本文關鍵詞：伊犁黑蜂蜂膠對變形鏈球菌屬及其生物膜代謝影響的實驗研究

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【摘要】：目的：通過比較伊犁黑蜂蜂膠乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis EEP)與氟化鈉對致齲變形鏈球菌屬產酸,產糖代謝關鍵酶乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenaseLDH)與葡萄糖基轉移酶(Glycosyltransferase GTFs)及其相關基因表達的影響來探討其對變形鏈球菌屬代謝影響機制。方法：分別培養(yǎng)游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下生長的變形鏈球菌、遠緣鏈球菌；并以含梯度濃度EEP的腦心浸液培養(yǎng)基(Brian Heart InfusionBHI),50mg/L NaF的BHI培養(yǎng)基,不含藥物的BHI培養(yǎng)基分別作為實驗組,陽性對照組與陰性對照組與不同生長狀態(tài)的目的細菌作用18小時,①通過還原性輔酶Ⅰ氧化法測定乳酸脫氫酶活性。②通過硫酸銨鹽析結合超濾離心法提取GTFs粗酶,蒽酮法測定GTFs活性。③RT-qPCR法測定各組LDH編碼基因ldh表達。④RT-qPCR法測定各組GTFs編碼基因gtfB、gtfC、gtfD表達。結果：①在游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌、遠緣鏈球菌各實驗組和NaF組LDH活性均明顯受到抑制(P0.05)。②在游離狀態(tài)和生物膜狀態(tài)下,EEP組,NaF組變形鏈球菌GTFs活性沒有變化(P0.05)③游離狀態(tài)時,變形鏈球菌,遠緣鏈球菌實驗組組和NaF組ldh表達明顯受到抑制(P0.05)；生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌實驗組在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC濃度時ldh表達受到抑制(P0.05),遠緣鏈球菌實驗組在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC、1/8MBEC濃度時ldh表達受到抑制(P0.05),兩種細菌NaF組ldh表達差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。④游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下,變形鏈球菌實驗組gtfB、 gtfC、gtfD基因表達與陰性對照組沒有差異(P0.05)。游離與生物膜生長狀態(tài)變形鏈球菌NaF組對gtfB基因表達有抑制作用(P0.05)。結論：伊犁黑蜂蜂膠能夠抑制游離生長狀態(tài)與生物膜生長狀態(tài)下變形鏈球菌、遠緣鏈球菌乳酸脫氫酶活性及其編碼基因ldh表達,來抑制細菌產酸；伊犁黑蜂蜂膠對游離生長狀態(tài)和生物膜生長狀態(tài)變形鏈球菌葡萄糖基轉移酶及其編碼基因沒有作用。伊犁黑蜂蜂很可能是通過抑制產酸代謝途徑乳酸脫氫酶活性及其轉錄來抑制變形鏈球菌產酸,從而達到防齲的效果。
【關鍵詞】：蜂膠 變形鏈球菌屬 乳酸脫氫酶 葡萄糖基轉移酶 熒光定量PCR
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R781.1

【參考文獻】

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1 彭志慶;國產水溶性蜂膠對主要致齲鏈球菌及其耐氟菌株致齲性的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

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本文編號：914366