本文關(guān)鍵詞：腫瘤微環(huán)境中MFG-E8對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究乳脂肪球表皮生長(zhǎng)因子8蛋白(MFG-E8)對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用及其作用機(jī)制,探討腫瘤微環(huán)境中MFG-E8對(duì)腫瘤相關(guān)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型活化的影響。方法:建立穩(wěn)定表達(dá)GFP/MFG-E8 sh RNA的GL261神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系并且用RT-PCR和ELISA方法鑒定干擾效率;MTT法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖;細(xì)胞實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移;MTT法檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)瘤對(duì)抗腫瘤藥物BCNU的藥物敏感性;Western blot檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生存相關(guān)蛋白表達(dá);原位種瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種于C57 BL/6小鼠腦內(nèi)腫瘤發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程以及通過(guò)免疫熒光組織化學(xué)法和細(xì)胞流式技術(shù)檢測(cè)腫瘤微環(huán)境中CD11b+小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)和M2型標(biāo)記物CD206表達(dá)。結(jié)果:沉默MFG-E8能夠減慢神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、遷移,并且能夠增強(qiáng)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物BCNU的藥物敏感性;沉默MFG-E8可以降低FAK的磷酸化、AKT的磷酸化以及ERK的磷酸化;沉默MFG-E8能明顯減少STAT3的磷酸化和Cyclin D1的表達(dá);小鼠膠質(zhì)瘤模型表明沉默MFG-E8能抑制腦內(nèi)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程,改善個(gè)體生存時(shí)間;沉默MFG-E8可以顯著減少腫瘤組織中CD11b+小膠質(zhì)細(xì)胞的浸潤(rùn),并且能減少腫瘤組織中浸潤(rùn)的小膠質(zhì)細(xì)胞M2型標(biāo)記物CD206的表達(dá)。結(jié)論:GL261神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞沉默MFG-E8減慢神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、遷移并增強(qiáng)其藥物敏感性,可能通過(guò)下調(diào)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3(STAT3)信號(hào)通路。在小鼠膠質(zhì)瘤模型中,沉默MFG-E8可顯著減小腫瘤大小,并且伴隨著CD11b陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)的減少和M2型CD206表達(dá)的降低。
【關(guān)鍵詞】：MFG-E8 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 腫瘤相關(guān)小膠質(zhì)細(xì)胞 腫瘤微環(huán)境
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-12
• 實(shí)驗(yàn)材料和方法12-22
• 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞12
• 2 實(shí)驗(yàn)儀器12
• 3 實(shí)驗(yàn)試劑12-13
• 4 實(shí)驗(yàn)方法13-21
• 4.1 溶液配制13-14
• 4.2 細(xì)胞培養(yǎng)14-15
• 4.3 Western Blot免疫印跡15-16
• 4.4 總RNA提取和RT-PCR16-18
• 4.5 MTT檢測(cè)18
• 4.6 ELISA18-19
• 4.7 增殖實(shí)驗(yàn)19
• 4.8 遷移實(shí)驗(yàn)19-20
• 4.9 體內(nèi)腫瘤模型建立20
• 4.10 流式細(xì)胞技術(shù)20
• 4.11 免疫細(xì)胞組織化學(xué)20-21
• 4.12 小鼠活體成像21
• 5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21-22
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-31
• 1 GL261-GFP-SHMFG-E8 細(xì)胞系建立和鑒定22-24
• 2 沉默MFG-E8 能夠減慢神經(jīng)膠質(zhì)瘤增殖、遷移和增強(qiáng)GL261 對(duì)抗腫瘤藥物BCNU 的敏感性24-26
• 3 沉默MFG-E8 能夠下調(diào)細(xì)胞生存信號(hào)蛋白26-27
• 4 GL261 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞沉默MFG-E8 能夠削減體內(nèi)腫瘤進(jìn)程27-28
• 5 沉默MFG-E8 能夠降低腫瘤組織內(nèi)CD11B和CD206 的表達(dá)28-30
• 6 重組蛋白MFG-E8 (RMMFG-E8) 能夠增加小膠質(zhì)細(xì)胞M2 型標(biāo)記物的表達(dá)30-31
• 討論31-33
• 小結(jié)33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述 神經(jīng)膠質(zhì)瘤與神經(jīng)膠質(zhì)瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞的關(guān)系研究38-49
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文49-50
• 附錄：縮略詞表50-51
• 致謝51-52

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 陳贊 ,楊立莊 ,葉偉;神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞熱休克蛋白抗原肽復(fù)合物的研究[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2003年05期

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7 肖敏 ,吳淼 ,曾冬竹 ,饒蕓;樹(shù)突狀細(xì)胞瘤苗誘導(dǎo)的抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用體外實(shí)驗(yàn)研究[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2003年01期

8 戴捷,于\，

本文編號(hào)：1032305