伊犁黑蜂蜂膠對變形鏈球菌屬及其生物膜代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時間:2017-09-25 00:34
本文關(guān)鍵詞:伊犁黑蜂蜂膠對變形鏈球菌屬及其生物膜代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究
更多相關(guān)文章: 蜂膠 變形鏈球菌屬 乳酸脫氫酶 葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶 熒光定量PCR
【摘要】:目的:通過比較伊犁黑蜂蜂膠乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis EEP)與氟化鈉對致齲變形鏈球菌屬產(chǎn)酸,產(chǎn)糖代謝關(guān)鍵酶乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenaseLDH)與葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(Glycosyltransferase GTFs)及其相關(guān)基因表達(dá)的影響來探討其對變形鏈球菌屬代謝影響機(jī)制。方法:分別培養(yǎng)游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下生長的變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌;并以含梯度濃度EEP的腦心浸液培養(yǎng)基(Brian Heart InfusionBHI),50mg/L NaF的BHI培養(yǎng)基,不含藥物的BHI培養(yǎng)基分別作為實(shí)驗(yàn)組,陽性對照組與陰性對照組與不同生長狀態(tài)的目的細(xì)菌作用18小時,①通過還原性輔酶Ⅰ氧化法測定乳酸脫氫酶活性。②通過硫酸銨鹽析結(jié)合超濾離心法提取GTFs粗酶,蒽酮法測定GTFs活性。③RT-qPCR法測定各組LDH編碼基因ldh表達(dá)。④RT-qPCR法測定各組GTFs編碼基因gtfB、gtfC、gtfD表達(dá)。結(jié)果:①在游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌各實(shí)驗(yàn)組和NaF組LDH活性均明顯受到抑制(P0.05)。②在游離狀態(tài)和生物膜狀態(tài)下,EEP組,NaF組變形鏈球菌GTFs活性沒有變化(P0.05)③游離狀態(tài)時,變形鏈球菌,遠(yuǎn)緣鏈球菌實(shí)驗(yàn)組組和NaF組ldh表達(dá)明顯受到抑制(P0.05);生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌實(shí)驗(yàn)組在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC濃度時ldh表達(dá)受到抑制(P0.05),遠(yuǎn)緣鏈球菌實(shí)驗(yàn)組在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC、1/8MBEC濃度時ldh表達(dá)受到抑制(P0.05),兩種細(xì)菌NaF組ldh表達(dá)差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。④游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌實(shí)驗(yàn)組gtfB、 gtfC、gtfD基因表達(dá)與陰性對照組沒有差異(P0.05)。游離與生物膜生長狀態(tài)變形鏈球菌NaF組對gtfB基因表達(dá)有抑制作用(P0.05)。結(jié)論:伊犁黑蜂蜂膠能夠抑制游離生長狀態(tài)與生物膜生長狀態(tài)下變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌乳酸脫氫酶活性及其編碼基因ldh表達(dá),來抑制細(xì)菌產(chǎn)酸;伊犁黑蜂蜂膠對游離生長狀態(tài)和生物膜生長狀態(tài)變形鏈球菌葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶及其編碼基因沒有作用。伊犁黑蜂蜂很可能是通過抑制產(chǎn)酸代謝途徑乳酸脫氫酶活性及其轉(zhuǎn)錄來抑制變形鏈球菌產(chǎn)酸,從而達(dá)到防齲的效果。
【關(guān)鍵詞】:蜂膠 變形鏈球菌屬 乳酸脫氫酶 葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶 熒光定量PCR
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R781.1
【參考文獻(xiàn)】
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 彭志慶;國產(chǎn)水溶性蜂膠對主要致齲鏈球菌及其耐氟菌株致齲性的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年
,本文編號:914366
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