本文關(guān)鍵詞：七氟醚對人肺腺癌A549細胞生長、轉(zhuǎn)移能力及化療敏感性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南方醫(yī)科大學》 2012年

七氟醚對人肺腺癌A549細胞生長、轉(zhuǎn)移能力及化療敏感性的影響

梁樺  

【摘要】：肺癌是當今世界各國常見的呼吸道惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)上升趨勢。肺癌的病理分類中,75%～85%為非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC),治療方法以手術(shù)切除為主,但腫瘤在術(shù)后復發(fā)和轉(zhuǎn)移仍然是肺癌患者死亡的主要原因。19世紀80年代,有學者發(fā)現(xiàn)手術(shù)可促進腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移能力,并注意到腫瘤患者術(shù)后復發(fā)和轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。近年來,人們逐漸認識到麻醉藥物和麻醉方法也可影響到腫瘤患者的術(shù)后轉(zhuǎn)歸和長期預后。如何在圍術(shù)期抑制腫瘤細胞的進一步發(fā)展和轉(zhuǎn)移是麻醉醫(yī)師面臨的新挑戰(zhàn),正成為麻醉學研究的新課題。麻醉醫(yī)師應選擇具有抑制腫瘤細胞生長和轉(zhuǎn)移能力的麻醉藥或麻醉方法,以降低腫瘤在術(shù)后復發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率。 七氟醚是肺癌手術(shù)期間廣泛使用的吸入麻醉藥物,其以氣體形式通過呼吸道進入人體內(nèi)發(fā)揮麻醉作用,具有麻醉效能強、可控性高的特點。因此,七氟醚在全身麻醉中,特別是在麻醉維持過程中占據(jù)著重要地位。肺癌手術(shù)時間相對較長,患者需長時間地接受吸入麻醉。七氟醚進入呼吸道后,首先與支氣管、肺泡直接接觸,但七氟醚對肺癌細胞的生長、轉(zhuǎn)移能力及化療敏感性有何影響尚不明確。 腫瘤的生長是一個多基因、多階段的復雜過程,其中細胞凋亡與細胞增殖之間的平衡失調(diào)是腫瘤形成的原因之一。X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitorof apoptosis protein, XIAP)和Survivin屬凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis proteins, IAPs)成員,在腫瘤細胞增殖和凋亡過程中起著重要作用。研究證實,XIAP和Survivn能直接阻止天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific protease-3, Caspase-3)的合成。它們表達的下調(diào)能促進Caspase-3生成,誘導細胞發(fā)生凋亡。Bcl-2和Bax是Bcl-2蛋白家族成員,其中Bcl-2為抗凋亡成員,而Bax為促凋亡成員。Bcl-2和Bax之間的相互作用結(jié)果可決定細胞是否通過線粒體途徑發(fā)生凋亡。目前,七氟醚對人肺腺癌A549細胞增殖、凋亡及對上述分子表達有何影響尚不明確。 腫瘤的生長還與細胞周期調(diào)控機制異常有關(guān)。腫瘤屬于一種細胞周期調(diào)控機制發(fā)生紊亂的疾病,大多數(shù)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與細胞周期的調(diào)控異常密切相關(guān)。細胞周期受多種細胞周期蛋白(Cyclin)和細胞周期蛋白依賴激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)調(diào)控,其中Cyclin A, Cyclin B1,Cdc2在調(diào)節(jié)細胞周期的G2/M期進展過程中發(fā)揮著重要作用。上述周期蛋白表達異�？蓪е录毎芷贕2/M期調(diào)控失常,使細胞發(fā)生癌變。目前,七氟醚對人肺腺癌A549細胞的細胞周期及Cyclin A, Cyclin B1,Cdc2表達有何影響尚未見報道。 腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個復雜、持續(xù)、多步驟、多階段的過程。其中,腫瘤細胞的侵襲和遷移能力是決定腫瘤細胞能否發(fā)生轉(zhuǎn)移的兩個較為重要因素。在腫瘤的基本轉(zhuǎn)移過程中,腫瘤細胞首先通過膜表面受體粘附于基底膜(basement membrane, BM)和細胞外基質(zhì)(extracellula matrix, ECM)成分,然后分泌蛋白水解酶侵襲BM和ECM,最后定向運動、遷移穿越BM和ECM,并經(jīng)血道和淋巴道向遠處遷移,在新的位置形成轉(zhuǎn)移灶。MMP (matrix metalloproteinases, MMP)-2和MMP-9是由腫瘤細胞分泌的一類能降解BM和ECM的蛋白水解酶,同屬基質(zhì)金屬蛋白酶家族,在腫瘤細胞侵襲過程中起著關(guān)鍵性作用；腫瘤細胞表達的Fasci、Ezrin能促進細胞的運動能力,與腫瘤細胞的遷移過程密切相關(guān)。目前,七氟醚對人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力及上述相關(guān)分子的表達有何影響尚不明確。 p38MAPK (p38mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導通路是MAPK家族的信號轉(zhuǎn)導通路之一。大量研究證實,p38MAPK信號轉(zhuǎn)導通路參與調(diào)控了腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。但p38MAPK信號轉(zhuǎn)導通路是否參與調(diào)控七氟醚對A549細胞轉(zhuǎn)移能力的影響,以及是否參與調(diào)控七氟醚對MMP.2.MMP-9. Fascin. Ezrin表達的影響尚不明確。 化療已作為常規(guī)方案列入肺癌的綜合治療,對降低腫瘤術(shù)后復發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率有一定積極意義。近年來,隨著肺癌患者在圍術(shù)期使用鉑類藥物化療愈來愈普遍,麻醉藥物是否會影響化療藥物的效果也日漸受到關(guān)注。研究表明,七氟醚可減弱順鉑對艾氏腹水腫瘤細胞的毒性作用,但七氟醚是否會影響順鉑對人肺腺癌A549細胞的抗癌效應尚不明確。 本研究采用七氟醚作用于體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細胞,并對以下三個方面進行研究：①探討七氟醚對人肺腺癌A549細胞生長的影響及有關(guān)分子機制；②探討七氟醚對人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力的影響及有關(guān)分子機制；③探討七氟醚對人肺腺癌A549細胞化療敏感性的影響及有關(guān)分子機制。闡明上述問題將為臨床麻醉工作提供一定指導意義。 第一章七氟醚對人肺腺癌A549細胞增殖、凋亡及有關(guān)分子表達的影響 目的觀察不同濃度七氟醚對人肺腺癌A549細胞增殖、凋亡的影響,并探討有關(guān)分子機制。 方法人肺腺癌A549細胞接種于培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后,隨機分為4組：對照組(C組,0%七氟醚)、1.7%七氟醚組(S1組)、3.4%七氟醚組(S2組)、5.1%七氟醚組(S3組)。