間歇性、周期性下頜前伸力對髁突Runx2,X型膠原表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2020-10-30 13:51
目的: 安氏Ⅱ類錯牙合不僅影響患者的咀嚼功能、顏面美觀、顳下頜關(guān)節(jié)(Temporo-mandibular joint,TMJ)的健康、還可能誘發(fā)心理社會問題。正畸醫(yī)生一直在努力尋找能替代傳統(tǒng)治療手段的新方法、新技術(shù)來高效、快速地促進(jìn)TMJ的改建及下頜骨的生長。近來,學(xué)者們研究發(fā)現(xiàn)適宜的周期性機(jī)械刺激能促進(jìn)軟骨及骨的形成,但以往并沒有研究涉及周期性下頜前伸力對髁突成骨作用的影響。作為軟骨內(nèi)成骨的重要調(diào)控因子及標(biāo)志物,Runx2(runt-related transcription factor2)及Ⅹ型膠原的表達(dá)水平反映了TMJ的生長、改建情況,因此本實驗擬研究間歇性、周期性下頜前伸力對大鼠髁突Runx2及Ⅹ型膠原表達(dá)的影響。 方法: 實驗選取28只5周齡雄性wistar大鼠,實驗動物隨機(jī)分配到周期性下頜前伸組、靜止性下頜前伸組、功能性下頜前伸組及陰性對照組。實驗開始后,建立“周期性、靜止性、功能性下頜前伸動物模型”。周期性下頜前伸組(動態(tài))每天接受周期性下頜前伸力,頻率0.5Hz,時間60分;靜止性下頜前伸組(靜態(tài))每天接受靜止性下頜前伸力,頻率0Hz,時間60分;功能性下頜前伸組(功能)每天接受24小時功能性矯治力;陰性對照組(對照)不接受下頜前伸力。實驗共進(jìn)行2周。實驗結(jié)束時取雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)及周圍組織,固定脫鈣后沿髁突長軸常規(guī)石蠟切片,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,運用Image-ProPlus6.0軟件對各組切片Runx2、Ⅹ型膠原的表達(dá)進(jìn)行半定量分析。實驗所得數(shù)據(jù)通過SPSS17.0(漢化)統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析及獨立樣本t檢驗。 結(jié)果: 4個組別Runx2陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)、Runx2陽性表達(dá)面積及Ⅹ型膠原陽性表達(dá)面積均具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.001。 1.動態(tài)組Runx2陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)高于靜態(tài)組,P<0.01;動態(tài)組及對照組Runx2陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)均高于功能組,P<0.001;靜態(tài)組Runx2陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)低于對照組,但高于功能組,且P<0.05。 2.動態(tài)組及對照組Runx2陽性表達(dá)面積均高于靜態(tài)組,P<0.001;動態(tài)組、靜態(tài)組、對照組Runx2陽性表達(dá)面積均高于功能組,P<0.001或P<0.01。 3.動態(tài)組、靜態(tài)組及對照組Ⅹ型膠原陽性表達(dá)面積均高于功能組,P<0.001;動態(tài)組Ⅹ型膠原陽性表達(dá)面積高于對照組及靜態(tài)組,P<0.001。 結(jié)論: 1.不同作用方式及作用時間的下頜前伸力差異性調(diào)節(jié)髁突軟骨細(xì)胞Runx2及Ⅹ型膠原的表達(dá)水平。 2.周期性下頜前伸力(動態(tài)組)與靜止性下頜前伸力(靜態(tài)組、功能組)相比,能顯著增加髁突Runx2及Ⅹ型膠原表達(dá)水平。 3.間歇性下頜前伸力(動態(tài)組、靜態(tài)組)與持續(xù)性下頜前伸力(功能組)相比,能顯著提高髁突Runx2及Ⅹ型膠原表達(dá)水平。
