目的 透明質(zhì)酸鈉行關(guān)節(jié)腔注射的彈性補充療法是臨床上常見的微創(chuàng)治療的手段,本實驗以狗為研究對象,通過一次性行關(guān)節(jié)腔注射膠原酶成功構(gòu)建狗的顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的模型,然后行透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)腔注射治療,觀察髁突軟骨的組織病理學變化,進一步探討透明質(zhì)酸鈉對顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的治療作用,為臨床研究工作提供依據(jù)。 方法 將6只成年期雜種狗,體重為15-18kg,無明顯口頜系統(tǒng)疾病,速眠新Ⅱ號(軍需大學獸醫(yī)研究所)麻醉起效后,在每只狗的左側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)上強一次性注射1%膠原酶1ml (400U/mg)。于注射后1、2、3、4、5、6周分別處死并完整取出髁突及關(guān)節(jié)盤、放入10%中性福爾馬林溶液中固定24小時。標本放置于10%EDTA中性福爾馬林液中脫鈣2周(每2天更換一次脫鈣液),至大頭針可以輕易刺透組織為止表明已經(jīng)基本脫鈣完畢。包埋后制作組織切片,進行HE染色和番紅O染色,觀察髁突軟骨的組織學變化,從而構(gòu)建TMJOA模型；另選6只相同規(guī)格雜種狗,在構(gòu)建雙側(cè)TMJOA模型后,于1、2、3周,麻醉狀態(tài)下于左側(cè)TMJ上腔注射醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉0.5ml (10mg/ml,分子量：84000),右側(cè)注射生理鹽水0.5ml作對照,適應(yīng)性飼養(yǎng)4周后,處死并雙側(cè)TMJ取材、固定、脫鈣、包埋制作組織切片,進行HE和番紅O染色,對比觀察雙側(cè)髁突軟骨組織學變化,并按改良Mankin骨關(guān)節(jié)病組織學評價系統(tǒng)記分,采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。 結(jié)果 動物模型組的6只狗在注射膠原酶后1、2、3、4、5、6周依次出現(xiàn)了表層膠原纖維的水解,蛋白多糖的丟失,軟骨表層粗糙不齊,并逐漸出現(xiàn)了關(guān)節(jié)軟骨的剝脫、崩解外,形成軟骨裂隙,部分區(qū)域骨質(zhì)暴露,紋理粗糙,出現(xiàn)骨質(zhì)增生,形成骨贅,成功建立了顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的動物模型。 治療組的6只狗在建立雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病后,經(jīng)3周的透明質(zhì)酸鈉治療后,發(fā)現(xiàn)注射透明質(zhì)酸鈉側(cè)關(guān)節(jié)病變較對側(cè)輕,軟骨層次較為清晰,病變多數(shù)局限于表層；生理鹽水側(cè)關(guān)節(jié)病變較重,軟骨表面不規(guī)整,纖維軟骨層次紊亂不清,纖維軟骨連續(xù)性中斷,部分區(qū)域纖維軟骨變性脫落已被排列雜亂的纖維組織取代；部分標本出現(xiàn)骨裂、骨贅。透明質(zhì)酸鈉側(cè)評分為：3.17±0.75為(n=6),生理鹽水側(cè)評分為：7.83±1.67(n=6),用獨立樣本資料t檢驗,顯示兩側(cè)關(guān)節(jié)病變差異有顯著性(P0.01)。番紅0染色對比顯示,透明質(zhì)酸鈉側(cè)關(guān)節(jié)軟骨染色較為均勻,顏色較深；生理鹽水側(cè)關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)中出現(xiàn)未染色區(qū)域。 結(jié)論 1、通過一次性關(guān)節(jié)腔注射膠原酶,可成功建立狗的TMJOA模型,病變從表層膠原纖維水解形成裂隙,軟骨表層粗糙不齊逐漸發(fā)展到關(guān)節(jié)軟骨的剝脫、崩解外,部分區(qū)域骨質(zhì)暴露,紋理粗糙,出現(xiàn)骨質(zhì)增生,形成骨贅。整個病變過程伴有軟骨基質(zhì)中蛋白多糖的逐漸丟失。本建模方法相對于手術(shù)方法操作簡單,病變典型,可重復(fù)性一致性較好,可很好的復(fù)制骨關(guān)節(jié)病的整個病變發(fā)展過程,是較為理想的建模方法。 2、外源性透明質(zhì)酸鈉行關(guān)節(jié)腔注射治療可以促進狗的TMJOA髁突軟骨的修復(fù),其具體機制可能為通過促進蛋白多糖的聚集,避免了蛋白多糖的繼續(xù)流失,阻礙了TMJOA的進一步進展。
【學位單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R782.6
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、狗的顳下頜骨關(guān)節(jié)病模型的建立
    1.1 材料和方法
        1.1.1 主要試劑、藥品
        1.1.2 主要儀器、設(shè)備
        1.1.3 實驗動物及造模方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 右側(cè)正常對照組
        1.2.2 實驗側(cè)關(guān)節(jié)組組織病理學表現(xiàn)
    1.3 討論
        1.3.1 顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病動物模型的建立及其評價
        1.3.2 膠原酶誘發(fā)顳下頜骨關(guān)節(jié)病的病理機制
        1.3.3 顳下頜骨關(guān)節(jié)病的病理過程
    1.4 小結(jié)
二、透明質(zhì)酸鈉修復(fù)顳下頜骨關(guān)節(jié)病髁突軟骨的實驗研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 主要試劑、藥品
        2.1.2 主要儀器、設(shè)備
        2.1.3 實驗動物、方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 改良Mankin骨關(guān)節(jié)病組織學評分結(jié)果
        2.2.2 組織學評分的統(tǒng)計結(jié)果
        2.2.3 番紅O染色結(jié)果
    2.3 討論
        2.3.1 透明質(zhì)酸鈉對TMJ關(guān)節(jié)的生理作用
        2.3.2 透明質(zhì)酸鈉治療TMJOA的機制探討
        2.3.3 透明質(zhì)酸鈉治療TMJOA的組織學評價
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病治療的研究現(xiàn)狀
    綜述參考文獻
致謝

【參考文獻】

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