S1、S2、S3組的A549細胞分別用1.7%、3.4%、5.1%七氟醚處理2、4、6h。C組不接受七氟醚處理。四組處理結(jié)束后,繼續(xù)培養(yǎng)48h。于48h時,采用MTT法、平板克隆實驗、流式細胞儀分別檢測各組A549細胞處理2、4、6h后的增殖抑制率、克隆形成率、凋亡率。免疫印跡法檢測各組A549細胞處理4h的XIAP,Survivin,Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表達水平。 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,增殖抑制率、克隆形成率、細胞凋亡率的比較采用兩因素析因設計方差分析。XIAP、Survivin、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達的組間比較采用單因素方差分析。組間多重比較采用LSD法(方差齊)或Dunnett's T3法(方差不齊)。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.各組A549細胞增殖抑制率的比較。經(jīng)析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理濃度各組間增殖抑制率的差異有統(tǒng)計學意義(F=128.672,P=0.000)。七氟醚處理時間各組間增殖抑制率的差異有統(tǒng)計學意義(F=135.426,P=0.000)。七氟醚處理濃度與七氟醚處理時間這兩個因素無交互效應(F=1.854,P=0.135)。各個處理時間的S2、S3組增殖抑制率均高于S1組(P0.05),其中S3組S2組(P0.05)。S1、S2、S3組處理6h的增殖抑制率處理4h的增殖抑制率處理2h的增殖抑制率(P0.05)。C組各個處理時間的A549細胞增殖抑制率均為0。 2.各組A549細胞克隆形成率的比較。經(jīng)析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理濃度各組間克隆形成率的差異有統(tǒng)計學意義(F=400.176,P=0.000)。七氟醚處理時間各組間克隆形成率的差異有統(tǒng)計學意義(F=65.728,P=0.000)。七氟醚處理濃度與七氟醚處理時間這兩個因素存在交互效應(F=6.081,P=0.000)。七氟醚處理濃度的單獨效應分析顯示：與C組比較,各個處理時間的S1、S2、S3組克隆形成率依次降低(P0.05)；七氟醚處理時間的單獨效應分析顯示：S1、S2、S3組處理6h的克隆形成率處理4h的克隆形成率處理2h的克隆形成率(P0.05),C組各個處理時間的克隆形成率比較無顯著差異(P0.05) 3.各組A549細胞凋亡率的比較。經(jīng)析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理濃度各組間凋亡率的差異有統(tǒng)計學意義(F=278.064,P=0.000)。七氟醚處理時間各組間凋亡率的差異有統(tǒng)計學意義(F=94.230,P=0.000)。七氟醚處理濃度與七氟醚處理時間這兩個因素存在交互效應(F=11.440,P=0.000)。七氟醚處理濃度的單獨效應分析顯示：與c組比較,各個處理時間的S1、S2、S3組細胞凋亡率均依次增加(P0.05)；七氟醚處理時間的單獨效應分析顯示：S1、S2、S3組處理6h的細胞凋亡率處理4h的細胞凋亡率處理2h的細胞凋亡率(P0.05),C組各個處理時間的細胞凋亡率比較無顯著差異(P0.05)。 4.各組A549細胞XIAP, Survivin, Cleaved Caspase-3蛋白表達水平的比較。與C組比較,S1、S2、S3組XIAP, Survivin蛋白表達依次下調(diào)(P0.05)與C組比較,S1、S2、S3組Cleaved Caspase-3蛋白表達依次上調(diào)(P0.05) 5.各組A549細胞Bcl-2, Bax蛋白表達水平的比較。與C組比較,S1、S2、S3組Bcl-2, Bax蛋白表達無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 結(jié)論七氟醚能抑制A549細胞增殖,促進A549細胞凋亡。該效應與下調(diào)XIAP、urvivin蛋白表達,上調(diào)Cleaved Caspase-3蛋白表達有關(guān)。 第二章七氟醚對人肺腺癌A549細胞的細胞周期及有關(guān)分子表達的影響 目的觀察不同濃度七氟醚對人肺腺癌A549細胞的細胞周期影響,并探討有關(guān)分子機制。 方法人肺腺癌A549細胞接種于培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后,隨機分為對照組(C組,0%七氟醚)、1.7%七氟醚組(S1組)、3.4%七氟醚組(S2組)、5.1%七氟醚組(S3組)。S1、S2、S3組的A549細胞分別用1.7%、3.4%、5.1%七氟醚處理4h。C組不接受七氟醚處理。四組處理結(jié)束后,繼續(xù)培養(yǎng)48h。于48h時,采用流式細胞儀檢測各組A549細胞的細胞周期比例變化。免疫印跡法檢測各組A549細胞處理4h后的Cyclin A, Cyclin B1, Cdc2蛋白的表達水平。 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,組間比較采用單因素方差分析。組間多重比較采用LSD法。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.各組A549細胞的細胞周期變化的比較。與C組比較,S1、S2、S3組G0/G1期細胞比例依次降低(P0.05),S期和G2/M期細胞比例依次增加(P0.05)。 2.各組A549細胞Cyclin A, Cyclin B1, Cdc2蛋白表達水平的比較。與C組比較,S1、S2、S3組Cyclin A, Cyclin B1, Cdc2蛋白表達依次下調(diào)(P0.05) 結(jié)論七氟醚阻滯A549細胞的細胞周期于G2/M期,該效應與下調(diào)Cyclin A, Cyclin B1,Cdc2蛋白表達有關(guān)。 第三章七氟醚對人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力及有關(guān)分子表達的影響 目的觀察不同濃度七氟醚對人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力的影響,并探討有關(guān)分子機制。 方法人肺腺癌A549細胞接種于培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后,隨機分為4組：對照組(C組,0%七氟醚)、1.7%七氟醚組(S1組)、3.4%七氟醚組(S2組)、5.1%七氟醚組(S3組)。S1、S2、S3組的A549細胞分別用1.7%、3.4%、5.1%七氟醚處理2、4、6h。C組不接受七氟醚處理。四組處理結(jié)束后,繼續(xù)培養(yǎng)24h。于24h時,采用Transwell法檢測各組細胞處理2、4、6h后的侵襲細胞數(shù),細胞劃痕實驗檢測各組細胞處理4h后的細胞遷移率變化,RT-PCR和免疫印跡法檢測各組細胞處理4h后MMP-2、MMP-9、Fascin、Ezrin的mRNA和蛋白表達水平。 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,侵襲細胞數(shù)的比較采用兩因素析因設計方差分析。細胞遷移率、MMP-2、MMP-9、Ezrin、Fascin mRNA和蛋白表達的組間比較采用單因素方差分析。組間多重比較采用LSD法(方差齊)或Dunnett's T3法(方差不齊)。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.