【學(xué)位單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2012
【中圖分類】:R783.5
【部分圖文】:
24]。需要明確的是,這些分層只是為了便于研究而人為劃分的結(jié)構(gòu),真正的髁突各層之間是逐漸移形過渡的,并沒有截然的分界。如圖2.1。圖 2.1 髁突組織學(xué)結(jié)構(gòu)及模式圖關(guān)節(jié)窩與髁突的結(jié)構(gòu)相似,但關(guān)節(jié)窩沒有肥大層。關(guān)節(jié)層由致密的纖維組織組成,關(guān)節(jié)層之下富于未分化的、扁平形的間充質(zhì)細(xì)胞,最內(nèi)層是骨組織[23]。髁突與關(guān)節(jié)窩之間為纖維結(jié)締組織——關(guān)節(jié)盤。2.2 TMJ 的改建2.2.1 軟骨內(nèi)成骨過程中重要的調(diào)控因子——Runx2脊椎動物的骨形成需要經(jīng)歷骨膜內(nèi)成骨或軟骨內(nèi)成骨。髁突骨的形成即經(jīng)歷軟骨內(nèi)成骨——間充質(zhì)細(xì)胞聚集,多潛能的間充質(zhì)干細(xì)胞分化為未成熟的軟骨細(xì)胞并表達(dá)Ⅱ型膠原,未成熟的軟骨細(xì)胞增殖,進(jìn)一步分化為肥大的軟骨細(xì)胞并分泌Ⅹ型膠原,Ⅹ型膠原的分泌意味著軟骨內(nèi)成骨的開始。Runx2 在軟骨細(xì)胞的終末分化過程中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用,其發(fā)揮正常功能是軟骨內(nèi)成骨的先決條件[21, 22,
圖 3.3 大鼠下頜前方牽引裝置3.3.3 建立大鼠“功能性下頜前伸動物模型”于麻醉下,給大鼠上、下頜牙列取印模,并灌注石膏模型。在石膏模型上利用自凝塑料制作功能性下頜前伸裝置(模型建立參照 Rabie 等人的研究,并進(jìn)行改良[36])。功能性下頜前伸裝置制作完成后,粘固于上下頜牙列上。功能性下頜前伸裝置戴入后,保持下頜處于最大前伸位。實驗中每 3 天檢查功能性下頜前伸裝置,如有磨耗,則添補(bǔ)自凝塑料,使其保持前伸狀態(tài)。3.3.4 不同作用方式、作用時間下頜前伸力對 TMJ 改建的影響動物模型建立后根據(jù)設(shè)立的實驗組和對照組,按照設(shè)定的相關(guān)參數(shù)(力的方式、頻率、時間)接受下頜前伸力刺激,周期性下頜前伸組(動態(tài))每天接受周期性下頜前伸力,頻率 0.5Hz,時間 60 分;靜止性下頜前伸組(靜態(tài))每天接受靜止性下頜前伸力,頻率 0Hz,時間 60 分;功能性下頜前伸組(功能)每天接受 24 小時功能性矯治力;
使矩形的一半處于關(guān)節(jié)盤附著最前點之前,一半處于關(guān)節(jié)盤附著最前點之后(圖3.4),運用 Image-Pro Plus6.0 軟件對各組切片納入范圍內(nèi)的 Runx2、Ⅹ型膠原的表達(dá)進(jìn)行半定量分析。計數(shù)時,排除面積小于 5μm2的陽性表達(dá),以消除雜質(zhì)點對實驗的干擾。本實驗所得數(shù)據(jù)通過 SPSS17.0(漢化)統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析及獨立樣本 t 檢驗。本實驗對 Runx2 及Ⅹ型膠原的表達(dá)水平均進(jìn)行了兩次測量,時間間隔兩周。并采用配對樣本 t 檢驗對兩次測量結(jié)果進(jìn)行檢驗,結(jié)果顯示,兩次測量結(jié)果之間并無統(tǒng)計學(xué)差異。圖 3.4 測量區(qū)域
【參考文獻(xiàn)】
本文編號:2862561
【學(xué)位單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2012
【中圖分類】:R783.5
【部分圖文】:
