本文關(guān)鍵詞：MT01對Pg感染的成骨細(xì)胞MG63特異性成骨相關(guān)因子表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 特定序列寡核苷酸MT01 牙齦卟啉單胞菌 成骨相關(guān)因子 人成骨樣細(xì)胞MG63

【摘要】：牙周炎被認(rèn)為是一種由于局部免疫失衡導(dǎo)致的牙周組織破壞性疾病,疾病的進(jìn)展及嚴(yán)重程度與宿主自身的免疫性炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)通過逃避宿主對細(xì)菌的先天性免疫反應(yīng)、分泌毒力因子等對牙周組織產(chǎn)生破壞作用,是目前公認(rèn)的牙周致病菌。體外研究表明,Pg能夠入侵成骨細(xì)胞抑制成骨細(xì)胞的成熟和礦化,降低牙槽骨骨形成,導(dǎo)致牙槽骨吸收。因此,抵御Pg對成骨細(xì)胞的影響,對治療牙周炎具有臨床意義。MT01是依據(jù)人線粒體DNA序列設(shè)計的免疫抑制性寡脫氧核苷酸,可抑制由Toll樣受體9(Toll like receptor 9,TLR9)激活引起的機(jī)體固有免疫應(yīng)答反應(yīng)。我們在前期研究中證實(shí),MT01能夠減少實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎導(dǎo)致的牙槽骨吸收;體外研究表明,MT01可上調(diào)人成骨樣細(xì)胞MG63內(nèi)Runx2、SP7等成骨相關(guān)因子的基因表達(dá)水平,促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。MT01作為一種免疫抑制劑,是否對感染狀態(tài)中的成骨細(xì)胞的成骨分化具有影響作用,目前尚未經(jīng)證實(shí)。本研究擬通過檢測MT01干預(yù)下,Pg感染人成骨樣細(xì)胞MG63后特異性成骨相關(guān)因子Runx2及SP7的m RNA表達(dá)水平,探討MT01對感染狀態(tài)下的成骨細(xì)胞成骨分化作用是否具有影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在有無Pg感染的狀態(tài)下,MT01均可上調(diào)成骨細(xì)胞MG63細(xì)胞內(nèi)特異性成骨相關(guān)因子Runx2,SP7m RNA的表達(dá),說明在牙周致病菌感染的條件下,MT01依然可以促進(jìn)成骨細(xì)胞的成骨向分化。方法:選取生長狀態(tài)穩(wěn)定的人成骨樣細(xì)胞MG63接種于6孔板,分別加入質(zhì)量濃度1μg·m L-1的特定序列寡核苷酸MT01和等體積PBS,共孵育3 h后,加入感染復(fù)數(shù)MOI=100∶1的Pg菌懸液(對照組加等體積PBS)。實(shí)驗(yàn)分為:MT01+Pg、MT01、Pg和空白對照4組,Real-time PCR檢測2、4、6、8、12、24 h特異性成骨相關(guān)因子Runx2,SP7 m RNA的表達(dá)。結(jié)果:在有無Pg感染的狀態(tài)下,MT01均可上調(diào)成骨細(xì)胞MG63細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)因子Runx2,SP7 m RNA的表達(dá),但在不同時間點(diǎn),MT01調(diào)控Runx2,SP7 m RNA表達(dá)上調(diào)的能力存在差異。結(jié)論:MT01可以促進(jìn)牙周致病菌感染下的成骨細(xì)胞的成骨向分化。
【關(guān)鍵詞】：特定序列寡核苷酸MT01 牙齦卟啉單胞菌 成骨相關(guān)因子 人成骨樣細(xì)胞MG63
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781.42
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮略詞表11-12
• 第1章 緒論12-14
• 第2章 文獻(xiàn)綜述14-20
• 2.1 Pg與牙周炎關(guān)系的研究進(jìn)展14-17
• 2.1.1 Pg概述14-15
• 2.1.2 Pg與牙周炎的關(guān)系15-17
• 2.2 MT01在牙周炎方向的研究進(jìn)展17-20
• 2.2.1 MT01概述17-18
• 2.2.2 MT01在牙周炎方向的相關(guān)研究18-20
• 第3章 實(shí)驗(yàn)研究20-28
• 3.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑20-22
• 3.1.1 主要材料和試劑20
• 3.1.2 主要儀器和設(shè)備20-21
• 3.1.3 試劑配制21-22
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法22-28
• 3.2.1 人成骨樣細(xì)胞MG63的培養(yǎng)22
• 3.2.2 牙齦卟啉單胞菌Pg的培養(yǎng)22
• 3.2.3 實(shí)驗(yàn)分組22-23
• 3.2.4 提取細(xì)胞總RNA23-24
• 3.2.5 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（RT）24-25
• 3.2.6 實(shí)時定量PCR檢測特異性成骨相關(guān)因子的表達(dá)25-28
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-32
• 4.1 牙齦卟啉單胞菌的培養(yǎng)28
• 4.2 人成骨樣細(xì)胞MG63的形態(tài)學(xué)觀察28-29
• 4.3 無感染狀態(tài)下，MT01上調(diào)成骨細(xì)胞MG63內(nèi)Runx2、SP7 mRNA的表達(dá)29-30
• 4.4 在牙周致病菌Pg感染狀態(tài)下，，MT01上調(diào)成骨細(xì)胞MG63細(xì)胞內(nèi)Runx2、SP7 mRNA的表達(dá)30-32
• 第5章 討論32-37
• 5.1 特異性成骨相關(guān)因子33-34
• 5.2 MT01對Pg感染的成骨細(xì)胞MG63特異性成骨相關(guān)因子表達(dá)的影響34-37
• 第6章 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-47
• 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果47-50
• 作者簡介47
• 參與的課題47
• 發(fā)表文章47-48
• 導(dǎo)師簡介48-50
• 致謝50-51

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