本文關(guān)鍵詞：肉毒毒素A對(duì)神經(jīng)源性疼痛大鼠行為學(xué)及脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元CGRP的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：制備L5、L6脊神經(jīng)結(jié)扎神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型,觀察肉毒毒素A(BoNT-A)對(duì)引起慢性神經(jīng)源性疼痛模型大鼠行為學(xué)的影響,并檢測(cè)脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)的表達(dá)情況。方法：(1)建立Wistar大鼠左側(cè)L5、L6脊神經(jīng)結(jié)扎模型(SNL模型)。隨機(jī)將SNL模型大鼠分為2組(n=8),為實(shí)驗(yàn)對(duì)照平衡,假實(shí)驗(yàn)組大鼠同樣為8只。實(shí)驗(yàn)組：在SNL術(shù)后第3天,于神經(jīng)損傷同側(cè)足底皮下注射BoNT-A(30U/kg);對(duì)照組：模型制備后相同時(shí)間,在損傷同側(cè)足底皮下注射容積相同的生理鹽水；對(duì)于假手術(shù)組：只暴露同側(cè)L5和L6脊神經(jīng)但不進(jìn)行結(jié)扎。SNL模型制備完成后,所有三組大鼠均分別測(cè)定術(shù)前3d、給藥后1d、3d、5d、7d、14d、21d的兩個(gè)指標(biāo)：機(jī)械縮足反射閾值(MWT,單位為g)和熱縮足反射潛伏期(TWL,單位為s)。(2)于損傷后第1w、2w、3w及第4w時(shí),實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組、假手術(shù)組分別隨機(jī)取4只大鼠。大鼠充分麻醉后,經(jīng)升主動(dòng)脈先后灌注生理鹽水(4℃,120ml)、多聚甲醛(pH 7.4,4%,200ml)。經(jīng)后路逐層暴露脊柱L4-6脊髓節(jié)段并切取L4-6節(jié)段。隨后經(jīng)多聚甲醛固定、25%蔗糖脫水、冰凍及橫斷切片,經(jīng)適當(dāng)處理后以備觀察。利用免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)合圖像分析技術(shù)檢測(cè)各組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)CGRP的表達(dá)變化。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)動(dòng)物意外死亡。切口均I期愈合,未發(fā)生傷口感染。與手術(shù)前相比,對(duì)于對(duì)側(cè)肢體MWT和TWL的變化,假手術(shù)組大鼠兩個(gè)指標(biāo)均未見(jiàn)明顯變化；手術(shù)后實(shí)驗(yàn)組大鼠對(duì)側(cè)肢體MWT的給藥前值為(8.6±4.7)g,術(shù)后1天MWT降至.(5.0±1.9)g,隨后在較低的水平至維持21天(4.0±1.3)g(P0.01);對(duì)于TWL具有同樣的表現(xiàn),給藥前值、給藥后第1天、第21天分別為(23.9±1.1)s、(14.1±0.3)s、(14.1±0.7)s。對(duì)于同側(cè)肢體MWT和TWL的變化,對(duì)照組大鼠手術(shù)同側(cè)肢體MWT和TWL均未見(jiàn)明顯變化。對(duì)于實(shí)驗(yàn)組大鼠,給藥前MWT及TWL值分別為(4.2±1.5)g、(13.9±0.3)s,在給藥后MWT和TWL均明顯增加(P0.01),并且在給藥后的第5天達(dá)到高峰,分別為(13.8±4.8)g、(22.1±2.0)s,給藥后21天恢復(fù)到給藥前水平。第2周及第4周取材免疫組織化學(xué)染色顯示,CGRP的陽(yáng)性表達(dá)主要位于脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的胞漿和樹(shù)突中,著色呈淺黃色。對(duì)照組中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)高于假手術(shù)組,著色較深,而實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯少于對(duì)照組,著色淺。造模術(shù)后1w、2w、3w和4w,與手術(shù)前相比,假手術(shù)組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)CGRP的表達(dá)未見(jiàn)明顯變化。對(duì)照組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)CGRP的陽(yáng)性表達(dá)由手術(shù)前的154.7±2.9逐漸升高,術(shù)后第2周達(dá)到178.2±3.6,術(shù)后第4周略下降至162.1±2.9。手術(shù)組手術(shù)前脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)CGRP的陽(yáng)性表達(dá)為152.3±3.0,給藥后陽(yáng)性表達(dá)數(shù)目逐漸下降,術(shù)后第2周陽(yáng)性表達(dá)計(jì)數(shù)為120.4±3.1,該降低效應(yīng)維持一段時(shí)間后,在第4周略升高至131.6±3.4。結(jié)論：足底皮下注射BoNT-A能夠改善SNL模型大鼠手術(shù)同側(cè)肢體的MWT和TWL,有鎮(zhèn)痛作用。足底皮下注射BoNT-A抑制大鼠L5、L6脊神經(jīng)損傷后脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)CGRP的表達(dá),可能是其鎮(zhèn)痛作用的機(jī)制所在。
【關(guān)鍵詞】：肉毒毒素A 神經(jīng)源性疼痛 SNL模型 降鈣素基因相關(guān)肽 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R741
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 中英文縮寫對(duì)照7-9
• 第一部分 肉毒毒素A對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠行為學(xué)的影響9-19
• 引言9-10
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-13
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料10-11
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法11-13
• 結(jié)果13-17
• 討論17-19
• 第二部分 肉毒毒素A對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠CGRP的影響19-29
• 引言19-20
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法20-23
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料20
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法20-22
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析22-23
• 結(jié)果23-27
• 討論27-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 結(jié)論31-32
• 文獻(xiàn)綜述32-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 讀研期間主要學(xué)術(shù)成果48-49
• 致謝49

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 曹瑩瑩;司軍強(qiáng);李麗;成洪聚;閆觀茹;王磊;;降鈣素基因相關(guān)肽與中樞系統(tǒng)神經(jīng)病理性疼痛[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年05期

2 吳仲敏;凌樹(shù)才;朱f^;吳松江;;成人和大鼠陰莖包皮及包皮系帶內(nèi)降鈣素基因相關(guān)肽免疫陽(yáng)性神經(jīng)末梢的分布及來(lái)源[J];解剖學(xué)報(bào);2006年04期

  本文關(guān)鍵詞：肉毒毒素A對(duì)神經(jīng)源性疼痛大鼠行為學(xué)及脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元CGRP的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：328676