鮑曼不動(dòng)桿菌16SrRNA甲基化酶基因檢測(cè)及流行病學(xué)分析
本文關(guān)鍵詞:鮑曼不動(dòng)桿菌16SrRNA甲基化酶基因檢測(cè)及流行病學(xué)分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:鮑曼不動(dòng)桿菌是院內(nèi)感染的常見致病菌之一,隨著多重耐藥菌株的出現(xiàn)和增加,聯(lián)合用藥治療常常作為臨床治療的策略。氨基糖苷類藥物因具有高效、廣譜、殺菌的作用,為聯(lián)合用藥的選擇之一。以往對(duì)氨基糖苷類耐藥機(jī)制的研究多集中在產(chǎn)生氨基糖苷類修飾酶基因上。2003年起,一種新的介導(dǎo)氨基糖苷類耐藥機(jī)制——質(zhì)粒介導(dǎo)的16SrRNA甲基化酶基因被報(bào)道。迄今在革蘭陰性菌中共檢出7種16SrRNA甲基化酶基因:armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE和npmA。與修飾酶耐藥機(jī)制不同,該酶直接作用于氨基糖苷類藥物作用的靶位,使藥物與靶位的親和力下降,導(dǎo)致泛氨基糖苷類高水平耐藥。ERIC-PCR方法建立于1991年,最初應(yīng)用于腸桿菌科的鑒定和流行病學(xué)調(diào)查,1997年開始應(yīng)用于不動(dòng)桿菌屬的研究。 目的了解天津地區(qū)分離的鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥表型及7種16SrRNA甲基化酶基因的攜帶情況;采用ERIC-PCR方法對(duì)分離自同期3名入住不同ICU患者不同部位的8株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行同源性分析。 方法對(duì)天津地區(qū)不同年份收集的兩部分鮑曼不動(dòng)桿菌共204株(2006~2009年組52株,2010~2011年組152株),采用全自動(dòng)藥敏鑒定系統(tǒng)、瓊脂稀釋法或紙片擴(kuò)散法(K-B法)測(cè)定菌株的藥敏情況,對(duì)2010~2011年組菌株進(jìn)行臨床資料分析;聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對(duì)204株菌擴(kuò)增7種16SrRNA甲基化酶基因并進(jìn)行序列分析;ERIC-PCR方法對(duì)同期來源于3例患者不同部位的8株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行同源性調(diào)查。 結(jié)果 1、204株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)哌拉西林、三四代頭孢菌素、碳青霉烯類、氨基糖苷類、環(huán)丙沙星的耐藥率高于50%,氨芐西林/舒巴坦和復(fù)方新諾明的耐藥率高于40%,左氧氟沙星為34.80%,頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率最低,為12.25%,未發(fā)現(xiàn)多粘菌素B耐藥菌株。同時(shí)對(duì)慶大霉素、阿米卡星耐藥株106株。多重耐藥株115株,占56.37%(115/204)。 2、2010~2011年組菌株除多粘菌素B外,對(duì)其余13種抗菌藥物的耐藥率均高于2006~2009年組,其中對(duì)慶大霉素、阿米卡星的耐藥率分別由44.23%和42.31%上升至57.89%和55.26%。碳青霉烯類、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率也分別由36.54%和1.92%上升至57.89%和15.79%。多重耐藥株所占的比例由40.38%(21/52)上升至61.84%(94/152)。除多粘菌素B外,ICU來源的菌株對(duì)其余13種抗菌藥物的耐藥率均明顯高于非ICU來源的菌株。1CU中多重耐藥株占94.37%(67/71),明顯高于非ICU中所占的比例33.33%(27/81)。 3、標(biāo)本分布:ICU病區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌分離率高,占46.71%。 4、armA基因陽(yáng)性株共89株,占43.63%(89/204),均同時(shí)對(duì)阿米卡星和慶大霉素耐藥,在同時(shí)對(duì)阿米卡星和慶大霉素耐藥株中占83.96%(89/106)。armA基因陽(yáng)性株均為多重耐藥株,在全部多重耐藥株中占77.39%(89/115),未檢出其他6種16SrRNA甲基化酶基因。