24]。需要明確的是,這些分層只是為了便于研究而人為劃分的結(jié)構(gòu),真正的髁突各層之間是逐漸移形過渡的,并沒有截然的分界。如圖2.1。圖 2.1 髁突組織學(xué)結(jié)構(gòu)及模式圖關(guān)節(jié)窩與髁突的結(jié)構(gòu)相似,但關(guān)節(jié)窩沒有肥大層。關(guān)節(jié)層由致密的纖維組織組成,關(guān)節(jié)層之下富于未分化的、扁平形的間充質(zhì)細(xì)胞,最內(nèi)層是骨組織[23]。髁突與關(guān)節(jié)窩之間為纖維結(jié)締組織——關(guān)節(jié)盤。2.2 TMJ 的改建2.2.1 軟骨內(nèi)成骨過程中重要的調(diào)控因子——Runx2脊椎動物的骨形成需要經(jīng)歷骨膜內(nèi)成骨或軟骨內(nèi)成骨。髁突骨的形成即經(jīng)歷軟骨內(nèi)成骨——間充質(zhì)細(xì)胞聚集,多潛能的間充質(zhì)干細(xì)胞分化為未成熟的軟骨細(xì)胞并表達(dá)Ⅱ型膠原,未成熟的軟骨細(xì)胞增殖,進(jìn)一步分化為肥大的軟骨細(xì)胞并分泌Ⅹ型膠原,Ⅹ型膠原的分泌意味著軟骨內(nèi)成骨的開始。Runx2 在軟骨細(xì)胞的終末分化過程中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用,其發(fā)揮正常功能是軟骨內(nèi)成骨的先決條件[21, 22,
圖 3.3 大鼠下頜前方牽引裝置3.3.3 建立大鼠“功能性下頜前伸動物模型”于麻醉下,給大鼠上、下頜牙列取印模,并灌注石膏模型。在石膏模型上利用自凝塑料制作功能性下頜前伸裝置(模型建立參照 Rabie 等人的研究,并進(jìn)行改良[36])。功能性下頜前伸裝置制作完成后,粘固于上下頜牙列上。功能性下頜前伸裝置戴入后,保持下頜處于最大前伸位。實驗中每 3 天檢查功能性下頜前伸裝置,如有磨耗,則添補(bǔ)自凝塑料,使其保持前伸狀態(tài)。3.3.4 不同作用方式、作用時間下頜前伸力對 TMJ 改建的影響動物模型建立后根據(jù)設(shè)立的實驗組和對照組,按照設(shè)定的相關(guān)參數(shù)(力的方式、頻率、時間)接受下頜前伸力刺激,周期性下頜前伸組(動態(tài))每天接受周期性下頜前伸力,頻率 0.5Hz,時間 60 分;靜止性下頜前伸組(靜態(tài))每天接受靜止性下頜前伸力,頻率 0Hz,時間 60 分;功能性下頜前伸組(功能)每天接受 24 小時功能性矯治力;
使矩形的一半處于關(guān)節(jié)盤附著最前點之前,一半處于關(guān)節(jié)盤附著最前點之后(圖3.4),運用 Image-Pro Plus6.0 軟件對各組切片納入范圍內(nèi)的 Runx2、Ⅹ型膠原的表達(dá)進(jìn)行半定量分析。計數(shù)時,排除面積小于 5μm2的陽性表達(dá),以消除雜質(zhì)點對實驗的干擾。本實驗所得數(shù)據(jù)通過 SPSS17.0(漢化)統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析及獨立樣本 t 檢驗。本實驗對 Runx2 及Ⅹ型膠原的表達(dá)水平均進(jìn)行了兩次測量,時間間隔兩周。并采用配對樣本 t 檢驗對兩次測量結(jié)果進(jìn)行檢驗,結(jié)果顯示,兩次測量結(jié)果之間并無統(tǒng)計學(xué)差異。圖 3.4 測量區(qū)域
【參考文獻(xiàn)】
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1 徐婷;林新平;谷志遠(yuǎn);;生物機(jī)械應(yīng)力對下頜髁突適應(yīng)性改建的影響[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年01期
本文編號:2862561
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/kouq/2862561.html
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