在煙草的毒性物質(zhì)中，尼古丁是主要成分。它是煙草中的生物堿，無(wú)論是主動(dòng)吸煙或被動(dòng)吸煙，作為煙草的活性成分，進(jìn)入母體血液中的尼古丁可迅速通過(guò)胎盤(pán)分布，對(duì)正在發(fā)育的胎兒產(chǎn)生影響。它不僅影響胎兒的全身發(fā)育過(guò)程，而且干擾了子代頜面部的腭、舌，尤其是牙齒的發(fā)育。流行病學(xué)調(diào)查表明，吸煙可影響子代牙齒發(fā)育，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究也觀察到尼古丁可造成牙胚體積縮小，發(fā)育遲緩等現(xiàn)象。以往的研究中，人們雖然在形態(tài)學(xué)方面觀察到尼古丁對(duì)牙胚發(fā)育的影響，但是尼古丁通過(guò)何種途徑、怎樣影響牙胚發(fā)育的研究，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道，很有必要深入研究。本研究目的是探討尼古丁對(duì)小鼠牙胚發(fā)育的影響和可能機(jī)制，共進(jìn)行了4個(gè)部分的13個(gè)實(shí)驗(yàn)： 1．尼古丁對(duì)小鼠牙胚發(fā)育影響的形態(tài)學(xué)研究 選用Balb/c鼠54只，按雌、雄比例3:1同籠，將26只孕鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組妊娠鼠以1.67mg/kS／d腹膜腔注射尼古丁硫酸鹽，注射天數(shù)為孕齡6d～20d，在孕齡16d、18d及20d處死動(dòng)物。從各組胎鼠中選出3～5只行常規(guī)組織學(xué)制片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。從20d孕鼠的胎鼠選出3～5只制做透射電鏡標(biāo)本，電鏡下觀察。結(jié)果，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組胎鼠存活數(shù)下降，體重減少；光鏡下見(jiàn)對(duì)照組各組牙胚分別處于其相應(yīng)的牙胚發(fā)育時(shí)期，各時(shí)期的牙胚發(fā)育正常；實(shí)驗(yàn)組與相同時(shí)期對(duì)照組牙胚組織相比體積減小，發(fā)育遲緩，細(xì)胞數(shù)減少，分化程度減弱；電鏡下見(jiàn)對(duì)照組牙胚細(xì)胞胞漿豐富，核仁清晰和線粒體嵴豐滿，核內(nèi)可見(jiàn)到核絲分裂像，而實(shí)驗(yàn)組牙胚細(xì)胞縮小，核仁不清晰、線粒體腫脹、基質(zhì)變淡和嵴消失，細(xì)胞 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 內(nèi)出現(xiàn)空泡，開(kāi)始變性。說(shuō)明，尼古丁抑制了鼠牙胚的生長(zhǎng)發(fā)育。證實(shí)，尼 古丁對(duì)胎鼠發(fā)育中的牙胚和細(xì)胞有一定的毒害作用。 0 2．尼古丁作用下小鼠牙胚發(fā)育中煙堿受體表達(dá)的研究 在孕齡 16 d、18 d、20 d處死孕鼠，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各取 3—5只胎鼠制 備標(biāo)本，以人抗煙堿受體抗體行免疫組化染色：取以上各組胎鼠牙胚，分別 提取牙胚組織的蛋白和 RNA，進(jìn)行 Western blot和 RT－PCR。免疫組化結(jié)果 觀察到，正常發(fā)育的牙胚組織中存在nAChR的表達(dá)，尼古丁作用于牙胚組 織后，使發(fā)育中牙胚組織 nAChR的表達(dá)上調(diào)；Western hi仇和 RTFCR結(jié)果 表明，正常發(fā)育的牙胚組織中存在 nAChR。，蛋白和 dChR a，mRNA；尼 古丁作用于牙胚組織后，可使發(fā)育中牙胚組織dChR a，蛋白和nAChR a。 rnRNA表達(dá)上調(diào)。本部分研究結(jié)果在蛋白和InRNA水平證實(shí)了正常發(fā)育的 牙胚組織中存在dChR，尼古丁作用于牙胚組織后，可上調(diào)發(fā)育中牙胚組 織dChR蛋白和InRNA的表達(dá)，提示，nAChR可能介導(dǎo)了尼古丁對(duì)牙胚 生長(zhǎng)發(fā)育的影響。 