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人精子線粒體DNA4977bp缺失與精子活力的相關(guān)性研究

發(fā)布時間:2017-05-14 17:00

  本文關(guān)鍵詞:人精子線粒體DNA4977bp缺失與精子活力的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過比較弱精子癥、少弱精子癥、少精子癥與正常參數(shù)人群精子mtDNA 4977 bp缺失的差異,探討精子mtDNA 4977 bp缺失對精子活力以及男性生育能力的相關(guān)性。方法:收集2014年2月至2014年7月江西省婦幼保健院輔助生殖中心門診精液檢查樣本902例,經(jīng)CASA軟件分析,按WHO第五版精液參數(shù)標準,精子前向運動率32%,精子濃度15×106/ml,納入弱精子癥組;精子前向運動率32%,精子濃度15×106/ml,納入少精子癥組;精子前向運動率32%,精子濃度15×106/ml,納入少弱精子癥組,其中又根據(jù)嚴重程度分活動精子組和不動精子組(不動精子率=100%)兩個組。曾有過生育史或者有使女性受孕史的正常精液參數(shù)的樣本納入正常對照組。提取精子基因組DNA后用特異性PCR引物進行mtDNA 4977bp PCR擴增,產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,比較各組間mtDNA 4977bp缺失的差異。對電泳所得目的片段進行膠回收測序,確定PCR擴增片段是否為mtDNA4977bp缺失。結(jié)果:正常對照組共345份樣本,線粒體DNA 4977 bp缺失的樣本共10份,缺失比率為2.9%。弱精子癥組共278份樣本,線粒體DNA 4977 bp缺失的樣本共24份,缺失比率為8.63%。少弱精子癥組共200份樣本,線粒體DNA 4977 bp缺失的樣本共33份,缺失比率為16.5%,其中23份為完全不動精子,線粒體DNA 4977 bp缺失的樣本共6份其比率高達26.1%。少精子癥組共79份樣本,線粒體DNA 4977 bp缺失的樣本共2份,缺失比率為2.53%。各組間缺失比率比較:弱精子癥組和少弱精子癥組的線粒體DNA 4977 bp缺失率高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),少精子癥組缺失率與正常對照組之間無顯著差異。結(jié)論:精子線粒體DNA 4977 bp缺失率在弱精子癥和少弱精子癥患者中高于正常精液參數(shù)男性,表明精子線粒體DNA 4977 bp缺失與精子活力降低有關(guān),可能參與了精子活力降低的致病過程。
【關(guān)鍵詞】:線粒體DNA缺失 線粒體DNA 4977 bp缺失 男性不育 弱精子癥
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R698.2
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-9
  • 第1章 引言9-13
  • 第2章 材料與方法13-20
  • 2.1 研究對象13
  • 2.1.1 樣本收集方法13
  • 2.1.2 樣本分組方法13
  • 2.2 主要儀器,,實驗試劑及實驗試劑的配置13-15
  • 2.2.1 主要儀器13-14
  • 2.2.2 主要試劑及配置14-15
  • 2.3 實驗方法15-20
  • 2.3.1 精子的純化15
  • 2.3.2 精子基因組DNA的提取15-16
  • 2.3.3 精子基因組DNA純度及濃度測定16
  • 2.3.4 引物設(shè)計與合成16-17
  • 2.3.5 精子線粒體DNA 4977 bp PCR擴增17-18
  • 2.3.6 PCR反應(yīng)產(chǎn)物電泳18-19
  • 2.3.7 PCR反應(yīng)產(chǎn)物電泳后膠回收19
  • 2.3.8 膠回收DNA測序19
  • 2.3.9 DNASTAR軟件比對19-20
  • 第3章 結(jié)果20-27
  • 3.1 基因組DNA提取20
  • 3.2 PCR電泳結(jié)果20-24
  • 3.3 膠回收DNA測序結(jié)果24-25
  • 3.4 統(tǒng)計分析結(jié)果25-27
  • 3.4.1 基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的比較25
  • 3.4.2 各組mtDNA 4977 bp缺失率的比較25-27
  • 第4章 討論27-32
  • 第5章 結(jié)論32-33
  • 第6章 展望33-34
  • 致謝34-35
  • 參考文獻35-38
  • 綜述38-45
  • 參考文獻43-45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號:365705

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