發(fā)布時(shí)間：2024-03-09 01:28

　　[背景與目的]頜骨缺損的修復(fù)問題一直是臨床上難以解決的問題,構(gòu)建組織工程骨用于缺損部位的移植修復(fù)是一項(xiàng)重要的治療方式。組織工程骨構(gòu)建方法多用單純種子細(xì)胞接種,雖然能夠成骨,但存在諸多弊端,如組織工程骨血管化緩慢,新骨生長遲緩等問題。因此如何在構(gòu)建組織工程化骨組織的同時(shí),促進(jìn)小血管的長入以及細(xì)胞與支架材料復(fù)合物內(nèi)血供的重建就成為骨組織工程由基礎(chǔ)向臨床應(yīng)用的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)。目前多種細(xì)胞的聯(lián)合培養(yǎng)為我們解決這一問題提供了重要的方向。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)是一組具有類似結(jié)構(gòu)的高度保守的功能蛋白,它們能在體內(nèi)誘導(dǎo)骨和軟骨的形成,并且參與了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展,現(xiàn)研究發(fā)現(xiàn),它們還參與調(diào)節(jié)許多細(xì)胞的增殖、分化和凋亡的生物學(xué)過程。我們前期研究發(fā)現(xiàn)BMP-2因子是促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)體系中種子細(xì)胞的增殖和成骨分化的關(guān)鍵因素之一。但BMP-2在聯(lián)合培養(yǎng)體系中對(duì)BMSCs基因表達(dá)起什么影響作用還不完全清楚,其中確切機(jī)制還待進(jìn)一步研究。近年來,RNA干擾技術(shù)成為基因功能研究強(qiáng)有力的工具,本研究先將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),利用RNAi技術(shù)封閉該細(xì)胞BMP-2基因的表達(dá),檢測(cè)BMP-2蛋白表...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2Fig.2illustrative質(zhì)粒構(gòu)建模式圖

CMV入/BGHSV40Ori圖2Fig.2illustrative質(zhì)粒構(gòu)建模式圖PietureofPlsmideonstruetion在正義鏈和反義鏈之間加上了7個(gè)寡核昔酸形成的發(fā)卡結(jié)構(gòu)，并在其兩端分別添加BamHI和Eco租酶切位點(diǎn)，以TTTTTT作為終止信號(hào)，確保轉(zhuǎn)....

圖81號(hào)質(zhì)粒測(cè)序圖

圖81號(hào)質(zhì)粒測(cè)序圖Fig.8No.1PlasmidsequencingPieture:卯3的31032033右劉3力3岡3一0330T丁CC六人人久入人C人人C人GC憶互人CTCG人人入T丁C丁CTTC久人人丁萬TCG人G丁丁GGC萬C丁芍GCGG人TCCC萬腸C萬C丁C人丁人C....

圖92號(hào)質(zhì)粒測(cè)序圖

圖7內(nèi)皮細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)的BMP一2蛋白顯影Fig.7BMP一2Protein’5develoPingofhUVECsatdifferenttimes(四)、構(gòu)建四條質(zhì)粒質(zhì)粒的測(cè)序結(jié)果圖2叨3叨3103203犯3叨3刃3的3拍TCC人人人人人人C人G人TCC人人6人T6C丁TT人C....

圖13一14質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效果圖

圖13一14質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效果圖F19.13一14effieieneyofPlasmid’5transfeetion優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件的試驗(yàn)結(jié)果通過脂質(zhì)體劑量、質(zhì)粒DNA劑量和轉(zhuǎn)染時(shí)間的不同，觀察到轉(zhuǎn)染效率的不同，結(jié)果顯示質(zhì)粒3ul，脂質(zhì)體10ul時(shí)，轉(zhuǎn)染6小時(shí)的轉(zhuǎn)染效果最理想，如圖:

本文編號(hào)：3922692