目的:本研究目的是通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn),探究負(fù)載骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2）的殼聚糖溫敏水凝膠對(duì)于種植體周圍骨缺損的修復(fù)效果,以期為該類型骨修復(fù)材料的基礎(chǔ)研究及臨床應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。方法:1.水凝膠的配制及成分配比的確定:通過(guò)物理交聯(lián)法制備四種不同濃度配比的殼聚糖（Chitosan,CS）溫敏水凝膠體系。利用倒置法測(cè)定37℃時(shí)各配比情況下的凝固時(shí)間,并確定適宜臨床手術(shù)的水凝膠體系成分配比。2.負(fù)載BMP-2的殼聚糖溫敏水凝膠對(duì)種植體周圍骨缺損的修復(fù)效果體內(nèi)研究:隨機(jī)選取新西蘭大白兔6只,采取自身對(duì)照的方式,在兔子一側(cè)股骨近心端制備兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)種植窩洞,并在窩洞頂端的內(nèi)緣制造直徑約3mm的骨缺損區(qū)。先于種植窩內(nèi)植入型號(hào)為4.1*10mm的Straumann種植體,然后在骨缺損區(qū)注射藥品。根據(jù)缺損區(qū)注射的藥品不同分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組:其中種植體+單純CS溫敏水凝膠為對(duì)照組,種植體+負(fù)載BMP-2的CS溫敏水凝膠為實(shí)驗(yàn)組;兔子另一側(cè)股骨做相同處理,共用植體24顆。選取3周,6周,9周為觀察時(shí)間點(diǎn);每一時(shí)間點(diǎn)每組分別處死2只兔子,進(jìn)行大體標(biāo)本觀察... 

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【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

凝膠體系配制過(guò)程:a為凝膠凝固之前示意圖，

第3章BMP-2/殼聚糖溫敏水凝膠修復(fù)種植體周圍骨缺損體內(nèi)實(shí)驗(yàn)11備期間均用4℃無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行冷卻。在近心端的窩洞植入Straumann種植體，缺損區(qū)注射負(fù)載BMP-2的CS溫敏水凝膠；遠(yuǎn)心端的窩洞植入Straumann種植體，缺損區(qū)注射單純CS溫敏水凝膠，待兩者水凝膠基本凝固后，利用可吸收縫合線逐層縫合骨膜，肌肉，筋膜及皮膚，嚴(yán)密關(guān)閉創(chuàng)口（圖3.1）。術(shù)畢，創(chuàng)口涂抹紅霉素軟膏，耳緣靜脈注射點(diǎn)涂布碘伏消毒液，待實(shí)驗(yàn)兔蘇醒后歸籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)方式與術(shù)前相同。術(shù)后3日，每日一次肌注慶大霉素（8萬(wàn)單位）以預(yù)防感染，創(chuàng)口及耳緣以紅霉素軟膏涂布。abc圖3.1建立動(dòng)物模型：a為手術(shù)前消毒完成圖，b為植體植入及水凝膠藥物注射過(guò)程圖，c為術(shù)后創(chuàng)口縫合完成圖3.2.2帶種植體組織塊的獲取，固定及脫鈣（1）組織塊獲取及固定：分別于術(shù)后3周，6周，9周各處死2只實(shí)驗(yàn)兔，完整暴露股骨上段后去除骨面軟組織，截取種植體周圍5mm范圍內(nèi)的硬組織作為組織塊標(biāo)本。將所取組織塊立即放入事先配置好的10%中性福爾馬林固定液中，時(shí)間為1周。（2）組織塊的脫鈣：分別量取等量的10%中性福爾馬林溶液及10%甲酸溶液均勻混合，配置成10%甲酸-中性福爾馬林脫鈣液待用。將以上固定一周的組織塊流動(dòng)水漂洗5個(gè)小時(shí)，按照脫鈣液：組織塊=30：1的體積比置入脫鈣液內(nèi)進(jìn)行脫鈣。每?jī)商旄鼡Q脫鈣液一次，當(dāng)針刺組織塊的硬組織時(shí)阻力明顯減小即表示脫鈣完成。進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋，切片。

第3章BMP-2/殼聚糖溫敏水凝膠修復(fù)種植體周圍骨缺損體內(nèi)實(shí)驗(yàn)14（5）圖像分析及數(shù)據(jù)處理：切片進(jìn)行HE染色后，各組模型隨機(jī)選取切片3張，對(duì)人造骨缺損區(qū)的成骨情況進(jìn)行鏡下觀察，通過(guò)ImageProPlus6.0軟件測(cè)量分析，計(jì)算新生骨面積百分比（新生骨小梁面積/人造骨缺損面積100%）。結(jié)果利用SPSS11.5及Prism統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，利用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)同一時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的新生骨面積百分比進(jìn)行組間比較，當(dāng)P<0.01時(shí)認(rèn)為差異顯著且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1動(dòng)物大體標(biāo)本觀察結(jié)果所有實(shí)驗(yàn)兔均成功建立缺損股骨-種植體-凝膠材料模型，術(shù)后15分鐘兔子逐漸蘇醒。術(shù)后48小時(shí)內(nèi)，兔子精神稍差，食欲欠佳，飲水尚可，活動(dòng)減少。3天后精神恢復(fù)，正常采食飲水，活動(dòng)尚可。7天后縫合線逐漸脫落，創(chuàng)口無(wú)紅腫及滲出現(xiàn)象，創(chuàng)口愈合較好。分別獲取各觀察點(diǎn)組織塊后可見(jiàn)：3周時(shí)，無(wú)論實(shí)驗(yàn)組還是對(duì)照組，骨缺損區(qū)仍有部分凝膠存在，質(zhì)軟，可見(jiàn)少量新生骨形成，種植體穩(wěn)定性良好；6周時(shí)，原人造骨缺損區(qū)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均可見(jiàn)新生骨組織，實(shí)驗(yàn)組新生骨組織較對(duì)照組多，新生骨組織與種植體間無(wú)明顯間隙，種植體穩(wěn)定性較好；9周時(shí)，骨缺損區(qū)凝膠完全吸收，缺損區(qū)基本被新生組織取代。實(shí)驗(yàn)組新生骨組織明顯多于對(duì)照組，部分實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)新生骨組織將種植體包裹，可與植體形成骨性結(jié)合（圖3.2）。abc圖3.2大體標(biāo)本示意圖:a與b為標(biāo)本獲取前動(dòng)物大體觀察圖，c為標(biāo)本脫鈣后俯視圖

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3375313