目的:根尖牙乳頭干細胞（stem cells from apical papilla,SCAP）來源于發(fā)育中的根尖牙乳頭組織,具有優(yōu)越的自我更新、多向分化及免疫調(diào)節(jié)性能。本課題組前期在體外構(gòu)建SCAP與CD4+T細胞transwell共培養(yǎng)體系,發(fā)現(xiàn)SCAP可上調(diào)CD4+T細胞叉狀頭轉(zhuǎn)錄因子3（forkhead box protein-3,Foxp3）的表達水平,促使其向調(diào)節(jié)性T細胞（regulatory T cells,Tregs）轉(zhuǎn)化。Tregs是一類CD4+CD25+Foxp3+T淋巴細胞亞群,可通過抑制過激的免疫反應(yīng)改善宿主局部免疫微環(huán)境,促進損傷組織的修復(fù)與再生。Foxp3是Tregs發(fā)育和成熟的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。近來研究發(fā)現(xiàn)Tregs內(nèi)Foxp3位點低甲基化狀態(tài)是維持Foxp3穩(wěn)定表達及Tregs獲得完整免疫抑制表型的必要條件。因此,本課題擬探究SCAP在促進CD4+T細胞向Tregs轉(zhuǎn)化過程中,對CD4+T細胞Foxp3位點甲基化水平,及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNA methyltransferase 1,DNMT1）和去甲基化酶10-11易位蛋白（ten-eleven tra... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SCAP原代培養(yǎng)與鑒定（A）原代培養(yǎng)SCAP7天后可見細胞克隆集落形成；（B）細胞生長匯合至90%時，呈渦旋狀

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15排列；（C）流式細胞術(shù)示SCAP陽性表達CD105、CD90、CD44、CD29，而不表達CD45、CD34；（D）SCAP成骨誘導(dǎo)3周后，茜素紅S染色見礦化結(jié)節(jié)形成；（E）SCAP成脂向誘導(dǎo)4周后，油紅O染色示脂滴形成。誤差線：x±s。3.2小鼠脾臟CD4+T細胞純化與激活從小鼠脾臟提取T淋巴細胞，免疫磁珠分選后獲得CD4+T細胞，流式細胞術(shù)示CD4+T細胞純度達97.27±2.30（%）（圖2A）；CD4+T細胞激活前體積較小，呈圓球狀，加入CD3、CD28抗體激活后細胞體積明顯變大（圖2B）。圖2CD4+T細胞純化與激活（A）免疫磁珠分選后CD4+T細胞純度達97.27±2.30（%）；（B）CD4+T細胞激活48h后體積明顯變大。3.3SCAP對CD4+T細胞增殖無明顯作用將CD4+T細胞與SCAP通過transwell共培養(yǎng)72h后，利用流式細胞術(shù)檢測各組CD4+T細胞的增殖水平，對照組（CD4+T細胞）中CD4+T細胞增殖率為7.72±1.69（%），共培養(yǎng)組（SCAP+CD4+T細胞）為9.09±1.89（%）（圖3），兩組細胞間的增殖水平無統(tǒng)計學(xué)差異（t=1.32,P>0.05）。

SCAP對CD4+T細胞增殖水平的影響


本文編號：3267438