各組A549細胞侵襲細胞數(shù)的比較。經(jīng)析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理濃度各組間侵襲細胞數(shù)的差異有統(tǒng)計學意義(F=241.554,P=0.000)。七氟醚處理時間各組間侵襲細胞數(shù)的差異有統(tǒng)計學意義(F=31.188,P=0.000)。七氟醚處理濃度與七氟醚處理時間這兩個因素存在交互效應(F=3.801,P=0.003)。七氟醚處理濃度的單獨效應分析顯示：與C組比較,各個處理時間的S1、S2、S3組侵襲細胞數(shù)依次減少(P0.05)；七氟醚處理時間的單獨效應分析顯示：S1、S2、S3組處理6h的侵襲細胞數(shù)處理4h的侵襲細胞數(shù)處理2h的侵襲細胞數(shù)(P0.05),C組各個處理時間的侵襲細胞數(shù)比較無顯著差異(P0.05) 2.各組A549細胞MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表達水平的比較。與C組比較,S1、S2、S3組MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表達依次下調(diào)(P0.05)。 3.各組A549細胞遷移率的比較。與C組比較,S1組細胞遷移率無統(tǒng)計學差異(P=0.134)。與C組比較,S2、S3組細胞遷移率依次降低(P0.05)。 4.各組A549細胞Fascin、Ezrin mRNA和蛋白表達水平的比較。與C組比較,S1、S2、S3組Fasch、Ezrin mRNA和蛋白表達依次下調(diào)(P0.05)。 結(jié)論七氟醚能抑制A549細胞侵襲,該效應與下調(diào)MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表達有關(guān)；七氟醚能抑制A549細胞遷移,該效應與下調(diào)Fascin、Ezrin mRNA和蛋白表達有關(guān)。 第四章p38MAPK信號轉(zhuǎn)導通路在七氟醚抑制人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力中的作用 目的探討七氟醚對人肺腺癌A549細胞轉(zhuǎn)移能力的抑制作用是否與p38MAPK信號轉(zhuǎn)導通路有關(guān)。 方法人肺腺癌A549細胞接種于培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后A549細胞隨機分為對照組(C組)、3.4%七氟醚組(Sev組)、3.4%七氟醚+SB203580組(Sev+SB組)、SB203580組(SB組)。Sev組暴露于3.4%七氟醚4h。Sev+SB組先與20μMSB203580孵育,隨后暴露于3.4%七氟醚4h。SB組用SB203580處理。C組不接受七氟醚和SB203580處理。四組處理結(jié)束后,繼續(xù)培養(yǎng)24h。于24h時,采用Transwell法檢測各組細胞處理后的侵襲細胞數(shù),細胞劃痕實驗檢測各組細胞處理后的細胞遷移率變化,蛋白印跡法檢測各組細胞處理后p38MAPK、 p-p38MAPK、UMP-2、MMP-9、Ezrin Fascin的蛋白表達水平。 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示。組間比較采用兩因素析因設計方差分析,組間多重比較采用LSD法(方差齊)或Dunnett's T3法(方差不齊)。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.各組A549細胞侵襲細胞數(shù)的比較。析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后侵襲細胞數(shù)顯著減少(F=87.188,P=0.000)。SB203580處理后侵襲細胞數(shù)目顯著減少(F=124.866,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=15.840,P=0.001)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組侵襲細胞數(shù)目顯著減少(P0.05)。Sev+SB組侵襲細胞數(shù)目顯著低于其他3組(P0.05) 2.各組A549細胞遷移率的比較。析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后細胞遷移率顯著降低(F=79.419,P=0.000)。SB203580處理后細胞遷移率顯著降低(F=84.304,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=33.305,P=0.000)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組的細胞遷移率顯著降低(P0.05)。Sev+SB組的細胞遷移率顯著低于其他3組(P0.05)。 3.各組A549細胞p38MAPK磷酸化水平的比較。析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后p38MAPK磷酸化水平顯著降低(F=51.124,P=0.000)。SB203580處理后p38MAPK磷酸化水平顯著降低(F=82.749,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=5.463,P=0.03)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組p38MAPK磷酸化水平顯著降低(P0.05)。Sev+SB組p38MAPK磷酸化水平顯著低于其他3組(P0.05)。 4.各組A549細胞MMP-2、MMP-9蛋白表達的比較。MMP-2蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后MMP-2表達顯著下調(diào)(F=103.042,P=0.000)。SB203580處理后MMP-2蛋白表達顯著下調(diào)(F=243.337,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=5.656,P=0.027)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組MMP-2蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05)Sev+SB組MMP-2蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05)；MMP-9蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后MMP-9蛋白表達顯著下調(diào)(F=88.369,P=0.000)。SB203580處理后MMP-9蛋白表達顯著下調(diào)(F=271.388,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=5.968,P=0.024)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組MMP-9蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05)。Sev+SB組MMP-9蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05) 5.各組A549細胞Fascin、Ezrin蛋白表達的比較。Fascin蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后Fascin蛋白表達顯著下調(diào)(F＝104.422,P=0.000)。