發(fā)布時(shí)間：2022-02-11 17:19

　　目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外研究人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞,觀察吉西他濱聯(lián)合放療對(duì)Tca8113細(xì)胞增殖抑制、凋亡及遷移能力的影響,從而探究吉西他濱對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞放射敏感性的影響及其可能的相關(guān)機(jī)制,為舌癌的治療提供理論依據(jù)。方法體外培養(yǎng)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞,用不同濃度吉西他濱（0、0.001、0.01、0.02、0.03、0.1、1μmol/L）處理Tca8113細(xì)胞24h,測(cè)定細(xì)胞增殖活性并選定最小起效濃度后,設(shè)置不同照射劑量（0、2、4、6Gy）與吉西他濱聯(lián)合作用于Tca8113細(xì)胞,處理24h,MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)照射劑量。將后續(xù)實(shí)驗(yàn)分為四組:空白對(duì)照組、吉西他濱組、單純放療組以及吉西他濱聯(lián)合放療組。平板克隆形成實(shí)驗(yàn)研究各組細(xì)胞集落形成能力;Hoechst33342染色法通過(guò)倒置熒光顯微鏡下觀察各組Tca8113細(xì)胞形態(tài)變化;流式細(xì)胞術(shù)觀察吉西他濱對(duì)放療誘導(dǎo)Tca8113細(xì)胞凋亡的影響;Western blot檢測(cè)吉西他濱聯(lián)合放療對(duì)Tca8113細(xì)胞中bcl-2、bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表達(dá)的影響... 

【文章來(lái)源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Tca8113細(xì)胞在不同濃度時(shí)的細(xì)胞存活率曲線圖

白對(duì)照組相比，4Gy組細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，細(xì)胞存活率降低（P<0.05），而吉西他濱+4Gy組細(xì)胞存活率低于4Gy組（P<0.05）。吉西他濱提高了放療對(duì)Tca8113細(xì)胞的增殖抑制能力，增強(qiáng)了放射的敏感性（表1、圖2）。選擇4Gy為后續(xù)實(shí)驗(yàn)照射劑量。圖1 Tca8113細(xì)胞在不同濃度時(shí)的細(xì)胞存活率曲線圖三、克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)吉西他濱聯(lián)合放療對(duì)Tca8113細(xì)胞集落形成的影響將細(xì)胞分為四組，吉西他濱組、單純放療組、吉西他濱聯(lián)合放療組細(xì)胞克隆數(shù)量和集落形成的大小明顯小于空白對(duì)照組，吉西他濱聯(lián)合放療組的克隆形成數(shù)及克隆形成率顯著低于其他組（P<0.05）。放療組的克隆形成率(15.5±1.10)% vs吉西他濱聯(lián)合放療組（靜止期），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示吉西他濱與放療聯(lián)合時(shí)顯著減弱了 Tca8113 細(xì)胞的集落形成能力，進(jìn)一步表明吉西他濱可提高放療敏感性（圖 3、圖 4）。四、Hoechst33342 染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡Hoechst33342 染色結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞核發(fā)生團(tuán)塊二、MTT檢測(cè)吉西他濱聯(lián)合放療對(duì)Tca8113細(xì)胞增殖的影響

各組Tca8113細(xì)胞克隆形成結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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