研究目的:通過體內(nèi)觀測(cè)GATA4條件性敲基因小鼠表型,體外提取人根尖牙乳頭干細(xì)胞（SCAPs）進(jìn)行培養(yǎng)來探究GATA4在牙齒發(fā)育過程中的作用。研究方法:利用基于Cre/Lox P系統(tǒng)的條件性基因敲除技術(shù),建立了神經(jīng)嵴細(xì)胞特異性敲除GATA4基因的小鼠模型。使用Micro-CT和蘇木素-伊紅（HE）染色對(duì)比觀測(cè)出生前、出生后的GATA4^fl/fl及Wnt1-Cre;GATA4^fl/fl的小鼠牙齒發(fā)育狀況;免疫組化用來觀測(cè)GATA4^fl/fl及Wnt1-Cre;GATA4^fl/fl小鼠牙齒發(fā)育過程中GATA4和各項(xiàng)成骨成牙指標(biāo)（RUNX2、OSX、OPN、OCN、BMP4）的表達(dá)情況,以及根尖牙乳頭處細(xì)胞的增殖變化。體外通過提取SCAPs,并加以鑒定,繼而以慢病毒為載體,通過RNA干擾的方法將SCAPs中的GATA4沉默,驗(yàn)證敲低效率;CCK8實(shí)驗(yàn)觀測(cè)細(xì)胞增殖能力;劃痕實(shí)驗(yàn)觀測(cè)細(xì)胞遷徙能力;對(duì)沉默GATA4的SCAPs進(jìn)行牙向/骨向誘導(dǎo),堿性磷酸酶（ALP）染色和活性檢測(cè)以及茜素紅染色（ARS）和鈣離子... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

21、P56dWnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠出現(xiàn)短根畸形

圖 2. E15.5 天 Wnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠牙胚發(fā)育缺陷3.3 GATA4 在小鼠牙齒發(fā)育過程中的表達(dá)胚胎 14.5、15.5、17.5 天和出生后 14 天野生型小鼠牙齒石蠟切片做免疫組化染色，顯示 GATA4 廣泛表達(dá)于成釉細(xì)胞、牙間充質(zhì)細(xì)胞以及成牙本質(zhì)細(xì)胞中（圖 3）。

2. E15.5 天 Wnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠牙胚發(fā)育缺鼠牙齒發(fā)育過程中的表達(dá)15.5、17.5 天和出生后 14 天野生型小鼠牙齒石ATA4 廣泛表達(dá)于成釉細(xì)胞、牙間充質(zhì)細(xì)胞以及


本文編號(hào)：3411001