SB203580處理后Fascin蛋白表達顯著下調(diào)(F=364.239,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=10.168,P=0.005)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組Fascin蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05)。Sev+SB組Fascin蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05)；Ezrin蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后Ezrin蛋白表達顯著下調(diào)(F=78.411,P=0.000)。SB203580處理后Ezrin蛋白表達顯著下調(diào)(F=169.365,P=0.000)。七氟醚和SB203580這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=21.122,P=0.000)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、SB組Ezrin蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05)Sev+SB組Ezrin蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05) 結(jié)論七氟醚抑制A549細胞侵襲和遷移的作用可能與抑制p38MAPK信號轉(zhuǎn)導通路有關(guān)。 第五章七氟醚對人肺腺癌A549細胞化療敏感性的影響 目的觀察七氟醚對人肺腺癌A549細胞化療敏感性的影響及探討有關(guān)分子機制。 方法人肺腺癌A549細胞接種于培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后A549細胞隨機分為對照組(C組)、2.5%七氟醚組(Sev組)、順鉑組(DDP組)、2.5%七氟醚+順鉑組(Sev+DDP組)。Sev組暴露于2.5%七氟醚4h,DDP組接受終濃度為10μmol/L順鉑的處理。Sev+DDP組A549細胞加入終濃度為10μmol/L順鉑,再暴露于2.5%七氟醚4h。C組不接受七氟醚和DDP處理。四組處理結(jié)束后,繼續(xù)培養(yǎng)24h。于24h時,采用Transwell法檢測各組細胞處理后的侵襲細胞數(shù),細胞劃痕實驗檢測各組細胞處理后的細胞遷移率變化,蛋白印跡法檢測各組細胞處理后MMP-2、MMP-9、Ezrin、Fascin蛋白表達水平。 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示。組間比較采用兩因素析因設計方差分析,組間多重比較采用LSD法。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.各組A549細胞侵襲數(shù)的比較。析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后侵襲細胞數(shù)顯著減少(F=80.695,P=0.000)。DDP處理后侵襲細胞數(shù)顯著減少(F=127.681,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=7.871,P=0.011)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組侵襲細胞數(shù)目顯著減少(P0.05)。Sev+DDP組侵襲細胞數(shù)目顯著低于其他3組(P0.05)。 2.各組A549細胞MMP-2、MMP-9表達的變化。 MMP-2蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后MMP-2蛋白表達顯著下調(diào)(F=68.510,P=0.000)。DDP處理后MMP-2蛋白表達顯著下調(diào)(F=205.571,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F--8.351,P=0.009)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組MMP-2蛋白表達下調(diào)(P0.05)。Sev+DDP組MMP-2蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05)； MMP-9蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后MMP-9蛋白表達顯著下調(diào)(F=86.277,P=0.000)。DDP處理后MMP-9蛋白表達顯著下調(diào)(F=365.709,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=18.754,P=0.000)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組MMP-9蛋白表達下調(diào)(P0.05)。Sev+DDP組MMP-9蛋白表達顯著低于其他3組。 3.各組A549細胞遷移率的比較。析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后細胞遷移率顯著降低(F=133.671,P=0.000)。DDP處理后細胞遷移率顯著降低(F=209.764,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=54.888,P=0.000)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組的細胞遷移率顯著降低(P0.05)。Sev+DDP組的細胞遷移率顯著低于其他3組(P0.05) 4.各組A549細胞Ezrin、Fascin蛋白表達的變化。Ezrin蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后Ezrin蛋白表達顯著下調(diào)(F=74.205,P=0.000)。DDP處理后Ezrin蛋白表達顯著下調(diào)(F=282.359,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=9.516,P=0.006)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組Ezrin蛋白表達下調(diào)(P0.05)。Sev+DDP組Ezrin蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05)；Fascin蛋白表達比較：析因分析發(fā)現(xiàn),七氟醚處理后Fascin蛋白表達顯著下調(diào)(F=128.451,P=0.000)。DDP處理后Fascin蛋白表達顯著下調(diào)(F=603.874,P=0.000)。七氟醚和DDP這兩個處理因素之間存在著交互效應(F=52.328,P=0.000)。單向方差分析顯示：與C組比較,Sev組、DDP組Fascin蛋白表達下調(diào)(P0.05)。Sev+DDP組Fascin蛋白表達顯著低于其他3組(P0.05)。 結(jié)論七氟醚增強人肺腺癌A549細胞對順鉑的敏感性,促進其抑制A549細胞的侵襲、遷移行為,該效應分別與下調(diào)MMP-2、MMP-9、Ezrin、Fascin蛋白表達有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R734.2
【目錄】：

