牙周炎是由牙周致病菌引起的常見口腔疾病，導(dǎo)致牙齒支持組織（牙齦、牙周膜、牙槽骨和牙骨質(zhì)）的破壞——牙周袋形成和炎癥進(jìn)行性的附著喪失和牙槽骨吸收。牙周炎分為慢性牙周炎（chronic periodontitis,CP）、侵襲性牙周炎（aggressive periodontitis, AgP）、反映全身疾病的牙周炎（periodontitis asmanifestation of systemic diseases）等多種類型。其中侵襲性牙周炎有家族聚集性，病情進(jìn)展迅速，常導(dǎo)致牙槽骨的迅速吸收破壞，早期出現(xiàn)牙齒松動(dòng)和移位，臨床觀察常見患者的牙周組織破壞程度與局部刺激物的量不成正比。大量研究證實(shí)，侵襲性牙周炎最主要的致病菌是伴放線放線桿菌（Actinobacillusactinomycetemcomitans,Aa），患者的齦下菌斑中分離出伴放線放線桿菌的陽性率可高達(dá)90%~100%。 伴放線放線桿菌是革蘭氏陰性短桿菌，可產(chǎn)生許多毒性因子，降低宿主抵抗力，導(dǎo)致牙槽骨吸收，牙周組織破壞，促使附著喪失，形成牙周袋。內(nèi)毒素是伴放線放線桿菌的細(xì)胞壁組分，對牙周組織有很強(qiáng)的抗原性和毒性，能通過誘導(dǎo)宿主細(xì)胞產(chǎn)生和釋放促炎癥細(xì)胞因子而導(dǎo)致炎癥性的骨喪失，是牙周病非常重要的致病因子。 由于侵襲性牙周炎患者存在與菌斑堆積情況不相符的牙周組織破壞，不少學(xué)者報(bào)告，單純的刮治術(shù)不能消除侵入到牙周組織中的伴放線放線桿菌,殘存的微生物容易重新定植于牙面，使病變復(fù)發(fā)。因此，臨床上主張全身和局部應(yīng)用抗生素作為機(jī)械治療的輔助療法。目前治療侵襲性牙周炎常用的抗生素藥物易產(chǎn)生多種不良反應(yīng)。并且近年來由于抗生素的濫用而導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，日益威脅著人們身體健康，因此越來越多的學(xué)者致力于研究抑制牙周病原菌的新型藥物。 乳鐵蛋白（Lactoferrin, Lf）是哺乳動(dòng)物體內(nèi)一種分布廣、功能多的鐵結(jié)合糖蛋白，除了可作為人體營養(yǎng)來源，補(bǔ)充鐵和氨基酸，還具有多種生物學(xué)功能。大量研究證實(shí)乳鐵蛋白對多種致病菌具有抑制作用，有廣譜性，且有良好的生物安全性，無毒副作用，長期使用也不會使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。 目的:通過體外觀察牛乳鐵蛋白對伴放線放線桿菌生長及內(nèi)毒素產(chǎn)生的抑制作用，初步探討牛乳鐵蛋白對伴放線放線桿菌及其產(chǎn)生內(nèi)毒素的抑制作用機(jī)制，為其作為牙周炎臨床抗菌藥物提供理論依據(jù)。 方法:采用液體二倍稀釋法，觀察牛乳鐵蛋白在體外厭氧環(huán)境下對伴放線放線桿菌的抑制作用，并測定最小抑菌濃度（minimal inhibitionconcentration,MIC）。采用顯色基質(zhì)鱟實(shí)驗(yàn)法檢測不同濃度牛乳鐵蛋白（160mg/ml、80mg/ml、40mg/ml、20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml）作用下的伴放線放線桿菌菌液中的內(nèi)毒素量，單純細(xì)菌組作陽性對照，并將所得數(shù)據(jù)通過SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果:牛乳鐵蛋白對伴放線放線桿菌的最小抑菌濃度（MIC）為5mg/ml，在此濃度下細(xì)菌的生長明顯受到抑制。與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)毒素含量明顯減少（P0.05）。各實(shí)驗(yàn)組間相比，內(nèi)毒素含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05），濃度越高，內(nèi)毒素含量越低。 結(jié)論:牛乳鐵蛋白能有效地抑制伴放線放線桿菌的生長，同時(shí)對伴放線放線桿菌主要的致病因子——內(nèi)毒素有良好的抑制作用。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R781.42
【部分圖文】：

將復(fù)蘇的菌株在 BHI 固體培養(yǎng)基中于 37℃恒溫箱培養(yǎng) 48h，革蘭涂片染色鑒定為 Aa 純培養(yǎng)物。當(dāng)牛乳鐵蛋白濃度為 5mg/ml 時(shí)，革蘭染色未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌，肉眼觀察培養(yǎng)后的液體培養(yǎng)基澄清無渾濁，無沉淀，認(rèn)為無細(xì)菌生長（見圖3.1A），牛乳鐵蛋白濃度為 2.5mg/ml 時(shí)，液體培養(yǎng)基渾濁，不澄清，認(rèn)為有細(xì)菌生長（見圖 3.1B）。而且將液體培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接種于 BHI 固體培養(yǎng)基中于 37℃恒溫箱中厭氧培養(yǎng) 48h 后，也是在乳鐵蛋白最低濃度為 5mg/ml 時(shí)無細(xì)菌生長（圖 3.2），說明Aa 數(shù)量為 1 x 107CFU/ml 時(shí)，牛乳鐵蛋白對 Aa 的 MIC 為 5mg/ml。（見表 3.1）

不同濃度bLf對Aa生長的影響

表 4.1 鱟試劑標(biāo)準(zhǔn)曲線Tab4.1 TAL reagent on endotoxin detection value of standard solution內(nèi)毒素濃度 測量值 1 測量值 2 測量值 3 平均值1 1.393 1.372 1.381 1.3820.5 0.673 0.665 0.669 0.6690.25 0.352 0.359 0.348 0.3530.1 0.135 0.140 0.142 0.1390 0.028 0.028 0.028 0.028
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 張迪亞;李盛來;陳莉麗;;伴放線放線桿菌與牙周病相關(guān)細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年02期

2 吳紅崑,周學(xué)東,莫安春,譚紅,李繼遙;根周細(xì)菌對膠原包被羥磷灰石粘附的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2002年04期

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 王中強(qiáng);天然乳鐵蛋白和重組乳鐵蛋白的體內(nèi)、體外抗菌效果及機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2004年

本文編號：2893393