本文關(guān)鍵詞：茶多酚聯(lián)合表柔比星對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的據(jù)美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)《2015年癌癥統(tǒng)計(jì)》稱,2015年膀胱癌新增病人約56320,繼續(xù)居男性新發(fā)腫瘤第4位,死亡病例約11510例。在所有這些病例中約70%以上為淺表性膀胱癌。目前對(duì)淺表性膀胱癌最主要的治療手段是經(jīng)尿道膀胱腫瘤切除加術(shù)后灌注化療,但術(shù)后易復(fù)發(fā),術(shù)后灌注化療是影響膀胱癌復(fù)發(fā)的一個(gè)重要因素。如何提高化療效果是目前臨床亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。表柔比星(epirubicin,EPI)是膀胱癌的常用灌注化療藥物,茶多酚(polyphenols,TP)是一個(gè)重要的化療增敏劑,本研究通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),研究TP增強(qiáng)EPI誘導(dǎo)膀胱癌T24細(xì)胞凋亡的機(jī)制,為茶多酚聯(lián)合表柔比星治療膀胱癌的臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法取不同濃度TP和EPI分別作用膀胱癌T24細(xì)胞24 h,經(jīng)MTT試驗(yàn)初篩,選擇藥物作用濃度TP(88.8μmol/L)和EPI(4.6μmol/L)。試驗(yàn)分空白對(duì)照組、TP組(88.8 μmol/L).EPI組(4.6μmol/L)、聯(lián)合組(TP 88.8μmol/L+EPI 4.6μmol/L)共4組分別處理對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期T24細(xì)胞24 h,用Annexin V-PI雙流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡率；處理T24細(xì)胞8h后,在透射電鏡觀察各組細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)自噬體的生成及變化；處理穩(wěn)定表達(dá)GFP-LC3的T24細(xì)胞8 h后,在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白LC3熒光斑的形成與變化；處理T24細(xì)胞不同時(shí)間,用Western blot技術(shù)檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ (8h)、P62 (8h),凋亡相關(guān)蛋白CASP3 (16h)、PARP (16h)表達(dá)變化；結(jié)果TP (88.8 μmol/L)、EPI (4.6 μmol/L)聯(lián)合處理組較單藥組引起的細(xì)胞增殖抑制率(F=730.411,P=0.000)和細(xì)胞凋亡率(F=161.945,P=0.000)顯著提高。EPI (4.6μmol/L)單藥處理T24細(xì)胞可以誘導(dǎo)自噬,電鏡下細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬體雙層膜結(jié)構(gòu)形成增多；熒光顯微鏡下胞質(zhì)內(nèi)有明顯點(diǎn)狀熒光斑聚集形成,且含熒光斑的細(xì)胞數(shù)量也明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=41.944,P=0.000)；蛋白免疫印跡試驗(yàn)結(jié)果顯示單獨(dú)EPI處理T24,細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ的表達(dá)增多,自噬底物蛋白P62表達(dá)降低；聯(lián)合TP作用后自噬明顯減弱,自噬相關(guān)蛋白表達(dá)降低,而凋亡相關(guān)蛋白活性顯著增高。結(jié)論TP可以增強(qiáng)EPI誘導(dǎo)膀胱癌T24細(xì)胞凋亡敏感性,其機(jī)制與TP抑制EPI化療過(guò)程中誘導(dǎo)的保護(hù)性自噬有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 自噬 茶多酚 表柔比星 T24細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 1 材料和方法13-21
• 2 結(jié)果21-25
• 3 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 文獻(xiàn)綜述32-43
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 致謝43-44
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文44

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本文編號(hào)：325297