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【引證文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 賀宇;齊潔敏;謝朝輝;張杰;;整合素a5b1對胃癌細胞黏附、轉(zhuǎn)移及耐藥的影響[J];世界華人消化雜志;2014年14期

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 梁樺;楊承祥;李恒;劉洪珍;王漢兵;;術(shù)前急性超容血液稀釋對結(jié)腸癌患者高凝狀態(tài)的影響[J];癌癥;2006年10期

2 韋尉東;溫浙盛;蘇曉東;林鵬;戎鐵華;陳麗昆;;899例非小細胞肺癌完全切除術(shù)后的多因素生存分析[J];癌癥;2007年11期

3 陳萬青;張思維;鄒小農(nóng);;中國肺癌發(fā)病死亡的估計和流行趨勢研究[J];中國肺癌雜志;2010年05期

4 陸舜;虞永峰;;Ⅲ期N2非小細胞肺癌的圍手術(shù)期化療[J];中國肺癌雜志;2008年05期

5 操隆輝;周建華;林文前;譚紅鷹;曾維安;曾益新;;嗎啡對順鉑誘導的鼻咽癌CNE-2細胞裸鼠移植瘤生長抑制作用的影響[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);2010年03期

6 李玉娟;柳垂亮;王飛;陳偉強;張靜;彭書崚;;異氟醚和七氟醚對新生大鼠皮質(zhì)凋亡以及Akt和Bcl-xl/Bad表達的不同影響[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);2011年03期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王為民;孔凡良;李成發(fā);姚榮杰;程瑩星;張麗娟;;參芪扶正注射液聯(lián)合多西他賽和順鉑治療晚期非小細胞肺癌臨床觀察[J];安徽醫(yī)學;2011年07期

2 郭惠琴;趙宇;陸江陽;李澤堅;;E-cadherin在非小細胞肺癌組織中的表達及臨床意義[J];癌癥進展;2011年05期

3 趙宇;郭惠琴;;檢測非小細胞肺癌患者的血清循環(huán)EGFR基因突變研究進展[J];癌癥進展;2012年01期

4 余意;程先鳴;;肺切除手術(shù)對肺癌患者右心功能的影響分析[J];中國醫(yī)藥導刊;2012年03期

5 李媛秋;代敏;陳元立;張思維;陳萬青;代珍;鄒小農(nóng);;中國省區(qū)水平肺癌死亡率估計方法研究[J];中國肺癌雜志;2011年02期

6 張軍;祁娟;郭艷;郭義;富偉能;周寶森;吳廣平;韓立波;何安光;;HDGF在手術(shù)切除非小細胞肺癌中的異常表達及其在預測預后中的意義[J];中國肺癌雜志;2011年03期

