本文關鍵詞：肉毒毒素A對神經源性疼痛大鼠行為學及脊髓前角運動神經元CGRP的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：制備L5、L6脊神經結扎神經病理性疼痛大鼠模型,觀察肉毒毒素A(BoNT-A)對引起慢性神經源性疼痛模型大鼠行為學的影響,并檢測脊髓前角運動神經元降鈣素基因相關肽(CGRP)的表達情況。方法：(1)建立Wistar大鼠左側L5、L6脊神經結扎模型(SNL模型)。隨機將SNL模型大鼠分為2組(n=8),為實驗對照平衡,假實驗組大鼠同樣為8只。實驗組：在SNL術后第3天,于神經損傷同側足底皮下注射BoNT-A(30U/kg);對照組：模型制備后相同時間,在損傷同側足底皮下注射容積相同的生理鹽水；對于假手術組：只暴露同側L5和L6脊神經但不進行結扎。SNL模型制備完成后,所有三組大鼠均分別測定術前3d、給藥后1d、3d、5d、7d、14d、21d的兩個指標：機械縮足反射閾值(MWT,單位為g)和熱縮足反射潛伏期(TWL,單位為s)。(2)于損傷后第1w、2w、3w及第4w時,實驗組、對照組、假手術組分別隨機取4只大鼠。大鼠充分麻醉后,經升主動脈先后灌注生理鹽水(4℃,120ml)、多聚甲醛(pH 7.4,4%,200ml)。經后路逐層暴露脊柱L4-6脊髓節(jié)段并切取L4-6節(jié)段。隨后經多聚甲醛固定、25%蔗糖脫水、冰凍及橫斷切片,經適當處理后以備觀察。利用免疫組織化學技術結合圖像分析技術檢測各組脊髓前角運動神經元內CGRP的表達變化。結果：實驗過程中無動物意外死亡。切口均I期愈合,未發(fā)生傷口感染。與手術前相比,對于對側肢體MWT和TWL的變化,假手術組大鼠兩個指標均未見明顯變化；手術后實驗組大鼠對側肢體MWT的給藥前值為(8.6±4.7)g,術后1天MWT降至.(5.0±1.9)g,隨后在較低的水平至維持21天(4.0±1.3)g(P0.01);對于TWL具有同樣的表現(xiàn),給藥前值、給藥后第1天、第21天分別為(23.9±1.1)s、(14.1±0.3)s、(14.1±0.7)s。對于同側肢體MWT和TWL的變化,對照組大鼠手術同側肢體MWT和TWL均未見明顯變化。對于實驗組大鼠,給藥前MWT及TWL值分別為(4.2±1.5)g、(13.9±0.3)s,在給藥后MWT和TWL均明顯增加(P0.01),并且在給藥后的第5天達到高峰,分別為(13.8±4.8)g、(22.1±2.0)s,給藥后21天恢復到給藥前水平。第2周及第4周取材免疫組織化學染色顯示,CGRP的陽性表達主要位于脊髓前角運動神經元的胞漿和樹突中,著色呈淺黃色。對照組中陽性細胞數(shù)高于假手術組,著色較深,而實驗組陽性細胞數(shù)明顯少于對照組,著色淺。造模術后1w、2w、3w和4w,與手術前相比,假手術組脊髓前角運動神經元內CGRP的表達未見明顯變化。對照組脊髓前角運動神經元內CGRP的陽性表達由手術前的154.7±2.9逐漸升高,術后第2周達到178.2±3.6,術后第4周略下降至162.1±2.9。手術組手術前脊髓前角運動神經元內CGRP的陽性表達為152.3±3.0,給藥后陽性表達數(shù)目逐漸下降,術后第2周陽性表達計數(shù)為120.4±3.1,該降低效應維持一段時間后,在第4周略升高至131.6±3.4。結論：足底皮下注射BoNT-A能夠改善SNL模型大鼠手術同側肢體的MWT和TWL,有鎮(zhèn)痛作用。足底皮下注射BoNT-A抑制大鼠L5、L6脊神經損傷后脊髓前角運動神經元內CGRP的表達,可能是其鎮(zhèn)痛作用的機制所在。
【關鍵詞】：肉毒毒素A 神經源性疼痛 SNL模型 降鈣素基因相關肽 運動神經元
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R741
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 中英文縮寫對照7-9
• 第一部分 肉毒毒素A對神經病理性疼痛大鼠行為學的影響9-19
• 引言9-10
• 實驗材料與方法10-13
• 1.1 實驗材料10-11
• 1.2 實驗方法11-13
• 結果13-17
• 討論17-19
• 第二部分 肉毒毒素A對神經病理性疼痛大鼠CGRP的影響19-29
• 引言19-20
• 實驗材料與方法20-23
• 1.1 實驗材料20
• 1.2 實驗方法20-22
• 1.3 統(tǒng)計學分析22-23
• 結果23-27
• 討論27-29
• 參考文獻29-31
• 結論31-32
• 文獻綜述32-48
• 參考文獻44-48
• 讀研期間主要學術成果48-49
• 致謝49

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前2條

1 曹瑩瑩;司軍強;李麗;成洪聚;閆觀茹;王磊;;降鈣素基因相關肽與中樞系統(tǒng)神經病理性疼痛[J];包頭醫(yī)學院學報;2008年05期

2 吳仲敏;凌樹才;朱f^;吳松江;;成人和大鼠陰莖包皮及包皮系帶內降鈣素基因相關肽免疫陽性神經末梢的分布及來源[J];解剖學報;2006年04期

  本文關鍵詞：肉毒毒素A對神經源性疼痛大鼠行為學及脊髓前角運動神經元CGRP的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：328676