armA陽(yáng)性株組對(duì)除多粘菌素B以外的其余13種抗菌藥物耐藥率及多重耐藥菌株的比例明顯高于armA陰性株組。ICU中鮑曼不動(dòng)桿菌armA檢出率為73.24%(52/71),高于非ICU中armA的檢出率25.93%(21/81)。 5、分離自A、B、C3名患者的8株鮑曼不動(dòng)桿菌被分為5型,來源于A患者的痰、咽拭子、傷口分泌物及C患者靜脈導(dǎo)管的4株菌為同一基因型,與來源于B患者腦脊液的菌株存在基因型相似或相關(guān);其余3株為完全不同的基因型。 結(jié)論 1、天津地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率高,多重耐藥株所占比例也較高。 2、鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)哌拉西林、三、四代頭孢菌素、碳青霉烯類及氨基糖苷類耐藥嚴(yán)重,對(duì)左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率相對(duì)較低,未發(fā)現(xiàn)對(duì)多粘菌素B耐藥菌株。 3、2010~2011年組鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率和多重耐藥株所占比例高于2006-2009年組。 4、ICU來源的菌株較非ICU來源的耐藥嚴(yán)重,多重耐藥株所占的比例也較高。 5、天津地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌中存在armA基因,檢出率43.63%(89/204),未檢出rmtA、rmtB、rmt、rmtD、rmtE、npmA基因。armA基因陽(yáng)性株均為多重耐藥株,均同時(shí)對(duì)阿米卡星和慶大霉素耐藥。armA陽(yáng)性株對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于armA陰性株。鮑曼不動(dòng)桿菌armA基因陽(yáng)性檢出率ICU病區(qū)高于非ICU病區(qū)。 6、ERIC-PCR分型方法是一種快速有效的基因分型方法,可用于鮑曼不動(dòng)桿菌的分子流行病學(xué)調(diào)查;本研究結(jié)果顯示,菌株間存在克隆傳播。
【關(guān)鍵詞】:氨基糖苷類 耐藥基因 鮑曼不動(dòng)桿菌 多重耐藥 16SrRNA甲基化酶 腸桿菌科基因間重復(fù)一致序列-聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R440;R181.3
【目錄】:
- 中文摘要4-7
- Abstract7-13
- 縮略語(yǔ)/符號(hào)說明13-14
- 前言14-17
- 研究現(xiàn)狀、成果14-16
- 研究目的、方法16-17
- 一、鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性及相關(guān)臨床資料分析17-33
- 1.1 材料與方法17-21
- 1.1.1 材料17-18
- 1.1.2 方法18-21
- 1.2 結(jié)果21-29
- 1.3 討論29-32
- 1.4 小結(jié)32-33
- 二、鮑曼不動(dòng)桿菌16SrRNA甲基化酶基因的檢測(cè)33-44
- 2.1 材料與方法33-37
- 2.1.1 材料33-34
- 2.1.2 方法34-37
- 2.2 結(jié)果37-41
- 2.3 討論41-43
- 2.4 小結(jié)43-44
- 三、3例患者分離的8株鮑曼不動(dòng)桿菌分子流行病學(xué)調(diào)查44-51
- 3.1 材料與方法44-46
- 3.1.1 材料44-45
- 3.1.2 方法45-46
- 3.2 結(jié)果46-48
- 3.3 討論48-50
- 3.4 小結(jié)50-51
- 結(jié)論51-52
- 參考文獻(xiàn)52-58
- 發(fā)表文章及科研情況58-59
- 綜述59-70
- 綜述參考文獻(xiàn)65-70
- 致謝70-71
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本文關(guān)鍵詞:鮑曼不動(dòng)桿菌16SrRNA甲基化酶基因檢測(cè)及流行病學(xué)分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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