7 張輝;陳曉峰;;血清/血漿microRNAs作為肺癌診斷標記物的研究進展[J];中國肺癌雜志;2012年01期

8 牛艷潔;江銀玲;許長江;王向迎;劉友如;趙珩;韓寶惠;姜麗巖;;代謝組學方法分析肺癌患者血清和尿液小分子代謝產(chǎn)物的初步研究[J];中國肺癌雜志;2012年04期

9 何芬;蔣昌斌;萬明輝;秦海燕;李蓉;牛道立;;全營養(yǎng)混合液配合放化療治療Ⅲ期非小細胞肺癌臨床觀察[J];廣東醫(yī)學;2011年16期

10 邵嵐;宋正波;張沂平;蘇丹;;肺癌分子分型與靶向治療研究進展[J];中國肺癌雜志;2012年09期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 孫倩;夏中元;胡剛;;急性高容量血液稀釋對顱內(nèi)動脈瘤夾閉患者圍術(shù)期血清S-100β的影響[A];第十五次長江流域麻醉學學術(shù)年會暨2010年中南六省麻醉學學術(shù)年會暨2010年湖北省麻醉學學術(shù)年會論文集[C];2010年

2 邵嵐;洪衛(wèi);張沂平;;聯(lián)合血清腫瘤標志物建立預測厄洛替尼治療復治非小細胞肺癌生存模型[A];2013華東胸部腫瘤論壇暨第六屆浙江省胸部腫瘤論壇論文集[C];2013年

3 鄭洋;陳信義;;芪龍顆粒、芪蛭顆粒治療NSCLC高凝狀態(tài)的療效觀察[A];中華中醫(yī)藥學會第二屆岐黃論壇——血液病中醫(yī)藥防治分論壇論文集[C];2014年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王青竹;基于三維SVMs的肺部CT中的結(jié)節(jié)檢測算法[D];吉林大學;2011年

2 趙英浩;基于高通量篩選技術(shù)的抗肺腺癌新天然小分子化合物篩選[D];吉林大學;2011年

3 宗敏茹;非小細胞肺癌天然小分子抑制劑的篩選及其作用機理研究[D];吉林大學;2011年

4 朱航;染料木黃酮聯(lián)合吉非替尼抑制獲得性耐藥突變非小細胞肺癌分子機制的研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

5 黃健清;EGFR/KRAS/ALK野生型NSCLC中凋亡通路變化及順鉑聯(lián)用PAC-1體外抗腫瘤的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

6 丁健樺;復雜基質(zhì)樣品的電噴霧萃取電離質(zhì)譜分析理論與應用研究[D];吉林大學;2011年

7 陳延斌;PD-L1/PD-1在非小細胞肺癌中的臨床應用研究[D];蘇州大學;2011年

8 張一方;EML4-ALK融合型非小細胞肺癌特性的生物信息學分析及下游STAT3基因的功能驗證[D];南方醫(yī)科大學;2012年

9 于杜娟;NSCLC中GRP94/78及肺癌相關(guān)因子蛋白表達及其臨床意義[D];吉林大學;2013年

10 孫小亮;課題一：MMP-7在肺癌患者腫瘤組織中的表達和外周血中蛋白水平及其臨床意義 課題二：傅里葉變換紅外光譜技術(shù)鑒別肺組織良惡性的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫維國;不同羥乙基淀粉行急性高容量血液稀釋對凝血功能的影響[D];吉林大學;2011年

2 滕揚;基于改進的BP神經(jīng)網(wǎng)絡肺部CT圖像的結(jié)節(jié)識別[D];吉林大學;2011年

3 高金瑩;改良后支氣管鏡下肺灌洗術(shù)對肺癌診斷價值的研究[D];吉林大學;2011年

4 陳晨;細絲蛋白A在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義[D];吉林大學;2011年

5 祁爍;茶多酚片輔助化療治療晚期非小細胞肺癌臨床療效觀察[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

6 肖楊;298例晚期非小細胞肺癌患者預后影響因素分析及二線方案療效的對比研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

7 薛松;黃芪扶正湯抑制Lewis肺癌移植瘤生長及其機制的實驗研究[D];中南大學;2011年

8 雷瓊瓊;圍術(shù)期綜合康復干預對老年肺癌肺葉切除術(shù)后患者康復療效研究[D];中南大學;2010年

9 王芳;晚期非小細胞肺癌IGF-IR表達與鉑類化療療效及預后的關(guān)系[D];新疆醫(yī)科大學;2011年

10 鄧李君;肺腺癌并白細胞極度升高的類白血病反應1例報告并文獻復習[D];山東大學;2011年

【同被引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張雁;關(guān)雪晶;吳宏;周玥;姜蓉;何曉莉;;當歸多糖對放射損傷小鼠骨髓單個核細胞黏附分子表達及細胞周期的影響[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2010年06期

