灰度值;p-m TOR/m TOR在假手術(shù)組、空白對(duì)照組、高血糖組、腦缺血組和高血糖㧏腦缺血組的比值0.55±0.06、0.41±0.05、1.43±0.09、1.16±0.08、0.93±0.08(p㩳0.01)。結(jié)論高血糖能加重腦缺血后腦組織的損傷,并極大的提高了癲癇發(fā)生率;p-m TOR在高血糖組、腦缺血組和高血糖㧏腦缺血組中明顯升高,但高血糖㧏腦缺血組低于高血糖組和腦缺血組,初步推斷m TOR信號(hào)通路不是高血糖加重腦缺血卒中后癲癇發(fā)作的原因。
【關(guān)鍵詞】：高血糖 腦缺血 卒中后癲癇 mTOR
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R743.3;R742.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 中英文縮略詞表9-11
• 前言11-14
• 材料和方法14-31
• 結(jié)果31-35
• 討論35-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 結(jié)論44-45
• 綜述45-53
• 綜述參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文54-55
• 個(gè)人簡歷55

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 劉玉和;于春艷;王皓;孫連坤;;Vk3對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白基因表達(dá)的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

2 岳文濤;王小敏;王s，

本文編號(hào)：1064580