目的:根尖牙乳頭干細(xì)胞（stem cells from apical papilla,SCAP）來(lái)源于發(fā)育中的根尖牙乳頭組織,具有優(yōu)越的自我更新、多向分化及免疫調(diào)節(jié)性能。本課題組前期在體外構(gòu)建SCAP與CD4+T細(xì)胞transwell共培養(yǎng)體系,發(fā)現(xiàn)SCAP可上調(diào)CD4+T細(xì)胞叉狀頭轉(zhuǎn)錄因子3（forkhead box protein-3,Foxp3）的表達(dá)水平,促使其向調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells,Tregs）轉(zhuǎn)化。Tregs是一類CD4+CD25+Foxp3+T淋巴細(xì)胞亞群,可通過(guò)抑制過(guò)激的免疫反應(yīng)改善宿主局部免疫微環(huán)境,促進(jìn)損傷組織的修復(fù)與再生。Foxp3是Tregs發(fā)育和成熟的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Tregs內(nèi)Foxp3位點(diǎn)低甲基化狀態(tài)是維持Foxp3穩(wěn)定表達(dá)及Tregs獲得完整免疫抑制表型的必要條件。因此,本課題擬探究SCAP在促進(jìn)CD4+T細(xì)胞向Tregs轉(zhuǎn)化過(guò)程中,對(duì)CD4+T細(xì)胞Foxp3位點(diǎn)甲基化水平,及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNA methyltransferase 1,DNMT1）和去甲基化酶10-11易位蛋白（ten-eleven tra... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SCAP原代培養(yǎng)與鑒定（A）原代培養(yǎng)SCAP7天后可見(jiàn)細(xì)胞克隆集落形成；（B）細(xì)胞生長(zhǎng)匯合至90%時(shí)，呈渦旋狀

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15排列；（C）流式細(xì)胞術(shù)示SCAP陽(yáng)性表達(dá)CD105、CD90、CD44、CD29，而不表達(dá)CD45、CD34；（D）SCAP成骨誘導(dǎo)3周后，茜素紅S染色見(jiàn)礦化結(jié)節(jié)形成；（E）SCAP成脂向誘導(dǎo)4周后，油紅O染色示脂滴形成。誤差線：x±s。3.2小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞純化與激活從小鼠脾臟提取T淋巴細(xì)胞，免疫磁珠分選后獲得CD4+T細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)示CD4+T細(xì)胞純度達(dá)97.27±2.30（%）（圖2A）；CD4+T細(xì)胞激活前體積較小，呈圓球狀，加入CD3、CD28抗體激活后細(xì)胞體積明顯變大（圖2B）。圖2CD4+T細(xì)胞純化與激活（A）免疫磁珠分選后CD4+T細(xì)胞純度達(dá)97.27±2.30（%）；（B）CD4+T細(xì)胞激活48h后體積明顯變大。3.3SCAP對(duì)CD4+T細(xì)胞增殖無(wú)明顯作用將CD4+T細(xì)胞與SCAP通過(guò)transwell共培養(yǎng)72h后，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組CD4+T細(xì)胞的增殖水平，對(duì)照組（CD4+T細(xì)胞）中CD4+T細(xì)胞增殖率為7.72±1.69（%），共培養(yǎng)組（SCAP+CD4+T細(xì)胞）為9.09±1.89（%）（圖3），兩組細(xì)胞間的增殖水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=1.32,P>0.05）。

SCAP對(duì)CD4+T細(xì)胞增殖水平的影響


本文編號(hào)：3267438