3．a(chǎn)－銀環(huán)蛇毒素對(duì)尼古丁作用下小鼠外胚間充質(zhì)細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)周期及鈣 離子濃度變化的研究 本部分研究有5個(gè)實(shí)驗(yàn)，即：（）采用酶消化法建立Balb／。鼠未分化外 胚間充質(zhì)細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�；（二）采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)外胚間充質(zhì)細(xì) 胞的 nAChR的表達(dá)；D）采用 Mrs法觀察在 nAChR桔抗劑 a－Bgt的作用 下，尼古丁對(duì)外胚間充質(zhì)細(xì)胞增殖的抑制作用；（4）采用FCM觀察在dCbR 桔抗劑階＊寥的作用下，尼古丁作用于外胚間充質(zhì)細(xì)胞后其細(xì)胞周期的變化： （5）采用熒光標(biāo)記示蹤法與激光共聚焦掃描技術(shù)共用的方法觀察在dChR 桔抗劑a習(xí)gt的作用下，尼古丁造成外胚間充質(zhì)細(xì)胞內(nèi)Caz”濃度變化的情況。 3 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 結(jié)果，（）在本實(shí)驗(yàn)條件下，培養(yǎng)的的外胚間充質(zhì)細(xì)胞性能是穩(wěn)定的，可用 于實(shí)驗(yàn)：（2）觀察到鼠外胚間充質(zhì)細(xì)胞存在nA＊hR；（3）尼古丁對(duì)細(xì)胞增 殖的抑制作用降低；N）尼古丁和 a－Bgt共同作用組可明顯升高 s期、降低 G期細(xì)胞的百分比，表明，尼古丁對(duì)間充質(zhì)細(xì)胞增殖的抑制作用減弱；（5） nAChR g抗劑aEgt可阻斷尼古丁造成的細(xì)胞內(nèi)Ca升濃度升高。證實(shí)：鼠外 胚間充質(zhì)細(xì)胞存在dChR。推測(cè)尼古丁對(duì)外胚間充質(zhì)細(xì)胞的作用可能是由 nAChR介導(dǎo)的，nAChR可能介導(dǎo)了尼古丁對(duì)牙胚生長(zhǎng)發(fā)育的影響。 4．尼古丁作用下小鼠牙胚發(fā)育中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因于表達(dá)的研究 本組實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)、Western blot和 RT－PCR的方法，對(duì)尼古 丁作用于牙胚組織后TGF p；表達(dá)的變化在蛋白和InRNA水平進(jìn)行了研究。 結(jié)果，正常牙胚的各發(fā)育時(shí)期，在牙胚的內(nèi)釉上皮細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞和牙 乳頭組織中都呈現(xiàn)TGF pl陽(yáng)性表達(dá)，實(shí)驗(yàn)組各階段TGF－el的陽(yáng)性信號(hào)均 較對(duì)照組減弱。
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2002
【中圖分類(lèi)】：R780.2
【文章目錄】：
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 尼古丁對(duì)小鼠牙胚發(fā)育的形態(tài)學(xué)研究
第二部分 尼古丁作用下小鼠牙胚發(fā)育中煙堿受體表達(dá)的研究
第三部分 α-銀環(huán)蛇毒素對(duì)尼古丁作用下小鼠外胚間充質(zhì)細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)周期及鈣離子濃度變化的研究
第四部分 尼古丁作用下小鼠牙胚發(fā)育中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β表達(dá)的研究
全文總結(jié)
致謝
簡(jiǎn)歷
附圖