2 趙雪艷;王娟;榮小偉;徐遠義;;DS對胃癌細胞整合素β1表達及腹腔種植轉(zhuǎn)移的影響[J];臨床與實驗病理學雜志;2013年04期

3 朱大偉;陳俊俊;裴紅蕾;;胃癌組織中粘附分子整合素CD11c的表達及對預后的影響[J];臨床腫瘤學雜志;2013年09期

4 王華毅;謝先木;付德琴;王虹;;腹腔沖洗液L3-PP和整合素α5β1檢測對胃癌腹膜種植轉(zhuǎn)移預測價值分析[J];中華腫瘤防治雜志;2013年04期

5 呂慧;;原發(fā)性IgA腎病患兒腎組織免疫病理及CD44的表達[J];中國婦幼保健;2010年30期

6 洪宇;陳冬梅;李揚志;李春花;謝梅青;;整合素αvβ3和孕激素受體在子宮內(nèi)膜異位癥患者黃體中期子宮內(nèi)膜中的表達[J];中國婦幼保健;2012年13期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王延濤;沈方臻;侯繼院;;低劑量順鉑并IFN-α對小鼠移植性肝癌血管生成影響[J];青島大學醫(yī)學院學報;2008年01期

2 劉樹庫;許紹發(fā);駱寶劍;劉志東;李福根;韓毅;;1380例手術(shù)后的非小細胞肺癌的多因素預后分析[J];中國肺癌雜志;2006年05期

3 Jay H.Lubin,王作元,John D.Boice Jr,徐肇翊,William J.Blot,王隴德,Ruth A.Kleinerman;肺癌危險度與室內(nèi)氡關(guān)系研究:中國兩項研究的匯總分析結(jié)果[J];中國輻射衛(wèi)生;2003年04期

4 ;Suppression of bcl-2 Gene by RNA Interference Increases Chemosensitivity to Cisplatin in Nasopharyngeal Carcinoma Cell Line CNE1[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2004年11期

5 董志偉,喬友林,李連弟,陳育德,王潤田,雷通海,饒克勤,王汝寬,趙平,游偉程,魯鳳珠,戴旭東,王國清,羅賢懋,周海城;中國癌癥控制策略研究報告[J];中國腫瘤;2002年05期

6 魯鳳珠,張思維,陳永紅,鄒小農(nóng),李連弟;中國腫瘤登記情況調(diào)查結(jié)果初步分析[J];中國腫瘤;2004年03期

7 張思維;陳萬青;孔靈芝;李光琳;趙平;;中國部分市縣2003年惡性腫瘤發(fā)病年度報告[J];中國腫瘤;2007年07期

8 陳萬青;張思維;孔靈芝;李光琳;趙平;;中國部分市縣2003年惡性腫瘤死亡年度報告[J];中國腫瘤;2007年08期

9 張維森,江朝強,Lam T.Hing,Ho S.Yin,陳清,劉薇薇,何健民,曹民;接塵、吸煙者死亡危險度比較的前瞻性隊列研究[J];中華流行病學雜志;2004年09期

10 賈慧群,宋子賢,褚海辰,彭云水,張愛玉;術(shù)前急性高容量血液稀釋應用于腫瘤病人手術(shù)的可行性[J];中華麻醉學雜志;2000年11期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李旭鹿;尹學哲;;大豆異黃酮對A549細胞抑制作用的實驗研究[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年03期

2 華天鳳;張妍蓓;;瘦素通過激活STAT3信號通路刺激人肺腺癌細胞增殖[J];安徽醫(yī)科大學學報;2011年01期

3 王波,李冬萍,姜濤,張英博,張春;抗人肺腺癌雜交瘤細胞株的建立及初步鑒定[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;1999年04期

4 宮亮;楊和平;王昆;李劍明;周向東;;雙脫甲氧基姜黃素脂質(zhì)體對體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞增殖活性的影響研究[J];中國藥房;2006年20期

5 盧大用;張素胤;陳瑞婷;章辛;胥彬;;丙雙嗎啉的抗腫瘤作用和吸收分布排泄研究[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;1989年07期

6 孫蕊,尤慶山,劉大為;加溫聯(lián)合羥基喜樹堿對人肺腺癌細胞的影響[J];實用腫瘤學雜志;2001年01期

7 曾淑君;沈?qū)毶?文良珍;伍宇平;曾憲明;;云芝糖肽對裸鼠人肺腺癌抗癌作用的研究[J];實驗動物科學與管理;1992年04期

8 石喆;任占平;;肺腺癌組織中MCM5蛋白的表達及其意義[J];診斷病理學雜志;2008年05期

9 葛錫銳,王玨,姚錱,吳善芳,戴慧敏,周允中,葉慶煒;抗人肺腺癌細胞株SPC-A-1的單克隆抗體的制備和鑒定[J];實驗生物學報;1987年04期

10 鄭必強;董強剛;;更正聲明[J];中國肺癌雜志;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李東蓉;朱曄涵;杜賢榮;陳華昕;謝宇鋒;盛偉華;楊吉成;;Ad-ING4-IRES-IL-24雙基因共表達對人肺腺癌化療增敏的體內(nèi)外實驗[A];2010’全國腫瘤分子標志及應用學術(shù)研討會暨第五屆中國中青年腫瘤專家論壇論文匯編[C];2010年

