本文關(guān)鍵詞：法舒地爾對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)足細(xì)胞骨架重構(gòu)的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的觀察ROCK抑制劑法舒地爾對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)誘導(dǎo)小鼠足細(xì)胞骨架重構(gòu)的影響,并進(jìn)一步探討法舒地爾在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)足細(xì)胞骨架重構(gòu)病變中的保護(hù)機(jī)制。方法免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定SV40T轉(zhuǎn)染的條件永生型小鼠足細(xì)胞株。將不同濃度(10-9-10-6mol/L)AngⅡ處理足細(xì)胞24h、10-7mol/L AngⅡ以不同時(shí)間(6-36h)作用足細(xì)胞,觀察足細(xì)胞Synaptopodin表達(dá)的變化。本實(shí)驗(yàn)體外采用10-7mol/L AngⅡ作用足細(xì)胞24h致骨架重構(gòu)的損傷模型。實(shí)驗(yàn)分為3組:對照組、AngⅡ刺激組、法舒地爾干預(yù)組。對照組:用RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)足細(xì)胞;AngⅡ刺激組:采用10-7mol/L AngⅡ干預(yù)足細(xì)胞24h;法舒地爾干預(yù)組:10-6mol/L mol/L法舒地爾預(yù)孵育不同時(shí)間和不同濃度(10-8-10-6mol/L)法舒地爾預(yù)孵育30 min后,再加入含10-7mol/L AngⅡ的培養(yǎng)基,繼續(xù)孵育24h。FITC-鬼筆環(huán)肽熒光染色分析足細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白F-actin結(jié)構(gòu)分布變化;Western Blot檢測足細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白Synaptopodin表達(dá)變化。進(jìn)一步觀察細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)骨架裝配的Rho/ROCK信號通路的活性,即采用Western Blot檢測Rho激酶I(ROCKI)及磷酸化肌球蛋白磷酸酯酶靶點(diǎn)亞單位1(MYPT1)表達(dá),代表ROCK的表達(dá)及活性。結(jié)果AngⅡ以劑量依賴和時(shí)間依賴方式下調(diào)足細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白Synaptopodin的表達(dá)。AngⅡ使足細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白F-actin結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,F-actin由交聯(lián)高度有序地平行聚集成束貫穿于細(xì)胞全長,沿細(xì)胞呈極性分布解體以松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)互相結(jié)合,足細(xì)胞失去原有的細(xì)胞張力。而法舒地爾預(yù)處理可減輕AngⅡ介導(dǎo)的Synaptopodin的表達(dá)下調(diào)(P0.05),法舒地爾預(yù)處理可減輕F-actin的重構(gòu)。法舒地爾預(yù)處理可下調(diào)AngⅡ誘導(dǎo)的足細(xì)胞Rho激酶I(ROCKI)蛋白表達(dá)(P0.05);法舒地爾預(yù)處理也可下調(diào)AngⅡ誘導(dǎo)的足細(xì)胞磷酸化肌球蛋白磷酸酯酶靶點(diǎn)亞單位1(p-MYPT1)蛋白表達(dá)(P0.05)。結(jié)論法舒地爾可穩(wěn)定足細(xì)胞的細(xì)胞骨架,拮抗AngⅡ?qū)ψ慵?xì)胞骨架重構(gòu)的損傷。法舒地爾的上述保護(hù)作用可能與作用于足細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞骨架肌動蛋白的重要調(diào)節(jié)分子Rho/ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：法舒地爾 血管緊張素II 足細(xì)胞 骨架重構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R692.5
【目錄】：

• 英文縮略表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-8
• 前言8-10
• 材料10-13
• 方法13-19
• 結(jié)果19-27
• 討論27-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 致謝33-34
• 綜述34-44
• 參考文獻(xiàn)40-44

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