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 夏雪雁,彭仁琇;CYP2A6多態(tài)性對(duì)尼古丁代謝及煙草依賴(lài)行為的影響[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2004年09期

2 王琦;;近年來(lái)煙草公司提高煙中尼古丁含量[J];心血管病防治知識(shí);2007年04期

3 馬鳳閣,耿貫一,劉黛莉,吳敬;被動(dòng)吸煙者尿中尼古丁含量的測(cè)定[J];職業(yè)與健康;1995年06期

4 盛竹玲;臺(tái)灣專(zhuān)訊[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);1995年14期

5 菲琳;;尼古丁對(duì)嬰兒死亡的致命作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);1995年23期

6 黃繼英;尼古丁治療壞疽性膿皮病[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);1999年03期

7 ;尼古丁可能是個(gè)“好同志”[J];養(yǎng)生大世界;2006年07期

8 王慶昱;王小競(jìng);;尼古丁對(duì)牙周炎相關(guān)細(xì)胞影響的研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2009年06期

9 魏風(fēng);;戒煙藥,騙走你的煙癮[J];家庭藥師;2010年06期

10 陳瑞梅;;尼古丁口炎一例報(bào)告[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1983年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王小競(jìng);尼古丁對(duì)鼠牙胚發(fā)育影響的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

2 李琪;尼古丁在吸煙導(dǎo)致氣道慢性炎癥中的獨(dú)特效應(yīng)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

3 徐添穎;尼古丁對(duì)血管功能和胰島素敏感性的影響及機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 安佰義;煙草尼古丁去甲基化酶的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];吉林大學(xué);2011年

5 周穎;α7煙堿型乙酰膽堿受體激動(dòng)劑對(duì)細(xì)胞損傷與保護(hù)的影響[D];上海交通大學(xué);2010年

6 汪志剛;煙堿受體激動(dòng)劑和拮抗劑對(duì)Aβ蛋白誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2011年

7 高豐光;尼古丁刺激DCs抗腫瘤機(jī)制及腫瘤微環(huán)境DCs失能研究[D];上海交通大學(xué);2008年

8 金宇;尼古丁介導(dǎo)的VTA DA神經(jīng)元谷氨酸能突觸可塑性的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

9 成曉龍;1、尼古丁對(duì)內(nèi)皮損傷的影響及其作用機(jī)制的探討2、胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞的初步研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

10 黃雪竹;兒童注意缺陷多動(dòng)障礙相關(guān)因素、臨床表現(xiàn)特征、尼古丁煙堿受體α4亞單位基因多態(tài)性及單倍型研究[D];四川大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 杜艷;尼古丁對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶平衡的影響及其作用機(jī)制[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

2 尹彪;尼古丁降解菌的分離、鑒定及其應(yīng)用研究[D];湖南科技大學(xué);2010年

3 王勇;乙酰膽堿酯酶在人牙周膜細(xì)胞中的表達(dá)和尼古丁與-銀環(huán)蛇毒素對(duì)其表達(dá)的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 袁乾家;尼古丁類(lèi)似物的設(shè)計(jì)合成[D];華東理工大學(xué);2011年

5 江吉紅;尼古丁降解菌的篩選鑒定及降解特性的研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2011年

6 陳晨;根瘤菌5-28的鑒定及其尼古丁代謝途徑的研究[D];江蘇科技大學(xué);2012年

7 俞峰;妊娠期尼古丁對(duì)胎兒和子代心律失常的影響[D];蘇州大學(xué);2010年

8 葛鑫;膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶在人牙周膜細(xì)胞中的表達(dá)及尼古丁對(duì)其表達(dá)的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

9 扈麗娟;尼古丁對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞纖溶損害的機(jī)制及辛伐他汀的干預(yù)作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 薄美玉;尼古丁對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞纖溶功能的影響及其與內(nèi)皮素-I和白介素-6的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2867527