2 張卓;周波;王曉紅;;玉米紫色植株色素誘導人肺腺癌A549細胞凋亡的初步研究[A];營養(yǎng)與慢性病——中國營養(yǎng)學會第七屆理事會青年工作委員會第一次學術(shù)交流會議論文集[C];2010年

3 張捷;蘇振中;李君瑤;智玥;王珂;;沉默Ku70對人肺腺癌耐藥細胞凋亡相關(guān)基因組表達及耐藥性的影響[A];中華醫(yī)學會第五屆全國胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 張捷;黎萍;王珂;梁紅;王琪;;沉默Ku70逆轉(zhuǎn)人肺腺癌耐藥的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第五屆全國胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

5 周敏;;Notch1蛋白在人肺腺癌組織中的表達及意義[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

6 何臣;徐軍;;吉非替尼耐藥人肺腺癌PC-9/GR細胞株的建立及其生物學特性[A];中國病理生理學會第九屆全國代表大會及學術(shù)會議論文摘要[C];2010年

7 易亞喬;伍參榮;張炳填;葛金文;田雪飛;陳懿;;桔�？傇碥諏θ朔蜗侔〢549細胞抑制作用研究[A];中南地區(qū)第八屆生理學學術(shù)大會論文摘要匯編[C];2012年

8 熊曾;胡成平;劉進康;陸蓉莉;周暉;周漠玲;陳偉;;雙源容積灌注CT成像評價晚期人肺腺癌靶向治療近期療效的臨床研究[A];中華醫(yī)學會第十八次全國放射學學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

9 沈鈞康;;人肺腺癌腦轉(zhuǎn)移瘤組織裸小鼠腦內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤模型MRI研究[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國放射學大會論文匯編（下冊）[C];2006年

10 吳曉東;郭玉忠;張虹;韓正濤;;佛波酯對人肺腺癌A549細胞粘附、運動、侵襲能力和CXCR4表達的影響[A];中國藥理學會第十一次全國學術(shù)會議�？痆C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 國醫(yī);[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

2 ;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 食訊;[N];中國食品報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄧彭博;EGCG致人肺腺癌“血管正�；奔按翱谄诼�(lián)合順鉑療效評估[D];中南大學;2013年

2 伍俊;曲古抑素A誘導人肺腺癌耐順鉑細胞株凋亡及增強對順鉑敏感性機制初步研究[D];中南大學;2010年

3 鄭蕓;RUNX3基因甲基化修飾及其下游AKT信號通路在人肺腺癌化療耐藥表型中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2013年

4 馬青山;Ku80在人肺腺癌中的表達及對順鉑敏感性的影響[D];吉林大學;2013年

5 劉迎福;人肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)分子的定量蛋白質(zhì)組學研究[D];中南大學;2009年

6 王成昆;重組血管基膜衍生多功能肽（rVBMDMP）抗非小細胞肺癌的作用及機制研究[D];中南大學;2010年

7 張燁;肺轉(zhuǎn)移瘤的體部立體定向放射治療預后因素分析劑量分割模式照射人肺腺癌移植瘤后基因表達譜差異的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

8 段東;蛋白質(zhì)組學技術(shù)差異蛋白單克隆抗體用于肺癌放射免疫顯像的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2008年

9 王艷;人參皂苷Rg3對人肺腺癌細胞株抗腫瘤作用及相關(guān)機制的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2011年

10 李義君;通補消積飲對人肺腺癌A549細胞增殖與凋亡影響的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 熊呂平;人肺腺癌A549干細胞球和A549細胞系線粒體融合蛋白表達的研究[D];南昌大學醫(yī)學院;2013年

2 趙世強;奧曲肽對人肺腺癌A-549細胞系生長抑素受體亞型的表達研究[D];山西醫(yī)科大學;2011年

3 朱建;化學小分子對人肺腺癌A549細胞的生長抑制作用研究[D];山東大學;2012年

4 賀禮理;人肺腺癌耐藥細胞株的放射敏感性研究[D];中南大學;2010年

5 周芊;三羥基異黃酮聯(lián)合放療對人肺腺癌A549細胞增殖凋亡的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

6 陳其田;人肺腺癌A549細胞HRS/IRR現(xiàn)象分子機制的體外研究[D];華中科技大學;2012年

7 陳炆穎;慢病毒載體介導的livin基因沉默對人肺腺癌裸鼠移植瘤生長及凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學;2011年

8 顏燕;重組人血管內(nèi)皮抑制素對人肺腺癌A549細胞ERCC1基因表達的影響[D];大連醫(yī)科大學;2011年

9 孟程;姜黃素聯(lián)合絲裂霉素對人肺腺癌A549細胞的增殖抑制作用及對NF-κB活化的影響[D];延安大學;2013年

10 佟新竹;iTRAQ定量蛋白組學在人肺腺癌A549細胞中的應用研究[D];大連醫(yī)科大學;2013年

  本文關(guān)鍵詞：七氟醚對人肺腺癌A549細胞生長、轉(zhuǎn)移能力及化療敏感性的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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