骨的生理性改建是口腔正畸牙齒移動的基礎(chǔ),因而骨的生長與代謝直接或間接地影響正畸的療效。口腔正畸過程中牙齒在骨組織中的移動主要是通過骨的形成和吸收來完成的。雌激素作為調(diào)控骨改建的重要條件之一是通過雌激素受體完成的,然而雌激素受體β是否參與介導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖與分化,至今仍有待于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)論證。本研究采用siRNA技特異性術(shù)對雌激素受體β進(jìn)行干涉,并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入分離培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞中,觀察其在成骨和成脂肪分化平衡的作用。研究內(nèi)容如下:1.SiRNA ERβ特異性表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定根據(jù)siRNA的設(shè)計(jì)原則,以ERβ基因的RNA序列為靶序列,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了三對特異性siRNA干擾序列,經(jīng)DNA測序,結(jié)果顯示所插入序列與合成序列完全相同,證明載體構(gòu)建正確。2.不同年齡骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨與成脂分化平衡的研究采用全骨髓自然貼壁篩選法從不同年齡的雌性SD大鼠股骨中分離、純化培養(yǎng)出BMSCs,并通過倒置顯微鏡觀察、MTT細(xì)胞生長曲線等生物學(xué)行為觀察,初步判斷其活力和均一性。再經(jīng)成骨、成脂等多向分化誘導(dǎo),獲得了茜素紅染色的類成骨細(xì)胞和油紅-O染色的類脂肪細(xì)胞。采用圖像分析軟件進(jìn)行分析,計(jì)算出礦化...

【文章來源】： 中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

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縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文獻(xiàn)回顧
正文
    實(shí)驗(yàn)一 ER-Β特異性SIRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒定
        1 材料和方法
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    實(shí)驗(yàn)二 不同年齡大鼠BMSCS成骨與成脂分化平衡的研究
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    實(shí)驗(yàn)三 ERΒ與大鼠BMSC成脂分化相關(guān)性研究
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    實(shí)驗(yàn)四 ER-Β特異性SIRNA對RBMSC成骨與成脂肪分化影響的研究
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個人簡歷
研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化為胰島樣細(xì)胞團(tuán)的研究 [J]. 李艷華,白慈賢,謝超,陳琳,裴雪濤.  自然科學(xué)進(jìn)展. 2003(06)
[2]人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法的建立 [J]. 劉曉丹,郭子寬,李秀森,張雙喜,毛寧.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2000(04)
[3]ERα、ERβ的研究進(jìn)展 [J]. 方勤.  國外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊. 2000(04)



本文編號：3479309